电针对膜迷路积水模型豚鼠耳蜗形态及水通道蛋白表达的影响

目的:探讨电针治疗梅尼埃病的可能调节机制.方法:将40只豚鼠随机分为空白组、模型组、药物组和电针组,每组10只.除空白组外,其余3组采用腹腔注射醛固酮方法造膜迷路积水模型.空白组、模型组采取与电针组相同的固定,不予治疗;药物组予氢氯噻嗪溶液5 mg/kg灌胃,每日1次,连续治疗10 d;电针组予“百会”“听宫”电针治疗,每日1次,连续治疗10d.采用比浊法检测各组豚鼠血清离子浓度,HE染色法观察耳蜗积水程度,免疫组化染色法检测耳蜗水通道蛋白1(AQP1)表达的情况.结果:①空白组未出现膜迷路积水;模型组出现中、重度膜迷路积水;电针组和药物组出现轻度膜迷路积水.②电针组K+、Ca2+浓度高于模型组及药物组(均P＜0.01);Na+浓度低于模型组(P＜0.01),高于药物组(P＜0.01);Cl-浓度高于药物组(P＜0.01),但与模型组比较差异无统计意义(P＞0.05).③模型组AQP1表达面积比值较空白组降低(P＜0.01);电针组AQP1表达面积比值较模型组升高(P＜0.01),较药物组降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针可减轻豚鼠膜迷路积水,其作用机制可能与上调耳蜗AQP1的表达有关,并受离子浓度变化的影响.     

南苍术与北苍术的燥性效应比较

目的:探讨南苍术和北苍术的燥性效应强弱。方法:将60只正常健康SD大鼠随机分组为6组(每组10只),分别为生理盐水组,大豆油组,南苍术低剂量组(剂量46. 25 mg·kg~(-1)·d-1),南苍术高剂量组(剂量500 mg·kg~(-1)·d-1),北苍术低剂量组(剂量46. 25 mg·kg~(-1)·d-1),北苍术高剂量组(剂量500 mg·kg~(-1)·d-1),给药体积均为0. 01 m L·g-1,灌胃给药21 d。以大鼠日均饮水量、颌下腺形态组织、尿量和肾脏中水通道蛋白2(AQP2)表达量、全血黏度为苍术燥性效应的药效评价指标,观察给予等剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油对大鼠燥性效应的影响。结果:与大豆油组相比较,长期服用高剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油均能使大鼠日均饮水量、尿量、全血黏度增加,AQP2表达量降低,颌下腺腺泡萎缩;但二者并无统计学差异;而低剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油对大鼠燥性效应影响不显著。结论:等剂量的南苍术挥发油和北苍术挥发油表现出来的燥性药效无显著性差异,初步证明了临床上南苍术和北苍术通用的合理性,同时为苍术的临床合理用药提供了实验依据。     

乙酰唑胺对表达水孔蛋白1的非洲爪蟾卵母细胞转运水功能的影响

目的观察乙酰唑胺对水孔蛋白1(AQP1)水转运功能的影响。方法将AQP1 cRNA 10 ng注射入非洲爪蟾卵母细胞,观察并记录给予1×10^-7～1×10^-5 mol·L^-1乙酰唑胺后卵母细胞在低渗溶液中的膨胀率,并计算其渗透水通透性(Pf)的变化。结果非洲爪蟾卵母细胞表达AQP1蛋白后,在低渗溶液中迅速膨胀,Pf值显著增加至1.82×10^-2 cm·s^-1,而注射水的阴性对照仅为0.25×10^-2 cm·s^-1。AQP抑制剂HgCl₂使Pf值降至0.64×10^-2 cm·s^-1;1×10^-7～1×10^-5 mol·L^-1乙酰唑胺处理后,Pf值分别降至1.43,1.24和0.93×10^-2 cm·s^-1。结论乙酰唑胺剂量依赖性地降低AQP1介导的渗透水通透性,抑制AQP1转运水的功能。     

复方丹参注射液对JNK信号通路调节人羊膜上皮细胞AQP3表达的影响

目的探讨复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞中水通道蛋白3（aquaporin 3,AQP3）的表达与c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）信号通路的关系。方法分别取足月妊娠的正常羊水和羊水过少的人羊膜上皮细胞进行原代培养。将培养的正常羊水和羊水过少的人羊膜上皮细胞分别分成4个处理组：空白对照组（A组）、SP600125组（B组）、复方丹参注射液组（C组）和SP600125加复方丹参注射液组（D组）。采用cell counting kit-8（CCK-8）法检测各组细胞的活力,Western blot技术分析人羊膜上皮细胞中总JNK、磷酸化JNK（p-JNK）和AQP3蛋白的表达量。结果（1）在正常羊水及羊水过少人羊膜上皮细胞中：4组细胞活力和总JNK蛋白差异均无统计学意义（P〉0.05）。p-JNK差异有统计学意义（P〈0.05）。与A组比较,p-JNK在B组表达明显下降,而在C组中其表达明显上调（P〈0.05）。且p-JNK在D组中的表达较C组明显下降,但高于A组和B组（P〈0.05）。与A组比较,在正常羊水人羊膜上皮细胞中,C、D组中AQP3表达明显上调（P〈0.05）。但与C组比较,D组AQP3表达差异无统计学意义（P〉0.05）。而在羊水过少人羊膜上皮细胞中,B组中AQP3的表达明显下降（P〈0.05）,而C组中AQP3表达明显上调（P〈0.05）;D组中AQP3表达低于C组（P〈0.05）,但高于B组（P〈0.05）。结论羊水过少时,复方丹参注射液可通过激活JNK信号通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3表达的水平。     

