Interferon-gamma release assays in tuberculous uveitis: a comprehensive review

Tuberculous uveitis (TBU) comprises a broad clinical spectrum of ocular manifestations, making its diagnosis challenging. Ophthalmologists usually require evidence from investigations to confirm or support a clinical diagnosis of TBU. Since direct isolation of the causative organism from ocular specimens has limitations owing to the small volume of the ocular specimens, resultant test positivities are low in yield. Immunodiagnostic tests, including the tuberculin skin test and interferon-gamma release assays (IGRAs), can help support a clinical diagnosis of TBU. Unlike the tuberculin skin test, IGRAs are in vitro tests that require a single visit and are not affected by prior Bacillus Calmette-Guerin vaccination. Currently, available IGRAs consist of different techniques and interpretation methods. Moreover, newer generations have been developed to improve the sensitivity and ability to detect active tuberculosis. This narrative review collates salient practice points as a reference for general ophthalmologists, such as evidence for the utilization of IGRAs in patients with suspected TBU, and summarizes basic knowledge and details of clinical applications of these tests in a clinical setting.     

呼吸道合胞病毒感染促进哮喘小鼠气道分泌TSLP和Th2炎症反应

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)对哮喘小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)分泌的影响,以探索RSV对哮喘小鼠Th1/Th2免疫反应的调节作用.方法 雌性BALB/c小鼠32只.随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、RSV组、OVA/RSV组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘;无创肺功能检测小鼠气道反应性,ELISA法检测小鼠血清IL-4、IFN-γ、IL-5、IL-13水平;ELISA法检测气管灌洗液(BALF)TSLP含量并进行细胞分类计数;小鼠肺组织病理观察炎症反应,免疫组化观察小鼠气管上皮细胞TSLP表达水平.结果 RSV感染促进哮喘小鼠呼吸道分泌TSLP增加,OVA/RSV组小鼠TSLP浓度达(2.13±0.05)ng/ml,高于其他组(P<0.01);同时促进IL-4、IL-5、IL-13等Th2型细胞因子的分泌,并增加IFN-γ分泌;0VA/RSV组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞数与其他各组比较均明显增加;无创肺功能检测显示OVA/RSV组小鼠气道反应性明显增高,乙酰甲胆碱浓度达6.25 mg/ml时,Penh值(318.66±50.87)明显增加,与其他各组比较具有统计学意义(P<0.01);病理观察显示RSV感染明显加重哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实RSV/OVA组小鼠气道上皮细胞TSLP表达量较高.结论 RSV感染可以增加小鼠气道上皮细胞表达TSLP,促进Th2细胞因子的表达,加重哮喘小鼠肺部Th2炎症反应.     

抗奶牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的研制及其特性

利用IPTG诱导大肠杆菌表达牛-γ干扰素融合蛋白(GST-BovIFN-γ),经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,切取融合蛋白条带作为抗原免疫BALB/c小鼠。利用杂交瘤技术研制抗牛-γ干扰素(BovIFN-γ)的特异性单克隆抗体(mAb)。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法筛选、Western-blotting、间接免疫荧光(IFA)方法进行鉴定,筛选出2株分泌特异性抗BovIFN-γ的杂交瘤细胞株,分别命名为BovIFN--γ4A3和BovIFN--γ4G5。该单抗可以与重组GST-BovIFN-γ和真核细胞表达的rBovIFN-γ反应,但不能与GST和鸡IFN-γ反应,说明单抗具有很好的特异性。进一步研究表明单抗能中和BovIFN-γ对水泡性口炎病毒(VSV)对牛肾细胞的致病变作用。这些单抗可用于奶牛结核病的监测和防治。     

慢性阻塞性肺疾病稳定期基质金属蛋白酶-9和γ-干扰素与肺功能的相关性

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和γ-干扰素(IFN-γ)与患者肺功能受损严重程度的相关性。方法:选取COPD稳定期患者80例,按用力肺活量(FVC)、1 s钟用力呼气容积(FEV1)、FEV1/FVC的临床严重度分级标准分为I级、II级、III级及IV级组4组,同时选取25例健康对照者(健康对照组),比较各组FEV1占预计值的百分比(FEV1%pred)与FEV1/FVC水平,并检测IFN-γ、MMP-9水平,分析IFN-γ、MMP-9与肺功能受损严重程度的相关性。结果:COPD稳定期各组患者血清IFN-γ、MMP-9浓度较健康对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);COPD稳定期,随着肺功能的降低,患者血清中MMP-9、IFN-γ含量升高,MMP-9、IFN-γ含量呈正相关(r=0.868,P<0.05);COPD稳定期患者血清中MMP-9与肺功能受损严重程度(FEV1占预计值的百分比)呈负相关,(r=-0.849,P<0.05);COPD稳定期患者血清中IFN-γ与肺功能受损严重程度(FEV1占预计值的百分比)呈负相关,(r=-0.896,P<0.05)。结论:COPD稳定期患者血清MMP-9、IFN-γ可能参与了COPD慢性炎症反应引起肺损伤的发病机制。     

