草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉提取物对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)进行体外培养,用MTT比色法测定不同浓度、不同时间段草苁蓉乙醇提取物对该细胞的抗增殖作用;应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色荧光显微镜及扫描电镜技术观察药物作用后的细胞形态学改变;应用流式细胞仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果:(1)MTT实验表明:草苁蓉乙醇提取能抑制HSC-T6细胞增殖,并表现出浓度、时间依赖性关系。(2)HE染色、AO/EB荧光染色以及扫描电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC-T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变:细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等现象。(3)流式细胞仪检测,草苁蓉乙醇提取物处理后大鼠肝星状细胞(HSC-T6)被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,与对照组相比有统计学差异,并随药物浓度的升高呈增高趋势。结论:(1)草苁蓉乙醇提取物在体外可明显抑制HSC-T6细胞的增殖。(2)草苁蓉乙醇提取物在体外可诱导HSC-T6细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期。     

高压氧对实验性脊髓损伤Bcl-6的影响

目的 探讨高压氧(HBO)治疗脊髓损伤(SCI)的可能疗效及机制。方法 复制大鼠SCI模型,采用下同压力HBO治疗,进行常规HE及免疫组织化学染色,观察各组脊髓组织学及Bcl-6表达的变化。结果 损伤后,脊髓组织出血、水肿、空泡变性、神经纤维排列紊乱、断裂;Bcl-6强阳性表达于神经元细胞中。治疗组中,0.1 MPa HBO组的HE及免疫组织化学染色结果相似于损伤组;而0.25 MPa HBO组则组织水肿消失,出血、空泡变性减轻,神经细胞形态恢复,结构排列相对完整;Bcl-6的表达强度较损伤组明显下降。结论 Bcl-6的变化显示HBO治疗后脊髓组织的细胞已由趋于凋亡向修复转变;HBO治疗可阻止或减轻脊髓损伤的病理变化,有效修复脊髓组织的结构和功能。     

基于白细胞介素 13/信号传导和转录激活因子 6信号通路研究甘草酸二铵对慢性阻塞性肺疾病大鼠气管黏液高分泌的影响

目的基于白细胞介素 13(IL-13)/信号传导和转录激活因子 6(STAT6)信号通路观察甘草酸二铵盐对慢性阻塞性肺疾病( COPD)大鼠气管黏液高分泌的影响。方法 2019年 6月至 2020年 2月,从珠海百试通生物科技有限公司购买健康雄性 SD大鼠。将 SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、盐酸氨溴索组和甘草酸二铵低、中、高剂量组,每组 15只。采用香烟烟熏联合脂多糖( LPS)建立 COPD大鼠模型,除正常组和模型组注射生理盐水外,其余各组均于尾部静脉注射相应剂量的药物,每天 1次,持续 14 d。通过检测各组大鼠的肺阻力(RI)、肺顺应性( Cdyn)以及酚红排痰实验反映大鼠肺功能变化情况; ELI-SA检测肺泡灌洗液中 IL-13的水平变化; HE染色反映肺组织的病理学变化;实时定量荧光 PCR(qRT-PCR)和 Western blotting检测各组肺组织中 IL-13、STAT6和黏蛋白 5AC(MUC5AC)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠 Cdyn降低, RI［( 2.39±0.30)cmH2O·mL-1·s-1比( 0.85±0.11)cmH2O·mL-1·s-1］、排痰量［( 1.09±0.14)mg/L比( 0.55±0.07)mg/L］、肺泡灌洗液中 IL-13［(34.28±5.88)ng/L比( 10.36±1.67)ng/L］水平显著升高( P<0.05),肺组织出现病理学损伤, p-STAT6/STAT6［(1.33±0.23)比( 0.72±0.14)］水平以及 IL-13蛋白［(0.47±0.07)比( 0.17±0.03)］和 MUC5AC mRNA及蛋白［(0.78±0.15)比( 0.15±0.04)］水平均有升高( P<0.05);与模型组相比,甘草酸二铵低、中、高剂量组和盐酸氨溴索组 Cdyn增加, RI、排痰量、肺泡灌洗液中 IL-13水平显著下降( P<0.05),肺组织损伤程度降低, p-STAT6/STAT6以及 IL-13蛋白和 MUC5AC mRNA及蛋白水平均有降低( P<0.05);其中甘草酸二铵组作用效果最为明显。结论甘草酸二铵能抑制 COPD模型大鼠 IL-13/STAT6信号通路,并可能藉此减轻气管黏液高分泌,改善气管阻塞。     

Acid-Catalyzed Peptide Bond Hydrolysis of Recombinant Human Interleukin 11

Recombinant human interleukin 11 (rhIL-11) is a multispectrum cytokine that plays an important role in megakaryocytopoiesis and platelet production. Probing rhIL-11 chemical reactivity in aqueous solution is an important initial step in developing a dosage form for rhIL-11 clinical trials. This report documents rhIL-11 degradation kinetics at 50°C in solutions adjusted to pH 3.0 to 9.5. Stressed samples were analyzed by reverse-phase HPLC and degradation product peaks were isolated for structural characterization. The results show maximal stability in the region pH 6.5 to 7.0. Degradation product identification shows that the major reaction pathway in acidic solution involves peptide cleavage at aspartate₁₃₃–proline₁₃₄. In alkaline solution, protein disappearance proceeds via nonspecific loss to container surfaces. Degradation products at alkaline pH have not been identified.     

