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981.
目的研究miR-16在大肠癌组织中的表达及其在大肠癌细胞株HCT116和LoVo细胞增殖中的作用。方法运用Realtime PCR法检测miR-16在33对配对肠癌及癌旁正常组织中的表达。HCT116和LoVo细胞转染miR-16 抑制剂、阴性对照剂和模拟剂;CCK8法检测细胞增殖;流式细胞仪进行细胞周期检测;Western blot法检测细胞中cyclinD1、CDK6和GAPDH蛋白表达。结果(1)Realtime PCR结果显示miR-16在大肠癌组织中低表达(P=0.047)。(2)miR-16过表达可抑制HCT116和LoVo细胞增殖,诱导细胞G0/G1期阻滞,降低cyclinD1和CDK6蛋白表达。结论miR-16过表达可以抑制大肠癌细胞的增殖能力。 相似文献
982.
背景与目的:肿瘤组织和细胞中的miR-21先后被证实与肿瘤对化疗药物的敏感性有关,高表达miR-21提示肿瘤对多种化疗药物不敏感。外周血蕴含丰富的肿瘤信息,为个体化药物治疗提供了新的检测来源。本研究初步探讨胃癌组织和血浆循环miR-21表达水平与胃癌铂类药物和伊立替康敏感性之间的关系。方法:系统收集35例经病理确诊的新鲜人胃癌标本,采用三维微组织块培养法行两种药物的体外敏感试验;实时荧光定量PCR检测血浆和对应胃癌石蜡组织中miR-21表达水平。结果:血浆miR-21与对应肿瘤组织miR-21呈正相关(rho=0.736, P<0.001)。血浆miR-21水平与性别、年龄、病理类型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤部位无统计学相关性,但是Ⅱ期和Ⅲ期的miR-21水平较Ⅰ期有偏高的趋势。铂类药物敏感组与耐药组肿瘤组织miR-21相对表达量分别为1.32(95%CI:0.73~1.90)和4.06(95%CI:1.71~6.41),差异无统计学意义(P=0.004);铂类药物敏感组与耐药组血浆miR-21相对表达量分别为5.25(95%CI:0.14~10.64)和5.82(95%,差异无统计学意义CI:2.27~9.37),差异无统计学意义(P=0.19)。伊立替康敏感组与耐药组肿瘤组织miR-21相对表达量分别为1.09(95%CI:0.65~1.54)和4.94(95%CI:2.44~7.44),差异无统计学意义(P<0.001);伊立替康敏感组与耐药组血浆miR-21相对表达量分别为1.86(95%CI:1.08~2.64)和12.42(95%CI:3.14~21.70)差异无统计学意义(P=0.001)。结论:血浆循环miR-21与对应肿瘤组织miR-21水平呈显著正相关,在一定程度上能反映肿瘤组织miR-21的水平。血浆miR-21水平与新鲜胃癌组织对伊立替康的敏感性呈负相关,肿瘤组织miR-21水平与新鲜胃癌组织对伊立替康和铂类药物的敏感性呈负相关。 相似文献
983.
