Effect of γ-ray on metabolic enzyme CYP3A1 in rat liver on multiple levels北大核心CSCD

Aim To explore the effect of γ-ray on the mRNA,protein expression levels and metabolic activity level of the key drug metabolic enzyme CYP3A1 in rat liver. Methods Wistar rats were randomly divided into control group, 24 h post-radiation group and 72 h post-radiation group. The experimental group was exposed to total body irradiation of single 6 Gy γ-ray. Blood was collected from the orbital venous plexus for blood routine examination and biochemical analysis 24 h and 72 h after irradiation, and liver tissue was prepared for quantifying expression of CYP3A1 mRNA and liver-specific microRNA (miR-122-5p) through RT-PCR. The expression level of CYP3A1 protein was analyzed by Western blot, and the metabolic activity level of CYP3A1 detected by the specific substrate midazolam combined with LC-MS method. Results Com¬pared with the control group, the weights of the rats in the radiation group significantly decreased, and the number of white blood cells was markedly reduced. Simultaneously, the activities of alanine aminotrans-ferase and alkaline phosphatase continuously descended, as well as the levels of total bilirubin and bile acid significantly increased, which indicated that the liver may be damaged after radiation. The relative expression of CYP3A1 mRNA continued to increase significantly 24 h and 72 h after irradiation. CYP3A1 protein expression and metabolic activity levels showed an obvious increasing trend 24 h after irradiation, and rose significantly 72 h after irradiation compared with the control group. At the same time, the expression of miR-122-5p in liver of rats in the 24 h and 72 h post-radiation group continued to decrease rapidly compared with the control group. Conclusions γ-ray radiation may arouse damage effect on liver, which leads to the continuous up-regulation of the mRNA and protein expression levels of the capital metabolic enzyme CYP3A1 in liver tissue, as well as the elevation of the metabolic activity level. The regulatory mechanism might be related to miR-122-5p. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

红景天苷通过miRNA-210-3p/E2F3抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨红景天苷（salidroside，Sal）通过miRNA-210-3p/E2F3对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:通过生物信息网站分析miR-210-3p及其靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达及生存影响。采用免疫组化法检测肺腺癌组织和正常组织中E2F3蛋白的表达；qRT-PCR检测NSCLC细胞中miR-210-3p和E2F3基因表达；Western blot检测NSCLC细胞中E2F3蛋白表达；CCK-8、细胞划痕及克隆形成实验分别检测红景天苷和miR-210-3p对NSCLC细胞增殖、迁移及克隆形成的影响。结果:生物信息网站显示miR-210-3p和E2F3在肺腺癌组织中高表达，且与不良预后相关。Sal以时间-浓度依赖抑制NSCLC细胞的增殖活性（P＜0.05），并显著降低NSCLC细胞的迁移及克隆形成能力（P＜0.05），而低浓度Sal对正常肺上皮细胞的增殖无明显抑制效果。miRNA-210-3p和E2F3表达在NSCLC细胞中上调（P＜0.05），Sal可抑制二者表达（P＜0.05）。与对照组比较，miR-210-3p inhibitor组E2F3表达上调（P＜0.05），miR-210-3p mimics组E2F3表达被抑制（P＜0.05），Sal与miR-210-3p mimics联用进一步抑制了miR-210-3p mimics所致的E2F3表达下调和细胞增殖和迁移的增强作用（P＜0.05）。结论:miR-210-3p和E2F3在肺腺癌中高表达，Sal可通过时间-浓度依赖负调控miRNA-210-3p/E2F3影响 NSCLC细胞的生物学行为，发挥抗癌作用。     

通督调神针刺法治疗急性脑梗死病人的临床疗效观察及疗效机制探讨

目的 观察通督调神针刺法治疗急性脑梗死病人的疗效，探讨通督调神针刺治疗急性脑梗死病人的疗效机制。方法 前瞻性研究 2021年 4月至 2022年 10月合肥市第一人民医院住院的 72例急性脑梗死病人按随机抽签法随机分成观察组 38法例(通督调神针刺法治疗)和对照组 34例(常规针刺法治疗)。两组病人纳入研究前均错过最佳溶栓时间窗，未给予溶栓治疗，全部给予调节血糖、血压、抗血小板聚集、稳定斑块、改善脑循环及神经保护等基础治疗。观察组按通督调神针刺法选取水沟、百会、风府、大椎、至阳、腰阳关等督脉穴位，对照组按普通针刺法选取血海、内关、极泉、尺泽、三阴交、委中等穴位，均针刺 1次/天，每次留针 40 min，每周治疗 6次，共治疗 4周。使用神经功能评分量表( NIHSS评分量表)、运动功能评分量表( FMA评分量表)和日常生活能力评分量表( MBI评分量表)对两组病人治疗前及治疗 4周后进行评分，同时测定两组病人治疗前及治疗 4周后血清微 RNA-320(miRNA-320)、胰岛素样生长因子 -1(IGF-1)的表达水平。结果治疗 4周后，对照组、观察组 NIHSS评分［(16.82±1.29)、(15.97±1.72)分］、 miRNA-320表达水平［(0.90±0.98)、(0.50±0.45)mg/L］均较治疗前［ NIHSS评分为( 17.35±1.65)、(17.53±1.66)分， miRNA-320表达( 1.86±1.47)、(1.79±1.84)mg/L］明显下降( P<0.05)且观察组 NIHSS评分、 miRNA-320表达水平降低程度均显著大于对照组( P<0.05)；两组 FMA评分、 MBI评分、 IGF-1表达水平治疗前明显升高(P<0.05)且观察组 FMA评分、 MBI评分、 IGF-1表达水平升高程度显著大于对照组( P<0.05)。治疗 4周后观察组的总有效率为 94.74均较，%(36/，38)，对照组的总有效率为 85.29%(29/34)(P<0.05)。结论通督调神针刺法和普通针刺法均能改善急性脑梗死病人神经功能、运动功能及日常生活能力，且通督调神针刺组临床疗效显著高于普通针刺组，其机制可能是通过抑制 miRNA-320表达并上调 IGF-1的表达所致。     