IFN-γ对人喉癌细胞VEGF-C和bFGF表达的影响

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)对人喉鳞癌细胞血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法IFN-γ以不同浓度(1、10、100、1000、10000U/mL)作用于人喉癌Hep-2细胞不同时间(0、12、24、36、48、60、72h)。MTT比色法检测细胞增殖情况,以确定IFN-γ作用的最适浓度。实时PCR法测定1000U/mLIFN-γ作用不同时间(0、2、6、12、24、36、48、60、72h),Hep-2细胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达;采用ELISA法和免疫细胞化学方法测定在相同药物剂量和作用时间条件下,细胞培养上清液和细胞浆中VEGF-C和bFGF蛋白表达。结果MTT法检测显示,100、1000、10000U/mL的IFN-γ作用于Hep-2细胞48h后,对细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。与对照组比较,1000U/mLIFN-γ作用于Hep-2细胞36h后,VEGF-C mRNA表达下调(P<0.05),作用48h后差异更为显著(P<0.01);1000U/mLIFN-γ作用于Hep-2细胞24h后,bFGF mRNA表达上调(P<0.05),作用48h后差异更为明显(P<0.01)。1000U/mLIFN-γ作用Hep-2细胞48h后,其胞浆中棕色颗粒(VEGF-C和bFGF蛋白表达)明显少于对照组。结论IFN-γ下调Hep-2细胞VEGF-C mRNA表达,上调其bFGF mRNA表达;而对Hep-2细胞VEGF-C和bFGF蛋白分泌均有抑制作用。     

中药复方别敏胶囊对呼吸道变应性小鼠内分泌免疫功能的调节作用

目的：观察中药复方别敏胶囊对呼吸道变应性模型小鼠内分泌免疫功能的影响。方法：利用卵清蛋白建立呼吸道变应性小鼠模型,采用苏木精和伊红染色观察肺组织病理变化,运用流式细胞仪检测脾淋巴细胞中Th1和Th2细胞变化,利用酶联免疫吸附测定方法检测脾淋巴细胞培养上清白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）、白细胞介素5（interleukin-5,IL-5）、干扰素γ（interferon—gamma,INF-γ）水平及血清皮质酮浓度。 结果：别敏能够明显减轻模型小鼠肺组织的炎症反应,降低模型小鼠Tb_2细胞及其细胞因子IL-4、IL-5水平,升高Th1细胞及其细胞因子INF-γ水平,显著抑制模型小鼠内源性皮质酮水平的下降。 结论：别敏对机体内分泌免疫系统功能紊乱的调节作用可能是其治疗呼吸道变应性疾病的重要机制之一。     

Increased Ifng and Il10 Expression Correlate with Disease in Rodent Models Experimentally Infected with Modoc Virus

Flaviviruses present an ongoing threat to global public health, although the factors that contribute to the disease remain incompletely understood. We examined an acute Modoc virus (MODV) infection of two rodent models. Viral RNA was detected in the kidneys, spleen, liver, brain, urine, and sera of experimentally infected deer mice, a reservoir host of MODV, and Syrian hamsters, a known disease model. As expected, clinical outcomes differed between species, and the levels of viral RNA recovered from various tissues demonstrated signs of differential replication and tissue tropism. Multivariate analysis indicated significance in the profile of expressed genes between species when analyzed across tissues and over time (p = 0.02). Between-subject effects with corrected models revealed a significance specific to the expression of Ifng (p = 0.01). the expression of Ifng was elevated in hamsters as compared to deer mice in brain tissues at all timepoints. As the over-expression of Ifng has been shown to correlate with decreased vascular integrity, the findings presented here offer a potential mechanism for viral dissemination into the CNS. The expression of IL10 also differed significantly between species at certain timepoints in brain tissues; however, it is uncertain how increased expression of this cytokine may influence the outcome of MODV-induced pathology.     

重组干扰素γ治疗系统性硬化症15例

目的：观察重组干扰素γ对系统性硬化症(SSc)的疗效和安全性。方法：选取SSc患者15例，完成3个月的疗程，每日给予重组干扰素γ 100万U，im，每周5 d。结果：治疗3个月在皮肤硬度积分、关节功能积分、最大齿距、血沉(ESR)、C 反应蛋白等方面差异均有极显著性，一氧化碳弥散率差异有显著性，无严重不良反应发生。结论：重组干扰素γ对SSc有效，且副作用低。     

Elispot检测抗原特异性IFN-γ反应在肺外结核诊断中的应用价值

目的 评价酶联免疫斑点(Elispot)检测外周血中结核分枝杆菌性抗原特异性γ干扰素(IFN-γ)水平在肺外结核诊断中的价值.方法 利用Elispot技术分别对24例肺外结核患者(肺外结核组)和97健康对照(对照组)外周血中产生结核菌抗原特异性IFN-γ的水平进行定量检测.对其中20例肺外结核病人和20例健康者同时采用澳大利亚CELLESTIS公司生产的全血干扰素试剂(OFT-G)进行IFN-γ分泌水平的平行检测.结果 肺外结核组中IFN-γ水平和应答的阳性率显著高于对照组(P＜0.05);Elispot、QFT-G检测肺外结核组和健康者的反应阳性率分别是:76.1%、84.2%,健康者中分别为10%、20%;两种方法检测结果没有统计学差异(X2=1.1250,p＞0.05).结论 Elispot试剂的检测结果与QFT-G基本一致,可用于肺外结核的辅助诊断.     

SLE患者外周血单个核细胞IFN-γ及IL-10mRNA表达与疾病活动性的相关性

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者疾病活动性的相关因素.方法选择70例SLE患者(SLE组)和63例健康查体者(对照组),采用PCR法检测外周血单个核细胞IFN-γmRNA和IL-10mRNA表达情况;采用凝胶图像扫描系统对PCR产物的电泳条带进行密度扫描.结果SLE组IL-10 mRNA表达量高于对照组(P＜0.01),IFN-γ表达低于对照组,但无统计学差异.SLE组SLE疾病活动指数(SLEDAI)＞10分者IFN-γ mRNA表达显著高于≤10分者,IL-10 mRNA表达在两者间无统计学差异.结论SLE时存在Th1细胞向Th2细胞漂移现象;IFN-γ表达增高与SEE疾病活动性密切相关.