miR-126 Suppresses the Proliferation of Cervical Cancer Cells and Alters Cell Sensitivity to the Chemotherapeutic Drug Bleomycin 下载免费PDF全文
《Asian Pacific journal of cancer prevention》2013,14(11):6569-6572
In cervical cancer, one of the most common malignant tumors in women worldwide, miR-126 has been reportedto exhibit decreased expression. However, its role in cervical cancer cell proliferation and drug sensitivity hasremained relatively unexplored. Here, we compared the expression of miR-126 in cervical cancer tissues (n =20) with that in normal cervical tissue (n = 20) using quantitative RT-PCR. The viability of Siha cervical cancercells was further measured by MTT assay after transfection with miR-126 mimic (Siha-miR-126 mimic) ormicroRNA mimic negative control (Siha-miR mimic NC) and after treatment with various concentrations ofbleomycin (BLM). IC50s were calculated, and the survival rates (SRs) of Siha cells were calculated. miR-126expression in cervical cancer tissue was significantly decreased compared with that in normal cervical tissue (P< 0.01). The relative SRs of Siha-miR-126 mimic cells were also significantly decreased compared with those ofSiha-miR mimic NC cells at 24-96 h after transfection. The IC50 of BLM in Siha-miR-126 mimic cells (50.3 ±2.02 μg/mL) was decreased compared with that in Siha-miR mimic NC cells (70.5 ± 4.33 μg/mL) at 48 h aftertransfection (P < 0.05). Finally, the SRs of Siha-miR-126 mimic cells were significantly lower than those of SihamiRmimic NC cells after cultured in medium containing 40 μg/mL BLM for 24–96 h (P < 0.05). These resultssuggest that miR-126 is expressed at low levels in cervical cancer. Upregulation of miR-126 inhibited cervicalcancer cell proliferation and enhanced the sensitivity to BLM. Thus, miR-126 may represent a novel approachto cervical cancer treatment. 相似文献
984.
背景:转录因子Runx2是调节成骨分化及骨发育的关键因子,过表达Runx2可诱导间质细胞C2C12分化为成骨细胞,但相关诱导分化分子机制并不清楚。 目的:分析miR-376家族成员在Runx2诱导C2C12细胞进行成骨分化过程中的作用。方法:利用可诱导表达Runx2的细胞系C2C12/Runx2Dox,在不同的时间点通过荧光定量PCR方法检测miR-376家族成员表达情况。C2C12/Runx2 Dox细胞转染miR-376b-3p mimic后利用荧光定量PCR检测成骨细胞标记基因碱性磷酸酶及骨钙素表达情况,并利用碱性磷酸酶染色法分析碱性磷酸酶活性。利用在线工具miRanda, miRWalk与TargetScan共同预测miR-376b-3p潜在靶基因。利用DAVID Bioinformatics Resources数据库对得到的靶基因进行功能聚类分析。结果与结论:在Runx2诱导C2C12进行成骨分化过程中miR-376b-3p表达显著增加,其他成员表达无明显变化。转染miR-376b-3p mimic可上调碱性磷酸酶表达,但对骨钙素表达无影响;转染miR-376b-3p mimic也可增加碱性磷酸酶活性。靶基因功能聚类分析结果表明miR-376b-3p可参与机体骨骼发育过程,表明其在成骨分化过程中的作用。研究结果表明,Runx2通过上调miR-376b-3p的方式对与成骨分化相关基因的表达进行调节,以促进C2C12进行成骨细胞的早期分化。 相似文献
985.
目的 构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法 以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36 h开始观察荧光标记,72 h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-146b的相应表达量。结果 成功构建人miR-146b慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到85%以上,miR-146b过表达水平可接近4倍。结论 本研究成功构建了人miR-146b慢病毒表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。 相似文献
986.
目的 观察胃癌组织中miR-29的表达情况及其与年龄、性别、分化程度、淋巴结转移、TNM分期和预后的关系,探讨miR-29在胃癌中表达的临床意义及其价值。方法 收集胃癌手术标本,采用Trizol试剂抽提总RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测86例胃癌组织中miR-29的表达水平,并对所有病例进行随访。结果 有淋巴结转移的胃癌患者miR-29低表达的比例显著高于无淋巴结转移组(59.6% vs.25.0%,P=0.004),Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者miR-29低表达的比例显著高于Ⅲ、Ⅳ期患者(63.8% vs.40.0%,P=0.029),miR-29与年龄、性别、分化程度无关。43例miR-29低表达胃癌患者的中位生存期为35.0月,3年生存率为39.6%;43例高表达者的中位生存期为44.0月,3年生存率为66.1%,两组差异显著(P=0.007)。结论 miR-29在胃癌组织中高表达能抑制肿瘤淋巴结转移进而改善预后,可作为胃癌的预后判断指标及治疗靶标。 相似文献
987.
988.
