胃黏膜癌变过程中RRM1和CDX2表达及相关性

目的:检测RRM1、CDX2在不同胃黏膜组织中的表达,探讨其临床意义.方法:收集胃癌90例,高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变、肠上皮化生、浅表性胃炎、正常胃黏膜各30例,共240例.采用S-P免疫组化方法对所有组织检测RRM1、CDX2表达,并进行分析.结果:(1)胃癌、高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变组RRM1的阳性表达率分别为86.7%、83.3%、83.3%,均高于浅表性胃炎组的66.7%(P<0.05)和肠上皮化生组的33.3%(P<0.01),浅表性胃炎组66.7%高于肠上皮化生组的33.3%(P<0.05);高级别上皮内瘤变、肠上皮化生、胃癌组的CDX2的阳性表达率分别为76.7%,63.3%、61.1%,均高于低级别上皮内瘤变组的33.3%(P<0.05)和浅表性胃炎组的0(P<0.01).(2)210例不同胃黏膜病变中,RRM1与CDX2二者之间表达呈正相关(rs=0.352,P=0.000),90例胃癌中RRM1与CDX2二者之间呈正相关关系(rs=0.223,P=0.034).结论:RRM1、CDX2表达均与胃癌的发生发展有关,二者可作为较为理想的肿瘤标志物,用于胃癌早期诊断的预警.     

体外导入外源IL-10基因对HSC增殖的影响

目的利用重组复制缺陷型腺病毒AdIL 10将外源IL 10基因导入肝星状细胞 (HSC) ,并观察其对HSC增殖的影响。方法将本实验室自行构建的重组腺病毒质粒pAdIL 10用Lipofectamin包装转染HEK 2 93细胞 ,即可获得重组腺病毒AdIL 10。应用胶原酶原位灌注和密度梯度离心法分离大鼠HSC ,当HSC生长至 80 %密度时 ,以 5× 10 4细胞 /孔接种于 96孔板 ;HSC培养 2 4h后 ,取病毒AdIL 10以感染复数 (MOI) 5 0感染HSC ;用MTT法检测HSC增殖率。结果pAdIL 10经 2 93细胞包装 ,3d后可观察到绿色荧光蛋白 (GFP)表达 ;AdIL 10感染HSC 3d后可观察到GFP表达 ,且HSC增殖受到抑制。结论重组腺病毒AdIL 10感染HSC后可抑制其增殖     

Critical Amino Acid Residues for Nicotine 5＇ -Hydroxylation in Human CYP2A Enzymes

Objective： We have continued previous work in which we demonstrated that #117 and #372 amino acids contributed to the high activities of human CYP2A13 in catalyzing 4-methylnitrosamino-1-（3-pyridyl）-1-butanone（NNK） and aflatoxin BI（AFB1） carcinogenic activation. The present study was designed to identify other potential amino acid residues that contribute to the different catalytic characteristics of two CYP2A enzymes, CYP2A6 and CYP2A13, in nicotine metabolism and provide insights of the substrate and related amino acid residues interactions. Methods： A series of reciprocally substituted mutants of CYP2A6lle^300→ Phe, CYP2A6Gly^301aAla, CYP2A6Ser^369 → Gly, CYP2A13Phe^300→ Ile, CYP2A13Ala^301 → Gly and CYP2A13Gly^369 → Set were generated by site-directed mutagenesis/baculovirus-Sf9 insect cells expression. Comparative kinetic analysis of nicotine 5＇hydroxylatin by wild type and mutant CYP2A proteins was performed. Results：All amino acid residue substitutions at 300, 301 and 369 caused significant kinetic property changes in nicotine metabolism. While CYP2A6Ile^300→ Phe and CYP2A6Gly^301→Ala mutations had notable catalytic efficiency increases compared to that for the wild type CYP2A6, CYP2A13Phe^300→Ile and CYP2A13Ala^301→Gly replacement introduced remarkable catalytic efficiency decreases. In addition, all these catalytic efficiency alterations were caused by Vmax variations rather than Km changes. Substitution of #369 residue significantly affected both Km and Vmax values. CYP2A6Ser^369 → Gly increase the catalytic efficiency via a significant Km decrease versus Vmax enhancement, while the opposite effects were seen with CYP2A13Gly^369 → Ser. Conclusion：#300, #301 and #369 residues in human CYP2A6/13 play important roles in nicotine 5＇ -oxidation. Switching #300 or #301 residues did not affect the CYP2A protein affinities toward nicotine, although these amino acids are located in the active center. Set369 to Gly substitution indirectly affected nicotine binding by     

脂溢性角化病皮损中环氧合酶-2蛋白的表达及其临床意义

目的 :研究脂溢性角化病皮损中环氧合酶 2 (COX 2蛋白 )蛋白表达及其意义。方法 :应用免疫组化SP法对 30例脂溢性角化病皮损组织及 10例正常皮肤组织中COX 2蛋白进行检测。结果 :30例脂溢性角化病皮损组织中COX 2蛋白表达阳性率为 36 .7% (11/ 30 ) ,而在正常皮肤组织中无COX 2蛋白表达 ;COX 2蛋白的表达在试验组和对照组之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;COX 2蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型的相关性均不明显。结论 :COX 2蛋白过度表达与脂溢性角化病的发生密切相关。     