MicroRNA-122介导Mex3a表达抑制膀胱癌细胞恶性生物学行为的机制研究

目的 探究miR-122介导Mex3a表达抑制膀胱癌细胞增殖、迁移，促进细胞凋亡的发生机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-122和Mex3a在正常人膀胱上皮细胞SVHUC-1和人膀胱癌细胞系T24和HT1376中的表达。构建过表达miR-122和低表达Mex3a的T24细胞，并通过CCK-8法、细胞划痕实验和流式细胞术评估miR-122和Mex3a对膀胱癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。双萤光素酶实验验证miR-122和Mex3a的靶向关系。在过表达miR-122的细胞中进一步过表达Mex3a，检测细胞增殖、迁移、凋亡和PI3K/Akt信号通路的变化。结果 SVHUC-1细胞miR-122相对表达量较T24、HT1376细胞高（P <0.05）,Mex3a mRNA相对表达量较T24、HT1376细胞低（P <0.05）。miR-122 mimic组miR-122相对表达量较mimic NC组高（P <0.05）。mimic NC组与miR-122 mimic组在0、24、48、72 h的T24细胞吸光度值比较，经重复测量设计的方差分析，结果：(1)不同时间...     

微 RNA-29在糖尿病周围神经病变中的研究进展

糖尿病周围神经病变( diabetic peripheral neuropathy，DPN)是慢性高血糖引起微血管损伤的主要表现之一。迄今为止，关于 DPN的发病机制尚不完全清楚。近几年，随着生物信息学和高通量测序技术的崛起，有研究报道 miRNA-29可能参与了 DPN的发病过程中的氧化应激、慢性炎症、胰岛素抵抗、血管内皮功能障碍等病理生理环节，但具体机制尚不明确。以下综述 miRNA-29在 DPN中的研究现状，以期为 DPN的早期防治提供新的诊疗思路。     

MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的 探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系.方法 采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清m...     

MiR-122通过靶向SIRT1抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的?探讨微小RNA-122（microRNA-122, miR-122）通过靶向沉默信息调节因子1（silent information regulator 1, SIRT1）对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法?用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）法检测肝癌组织和细胞中miR-122和SIRT1 mRNA表达水平；用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析并验证miR-122和SIRT1靶向关系。培养肝癌细胞HepG2，将其分为空白对照组（control组）、miR-122过表达阴性对照组（miR-NC mimic组）、miR-122过表达组（miR-122 mimic组）、miR-122过表达和SIRT1过表达阴性对照组（miR-122 mimic+pcDNA组）、miR-122过表达和SIRT1过表达组（miR-122 mimic+pcDNA-SIRT1组）。用细胞计数试剂（cell counting kit-8, CCK-8）和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷分析各组细胞增殖情况；划痕愈合实验和Transwell实验分析各组细胞迁移和侵袭能力；用Western blot法分析各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白p53、细胞周期蛋白D1、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白和波形蛋白及SIRT1蛋白表达水平。结果?MiR-122表达水平在肝癌组织和细胞中下调，SIRT1 mRNA表达水平在肝癌组织和细胞中上调（P＜0.05）。MiR-122负靶向调控SIRT1表达（P＜0.05）。过表达miR-122抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭，降低SIRT1、细胞周期蛋白D1、N-钙粘蛋白和波形蛋白蛋白水平，升高p53和E-钙粘蛋白蛋白水平（P＜0.05）。然而，SIRT1过表达可部分逆转过表达miR-122对HepG2细胞的作用（P＜0.05）。结论?MiR-122通过负靶向调控SIRT1抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-122-5p靶向KDM2A对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的 探讨miR-122-5p靶向组蛋白去甲基化酶2A（histone demethylation protein 2A, KDM2A）对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法 体外培养人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC），利用qRT-PCR和Western blot方法检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC成骨相关指标（OPN、OCN和RUNX2）表达情况的影响；茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC钙沉积和碱性磷酸酶活性的影响；双荧光素酶实验验证miR-122-5p和KDM2A之间的结合关系；miR-122-5p inhibitor和si-KDM2A共转染研究两者对BMSC成骨分化的影响。结果 miR-122-5p mimic和si-KDM2A能够促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性，miR-122-5p和KDM2A两者之间存在靶向结合关系，且miR-122-5p能够靶向抑制KDM2A表达，进而促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性。结论 miR-122-5p靶向抑制KDM2A表达，进而促进BMSC成骨分化。