目的 检测不同miR-21表达水平的人肺癌细胞对培美曲塞的药物敏感性,并探讨可能作用机制。方法 采用Annexin V-EGFP荧光染色法定性检测及流式细胞术定量检测培美曲塞对不同miR-21表达水平的A549人肺癌细胞凋亡诱导作用,级联酶底物显色法检测caspase-3的活化状态,蛋白免疫杂交法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、 Bax的表达水平变化。结果 20μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导高表达miR-21的A549人肺癌细胞(A549-21H0)和低表达miR-21的A549细胞(A549-21L0)的凋亡,且A549-21L0处于细胞凋亡晚期,而A549-21H0处于细胞凋亡早期。5μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导65.3%的A549-21L0 细胞早期凋亡,仅诱导2.8%的A549-21H0细胞早期凋亡。5μmol/L培美曲塞作用6h即可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应超过2倍(P<0.01);在9h时活化效应最强,活化效应超过7倍(P<0.01);18h后活化效应超过6倍(P<0.01);至24h时活化效应仍在5倍以上(P<0.01)。同样条件下,5μmol/L培美曲塞作用18h才引起A549-21H0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应接近3倍(P<0.01),至24h活化效应在4倍以上(P<0.01)。5μmol/L培美曲塞作用于A549-21L0细胞9h即可引起Bax表达水平显著性升高和Bcl-2表达水平明显下降。结论 A549-21L0人肺癌细胞对培美曲塞诱导的细胞凋亡具有更高的敏感性。培美曲塞可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,并可通过调控Bax和Bcl-2表达水平诱导凋亡,这种效应具有一定的时间-效应关系。 相似文献
989.
目的:探讨miR-542-5p对卵巢癌细胞系SKOV3的增殖、迁移、侵袭、凋亡等恶性生物学行为的影响。方法:应用miR-542-5p mimics和mimics阴性对照 (mimics NC)分别转染卵巢癌细胞SKOV3。采用MTT实验、划痕试验、Transwell实验和流式细胞术检测过表达miR-542-5p对SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。结果:过表达miR-542-5p后,SKOV3细胞的增殖能力较阴性对照和正常SKOV3细胞明显降低(P<0.05);Transwell实验和划痕实验显示,过表达miR-542-5p后,细胞的迁移和侵袭能力较阴性对照组明显下降(P<0.05);流式细胞术结果显示,过表达miR-542-5p后,SKOV3细胞的凋亡率较阴性对照组升高,而对细胞周期无影响。结论:过表达miR-542-5p可以抑制卵巢癌细胞SKOV3的体外增殖、迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡。提示miR-542-5p在卵巢癌恶性生物学进程中可能发挥重要作用。 相似文献
990.
目的:探讨肾透明细胞癌中miR-200c调控ZEB2基因表达的分子机制。方法:实时定量PCR法检测肾透明细胞癌及癌旁组织中miR-200c及ZEB2基因的表达水平。培养肾透明细胞癌Caki-1细胞,将miR-200c的前体转染Caki-1细胞,Western blot法检测ZEB2蛋白的表达改变,荧光素酶报告基因表达分析实验验证miR-200c与ZEB2基因的3' 非翻译区(3' UTR)的结合及调控作用。结果:实时定量PCR表达检测显示,与癌旁组织相比,miR-200c在肾透明细胞癌组织中的表达显著下调,而ZEB2 mRNA在肾透明细胞癌组织中的表达则呈现明显上调。Pearson相关性分析结果表明,在肾透明细胞癌及癌旁组织中miR-200c与ZEB2基因的表达均显示负性相关。荧光素酶报告基因表达分析实验明确miR-200c能够与ZEB2基因的3' UTR特异性地结合,并抑制荧光素酶的表达。miR-200c前体能够显著下调Caki-1细胞中ZEB2蛋白的表达。结论:miR-200c与ZEB2基因的表达异常与肾透明细胞癌相关,在肾透明细胞癌细胞中miR-200c能够负性调节其靶基因ZEB2的表达。 相似文献