Rb1基因第16内含子内21个碱基缺失1例

目地研究双眼视网膜母细胞瘤患者Rb1基因杂合性突变的分子生物学特性。方法应用PCR—SSCP直接测序技术检测双眼视网膜母细胞瘤患者白细胞DNA中Rb1基因杂合性突变。结果50例证实有Rb1基因杂合性突变的病例中有1例发生于第16内含子中可以用3种定位方法解释、具有相同序列的21个碱基缺失。结论这种极为少见的Rb1基因突变方式可能是由于破坏了正常拼接位点的结构而激活了“隐蔽拼接位点”，导致异常的Rb1基因mRNA产生或由此影响整个拼接过程。     

β—内啡肽增强人外周血单个核细胞IL—2和IFN—γmRNA的表达

应用逆转录-多聚酶链反应及Sonthern杂交技术，研究卜内啡肽（β-END）对PHA诱导的人外周血单个核细胞IL－2和IFN－ΥmRNA表达的调节作用。结果发现β-END（10-8～10-14mol／L）可显著增强IL－2和IFN－ΥmRNA的表达并呈剂量依赖性关系，此外发现β-END对IL－2mRNA的增强作用可被阿片肽受体桔抗剂——纳络酮逆转。本研究从基因水平上证明了神经递质可通过影响免疫细胞细胞因子调节免疫功能。     

RENIN GENE POLYMORPHISM ASSOCIATED WITH ALDOSTERONE RESPONSIVENESS TO THE RENINANGIOTENSIN SYSTEM IN PATIENTS WITH ALDOSTERONE-PRODUCING ADENOMAS

1. Aldosterone levels in patients with unilateral aldosterone-producing adenomas may be responsive or unresponsive to the renin-angiotensin system, with the former often previously misdiagnosed as bilateral adrenal hyperplasia. 2. In tumours from patients in the responsive subgroup, renin mRNA is expressed in greater amounts than in tumours from patients in the unresponsive subgroup, or in normal adrenals. 3. We compared the frequency of four renin gene polymorphisms in peripheral blood DNA from the two subgroups and found significant associations between BglI, TaqI and HinfI restriction fragment length polymorphisms (RFLP) and aldosterone responsiveness. 4. Allelic variation in the constitutive renin gene was associated with a specific cause of hypertension.     

电离辐射调控脂质体介导的p16基因在HeLa细胞中的表达

目的探讨不同剂量γ射线照射后诱导脂质体介导的p16基因在HeLa细胞中的表达及抗癌作用。方法用脂质体Lipofectamin介导重组质粒Egr-p16转染人HeLa细胞，采用RT-PCR的方法检测了。Coγ射线照射转染后的人HeLa细胞剂量效应和时程变化，用细胞计数检测细胞增殖的变化，用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果研究证实0．5～8Gv照射后p16的转录水平高于对照，在2～4Gy照射后达到峰值，2Gy照射后2—24h高于对照组，在照射后4h达到峰值，然后逐渐下降。细胞生长曲线显示体外稳定转染联合。Coγ射线照射对HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用。细胞周期变化显示转染后的HeLa细胞经过照射后G0／G1期比例呈现剂量依赖性的下降，而S期则出现剂量依赖性的增加，出现明显的S期阻滞，G2／M期在2Gy出现明显的阻滞，在5和10Gy时逐渐下降，但是仍然高于对照组。结论^60Coγ射线可诱导转染的HeLa细胞p16转录水平的增强，同时在细胞增殖上出现明显的变化。     

烟碱对脑单胺类受体功能及基因表达的调节作用

目的研究烟碱对多巴胺受体、肾上腺素受体、5-羟色胺受体功能及基因表达的影响.方法 (1)昆明种小鼠给予生理盐水或烟碱(2mg/kg, i.p., 3/日, 10天).第11日分别腹腔注射烟碱(2mg/kg), 阿扑吗啡(3mg/kg),可乐定(1mg/kg), 8-OH-DPAT(1mg/kg),记录给药前、后自主活动各15min;(2)SD大鼠注射生理盐水或烟碱(1.2mg/kg, 2/日,SC,14天),第15天取脑作基因芯片,分析单胺类受体mRNA表达的改变.结果反复给予烟碱可诱导小鼠对烟碱降低自主活动的作用产生耐受,在对烟碱产生耐受的小鼠上,多巴胺受体激动剂阿扑吗啡增加自主活动的作用增强; α2-肾上腺素受体和5-HT1A受体激动剂可乐定和8-OH-DPAT抑制自发活动的作用减弱.在大鼠上, 反复给予烟碱可增加脑多巴胺D1 受体mRNA表达,降低多巴胺D3受体mRNA表达,不影响α2-肾上腺素受体、5-HT1A受体mRNA的表达.结论反复给予烟碱诱导烟碱耐受,脑N受体功能失敏时, 单胺类受体及其亚型功能或/和受体mRNA表达发生变化.     

Localization of proopiomelanocortin mRNA in functional subsets of neurons defined by their axonal projections

In situ cDNA:mRNA hybridization is a technique that has been developed for the visualization of cDNA:mRNA hybrids in individual cells. To use this technique to answer questions of regulation in heterogeneous populations of cells in the brain, it must be combined with other procedures allowing for the identification of functional subgroups of neurons. We report here a procedure by which in situ cDNA:mRNA hybridization may be combined with retrograde axonal tracing using the fluorescent tracer fast blue. Using this technique, it now becomes possible to measure mRNA regulation in functional subsets of cells defined by their axonal projections.     

快速心房起搏对家兔L-型钙通道和Kv4.3钾通道基因表达的影响

目的观察快速心房起搏对家兔心房L型钙通道亚单位和Kv4.3钾通道基因表达的影响。方法新西兰大耳白家兔36只,随机分成6组,经右颈外静脉穿刺置入电极于右房,分别给予0、3、6、12、24或48h快速心房起搏,停止起搏后取右房组织,应用半定量反转录聚合酶链式反应测定各时相点L型钙通道α1c,β1,α2亚单位,钾通道Kv4.3mRNA的表达水平。结果L型钙通道α1c、β1亚单位在快速起搏6h后表达水平下调,并随着起搏时间的延长进一步下调。α2亚单位的mRNA表达在各时相点无显著差异。Kv4.3的mRNA的表达在快速起搏的24h和48h下降分别达55.50%（P<0.01）和59.12%（P<0.01）。48h后下降达到一个平台期。结论快速心房起搏可导致L型钙通道亚单位和Kv4.3钾通道mRNA表达下调。