2型糖尿病患者血尿酸水平与尿白蛋白排泄率及颈动脉内中膜厚度的关系

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清尿酸(SUA)水平与尿白蛋白排泄率(UAER)和颈动脉内中膜厚度(CIMT)的关系.方法 2008年5月-2009年5月收治T2DM患者372例,其中男性184例,女性188例.收集相关临床资料.Pearson法检验患者SUA水平与各项临床指标的相关性;多元逐步回归法分析影响UAER和CIMT的相关因素.结果 男性T2DM患者SUA水平明显高于女性(P<0.01).男性和女性T2DM患者SUA水平均与UAER相关;在校正内生肌酐清除率(Ccr)的影响后,相关性仍然存在(男性:r=0.24, P<0.01;女性:r=0.29, P<0.01).女性T2DM患者SUA水平与CIMT相关(r=0.29, P<0.01). 多元逐步回归分析显示,SUA是T2DM患者UAER(男性: β=0.16,P<0.05;女性: β=0.20,P<0.05)及女性T2DM患者CIMT的独立相关因素(β=0.16,P<0.05).结论 SUA在T2DM患者肾病和心血管病的发生和发展中起一定作用,控制SUA水平可能有助于延缓糖尿病肾病和防治糖尿病血管并发症.     

聚乙二醇干扰素α-2a成功治疗1例乙型肝炎多重耐药患者

患者,男性,47岁,国家公务员,有乙型肝炎(乙肝)家族史。2003年首次发现乙肝病毒(HBV)阳性,当时肝功能正常。2006年初查丙氨酸氨基转移酶(ALT)152IU/L,曾用甘利欣等保肝治疗,ALT反复波动。2007年2月查ALT65IU/L,HBeAg(+),HBV DNA 6.8×107拷贝/ml,开始恩替卡韦(博路定)抗病毒治疗。治疗半年HBV DNA未转     

乙型肝炎表面抗原基因重组2型腺相关病毒的免疫原性研究

目的观察含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的2型重组腺相关病毒(rAAV-2-HBsAg)在Balb/c小鼠体内的免疫原性。方法以5×1011的重组病毒颗粒单次注射Balb/c小鼠,RT-PCR扩增肝脏组织中HBsAg基因cD-NA:ELISA检测肝组织中HBsAg的表达;RIA法检测血清中表面抗体(抗一HBs)滴度;51Cr释放分析检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果外源性HBsAg基因己整合到肝细胞染色体DNA并有效地转录和翻译,表达水平最高可达33.8pg/(mglivertissue),rAAV-HBsAg免疫小鼠后可以诱导机体产生表面抗体并激发特异性CTL。结论外源性HBsAg基因可以转移到小鼠肝细胞并稳定表达;rAAV-2-HBsAg免疫小鼠可以同时诱导体液和细胞免疫反应的出现。提示基于rAAV-2载体的乙型肝炎(HBV)疫苗,对于防止HBV感染,尤其是作为慢性乙型肝炎的治疗性疫苗可能只有潜在的应用价值,值得做进一步的系统研究。     

宫颈癌筛查采用Cervista与HC2法比较的研究进展

宫颈癌在女性生殖系统恶性肿瘤中发病率最高,且近年来其发病率和死亡率有明显增长趋势,尤其是在中青年女性中.全世界浸润性宫颈癌的HPV检出率99.3％,而部分HPV感染可以随着免疫力的增强逐渐被机体所清除;且早期病变演变为宫颈癌其潜伏期长达10年左右;再者,局部治疗即可阻止其进一步发生恶变,所以,通过筛查不但可早期发现宫颈的癌前病变,而且可早治疗、提高疗效、挽救生命.最新的Cervista酶切免疫放大技术特异性更高、假阳性更少,检测效率高、不确定率更低,本文通过与HC2对比,对该方法予以综述.     

2型糖尿病早期血管内皮功能改变的临床研究

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）早期患者血管内皮功能的变化及影响因素。方法：选取45例新诊断无并发症的T2DM患者（T2DM组）,另设正常对照组38例（NC组）,比较两组的一般情况、血脂、糖代谢等生化指标和可溶性血管细胞黏附分子1（SVCAM-1）的差异。结果：①T2DM组SVCAM-1高于NC组[（47.51±13.84）mmol/L vs（27.99±11.66）mmol/L],差异有高度统计学意义（P〈0.01）。②相关分析显示,血清SVCAM-1与体重指数（BMI,r=0.432,P〈0.01）、舒张压（DBP,r=0.229,P〈0.05）、空腹血糖（FPG,r=0.409,P〈0.01）、三酰甘油（TG,r=0.226,P〈0.05）、总胆固醇（TC,r=0.237,P〈0.05）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C,r=0.241,P〈0.05）呈显著正相关,与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C,r=-0.259,P〈0.01）呈显著负相关。结论：T2DM早期患者即存在血管内皮功能损伤。     

芹菜素诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制研究

目的 研究芹菜素诱导肺癌A549细胞凋亡效应及其机制。方法 常规培养肺癌A549细胞,分别用10、20、40、80 μmol/L芹菜素作用于A549细胞;MTT法检测A549细胞增殖率;Western blotting检测聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）、Bcl-2的蛋白表达水平;RT-PCR检测bcl-2 mRNA的表达;Annexin V/PI双染法检测A549细胞凋亡率。结果 随着芹菜素浓度的增高,A549细胞的增殖抑制率明显增高,具有统计学意义（P＜0.05）;Western blotting显示PARP的剪切带逐渐增加,Bcl-2表达呈减少趋势;RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA转录减少;0、10、20、40、80 μmol/L芹菜素对A549细胞凋亡率分别为（2.41±0.072）%、（10.56±0.054）%、（15.32±0.071）%、（28.98±0.012）%、（78.24±0.064）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 芹菜素通过抑制Bcl-2的表达有效地诱导肺癌A549细胞凋亡。