新钙调素抑制剂E6对纯化的原代培养大鼠脑微血管内皮细胞上P-糖蛋白活性的影响

目的：研究新的钙调素抑制剂E6对纯化的原代培养大鼠脑微血管内皮细胞上P-糖蛋白活性的影响．方法：使用流式细胞仪纯化大鼠脑微血管内皮细胞，通过检测P-糖蛋白底物罗丹明123在大鼠脑微血管内皮细胞中的荧光评估E6对P糖蛋白功能的影响．结果：使用流式细胞仪能将大鼠脑微血管内皮细胞从其它杂细胞中分离纯化，3，10μmol／LE6和50umol／L维拉帕米能显著提高大鼠脑微血管内皮细胞内罗丹明123的含量（P〈0.01),10μmol/L E6能使罗丹明123的胞内浓度增加接近三倍,而无P-糖蛋白表达的人脐静脉内皮细胞中的罗丹明123浓度则不受影响.结论:E6能显著抑制大鼠脑微血管内皮细胞上P-糖蛋白活性.     

Evidence that genetic deletion of the TNF receptor p60 or p80 inhibits Fas mediated apoptosis in macrophages

Almost 19 members of the tumor necrosis factor (TNF) superfamily have been identified that interact with 29 different receptors. Whether these receptors communicate with each other is not understood. Recently, we have shown that receptor activator of NF-kappaB ligand signaling is modulated by genetic deletion of the TNF receptor. In the current report, we investigated the possibility of a cross-talk between Fas and TNF-alpha signaling pathway in macrophage cell lines derived from wild-type (WT) mice and from mice with genetic deletion of the type 1 TNF receptor (p60(-/-)), the type 2 TNF receptor (p80(-/-)), or both receptors (p60(-/-)p80(-/-)). We found that the macrophages expressing TNF receptors were highly sensitive to apoptosis induced by anti-Fas. The genetic deletion of TNF receptors, however, made the cells resistance to anti-Fas-induced apoptosis. Anti-Fas induced activation of caspase-3 and PARP cleavage in WT cells but not in TNF receptor-deleted cells. This difference was found to be independent of the expression of Fas, Fas-associated protein with death domain (FADD) or TNF receptor-associated death domain (TRADD). We found that anti-Fas induced recruitment of TNFR1 into Fas-complex. We also found that TRADD, which mediates TNF signaling, was constitutively bound to Fas receptor in TNF receptor-deleted cells but not in wild-type cells. Transient transfection of TNFR1 in TNFR1-deleted cells sensitized them to anti-Fas-induced apoptosis. Overall our results demonstrate that Fas signaling is modulated by the TNF receptors and thus provide the evidence of cross-talk between the receptors of two cytokines.     

血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10在儿童肺炎支原体肺炎中的应用价值

目的：对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)浓度在儿童肺炎支原体肺炎(MPP)中的应用价值进行探讨。方法90例肺炎支原体肺炎患儿作为肺炎组,其中轻症组50例,重症组40例;100例健康体检儿童作为对照组,对比肺炎组与对照组血清TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10指标及轻症组与重症组血清中的各因子浓度。结果对照组与肺炎组治疗前血清中TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10浓度差异具有统计学意义(P<0.05);肺炎患儿轻症组与重症组血清中IL-10浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05), TNF-α、IL-6及IL-8浓度均显著低于重症组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10指标同肺炎支原体感染有一定的相关性,并且同MPP病情程度有着密切关系,能够作为临床诊断、治疗及预后评价指标。     

制备流感疫苗的细胞基质研究进展

考虑到鸡胚生产流感疫苗的局限性,研究者们开始关注细胞培养疫苗生产技术.此文主要介绍了几种常用的细胞基质(如Vero、PER.C6、Madin-Darby狗肾细胞和其他动物细胞),阐述了利用细胞培养技术制备流感疫苗的方法及研究进展.相关研究显示细胞基质生产的流感疫苗与鸡胚生产的流感疫苗相比,效果相似或者更好.     

萆薢分清丸联合头孢唑肟钠治疗尿路感染的临床研究

目的探讨萆薢分清丸联合头孢唑肟钠治疗尿路感染的临床疗效。方法选取2015年11月—2017年1月在上海市宝山区中西医结合医院进行治疗的尿路感染患者200例,随机分为对照组(100例)和治疗组(100例)。对照组患者静脉滴注注射用头孢唑肟钠,2 g/次,2次/d。治疗组在对照组的基础上口服萆薢分清丸,6 g/次,2次/d。两组患者均连续治疗7 d。观察两组患者临床效果,比较两组患者治疗前后临床症状改善时间和血清细胞因子水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床有效率分别为83.00%和97.00%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组患者尿频、尿急和尿痛改善时间比对照组显著缩短,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和白细胞介素-6(IL-6)水平均显著降低,同组比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组患者的细胞因子水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论萆薢分清丸联合头孢唑肟钠可有效改善尿路感染患者临床症状,降低机体PCT水平,具有一定的临床推广应用价值。