ELISA与FACS定量方法检测血清AQP4抗体诊断NMO的Meta分析

目的系统评价酶联免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞术(FACS)检测血清水通道蛋白4抗体(AQP4-IgG)对诊断视神经脊髓炎(NMO)的准确性。方法检索国内外公开发表的相关文献。根据题目、摘要、全文逐步筛选,采用质量评价工具(QUADAS)分析文献质量。采用Meta-Disc1.4与STATA 12.0软件进行Meta分析。根据Meta分析结果综合评价ELISA和FACS方法诊断NMO的准确性。结果经过严格的纳入及排除标准,最终纳入17篇文献。ELISA和FACS方法合并敏感度分别为0.63(95%CI:0.58~0.68)和0.55(95%CI:0.48~0.61),合并特异度分别为0.98(95%CI:0.97~0.98)和0.99(95%CI:0.98~0.99)。拟合受试者工作特征曲线(SROC),得到SROC曲线下面积(AUC)分别为0.9521和0.9542。结论通过ELISA和FACS方法检测AQP-4-IgG对于诊断NMO特异度高,两者都具有较高的诊断效能和准确率。但受纳入研究质量和数量限制,两种方法诊断效能的一致性尚需开展更多高质量研究予以验证。     

Immunohistochemical Localization of the Water Channels AQP4 and AQP5 in the Rat Pituitary Gland

The pituitary gland is composed of the adenohypophysis and neurohypophysis. The adenohypophysis contains endocrine cells, folliculo-stellate (FS) cells, and marginal layer cells, whereas the neurohypophysis mainly comprises axons and pituicytes. To understand the molecular nature of water transfer in the pituitary gland, we examined the immunohistochemical localization of the membrane water channels aquaporin-4 (AQP4) and AQP5 in rat tissue. Double immunofluorescence analysis of AQP4 and S100 protein, a known marker for FS cells, marginal layer cells, and pituicytes, clearly revealed that FS cells and marginal layer cells in the adenohypophysis and the pituicytes in pars nervosa are positive for AQP4. AQP5 was found to be localized at the apical membrane in some marginal layer cells surrounding the Rathke's residual pouch, in which AQP4 was observed to be localized on the basolateral membranes. These results suggest the following possibilities: 1) FS cells especially require water for their functions and 2) transepithelial water transfer could occur between the lumen of Rathke's residual pouch and the interstitial fluid in the adenohypophysis through the AQP4 and AQP5 channels in the marginal layer cells.     

糖性白内障渗透性膨胀期相关机制的研究进展

晶状体具有良好的透光性与适度的折光性,是一个近乎完美的视觉器官。它来源于表皮外胚叶,由外向内依次为晶状体囊、晶状体上皮、皮质及核,其中晶状体上皮细胞是整个晶状体的生命中枢,不仅分泌Ⅳ型胶原形成外层晶状体囊,并在赤道部衍化为纤维细胞,构成皮质与核;而且提供了晶状体代谢所需的全部能量。在长期高糖环境下,醛糖还原酶被激活,造成大量高渗性物质——山梨醇在细胞内堆积,引起皮质高度吸水膨胀;近年来还发现p糖-蛋白、细胞容积型氯离子通道和水通道蛋白也参与了糖性白内障渗透性膨胀期的发生发展。     

Water entry into astrocytes during brain edema formation

The process of brain edema formation has been studied extensively at the macroscopic level. In contrast, little is known about water fluxes and volume changes at the cellular level in the initial phase of brain edema. Insight in these "microscopic" events could pave the way for more efficient prevention and therapy. Here, we report measurements of brain cell volume responses recorded in vivo in a model of systemic hyponatremia. Transgenic mice expressing fluorescent proteins in astrocytes were subjected to hypo-osmotic stress and two photon laser scanning microscopy. Volume measurements of glial cells in the cerebellum and the visual cortex indicate that individual astrocytes undergo a position-dependent increase in cell volume by a factor of two or more during edema formation. Our data are the first to show that volume changes can be monitored at the cellular level in vivo and demonstrate that astrocytes are sites of water entry in the initial phase of brain edema formation. The uptake of water in astrocytes is likely to reflect the strong expression of aquaporin-4 in these cells.     

立体定向穿刺引流术治疗基底节区脑出血的价值探究

目的探究立体定向穿刺引流术治疗基底节区脑出血的临床应用价值。 方法回顾性分析长江大学附属荆州市第一人民医院颅脑外科自2019年6月至2020年6月治疗的66例基底节区脑出血患者的临床资料,根据手术方式的不同分为2组,其中行传统开颅手术治疗的33例患者为对照组,采用立体定向穿刺引流术治疗的33例患者为引流组,观察并比较2组患者围术期指标、疗效、血清水通道蛋白4（AQP4）、血小板反应蛋白（TSP）1和TSP2水平、脑水肿体积。 结果引流组手术时间及住院时间均短于对照组,术中失血量低于对照组,血肿清除率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;引流组术后疗效较对照组好,差异有统计学意义（P<0.05）;引流组患者血清AQP4、TSP1、TSP2水平较对照组低,脑水肿体积较对照组小,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论立体定向穿刺引流术治疗可改善基底节区脑出血患者围术期指标、增强疗效、降低血清AQP4水平、减少脑水肿体积。