中国HIV感染长期不进展者相关免疫指标的研究

目的:研究中国HIV感染长期不进展者(Long-term nonprogressors,LTNP)相关免疫指标的变化。方法:采集284例未经抗HIV治疗的LTNP、典型进展的HIV感染者和AIDS病人及130例HIV抗体阴性健康人的抗凝全血,应用流式细胞仪分析技术对CD8+T淋巴细胞、NK细胞及DC细胞进行测定。结果:LTNPCD8+T淋巴细胞绝对值[(1104.51±511.81)个/μl]高于AIDS病人[(678.40±295.39)个/μl,P<0.05]。LTNPNK细胞的绝对值[(377.59±289.23)个/μl]显著高于HIV感染者[(292.49±445.87)个/μl]和AIDS病人[(153.62±110.36)个/μl,P<0.05]。LTNPCD123+DCs细胞绝对值[(6.76±3.74)个/μl]高于HIV感染者[(5.30±3.16)个/μl]和AIDS病人[(3.32±2.09)个/μl,P<0.05]。LTNPCD11c+DCs细胞绝对值[(21.73±11.92)个/μl]高于HIV感染者[(14.51±9.53)个/μl]和AIDS病人[(7.27±3.74)个/μl,P<0.05]。结论:LTNPCD8+T淋巴细胞、NK细胞和DC细胞高于典型进展的HIV感染者和AIDS病人,是延缓疾病进程的重要因素。     

一种经济简单的方法扩增Vγ9Vδ2T细胞

目的体外以仲丁胺刺激健康人外周血PBMC中Vγ9Vδ2T细胞的增殖,为γδT细胞的过继免疫治疗建立效应细胞制备平台。方法淋巴细胞分离液分离健康人外周血的PBMC,以10~6/孔接种于24孔板,用含10%胎牛血清、1mmol/L仲丁烷和200U IL-2的1640完全培基连续培养2周。结果有效地扩增出了Vγ9Vδ2T细胞,其组成高达85%以上,所扩增出的Vγ9Vδ2T细胞能有效地杀伤Daudi细胞。结论使用小分子的胺基抗原能有效地扩增出有功能的Vγ9Vδ2T细胞,为γδT细胞的过继免疫治疗建立了效应细胞制备平台。     

T细胞表面6种细胞表型的变化与大型癌分期及术式的关系

应用流式细胞仪检测３９例大肠癌患者手术前后Ｔ细胞表面６种细胞表型。发现随着Ｄｕｋｅｓ分期的增高，术前ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８，ＣＤ１６，ＣＤ６９及ＣＤ＾３＋／ＨＬＡ－ＤＲ＾＋下降，ＣＤ８逐渐增高；Ａ期大肠癌患者机体免疫功能活跃，术前ＣＤ３，ＣＤ４高于对照组，ＣＤ８，ＣＤ４／ＣＤ８，ＣＤ１６，ＣＤ＾＋３／ＨＬＡ－ＤＲ＾＋与对照组相同．     

CD54和LFA-1的相互作用在6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的JurkatT细胞的黏附性增强中的作用

目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)的黏附性增强中的作用。方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强，用细胞与细胞间黏附分子-1-人IgG的Fc片段(ICAM-1-Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试验研究CD54-LFA-1的作用，用单克隆抗体MEM-148检测As细胞LFA-1亲和力的变化，用单克隆抗体NKI-L16检测AS细胞LFA-1亲合力的变化，用鬼笔环肽染色细胞骨架，用Jurkat-Raji细胞间的作用作模型研究6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对T和B细胞间黏附的影响，用ConA结合试验检测细胞中蛋白质N-糖基化的变化。结果(1)AS细胞间的黏附性增强主要与CD54及CD11a表达的增强相关，也与LFA-1亲和力的增高相关；(2)AS细胞的细胞骨架发生重排；(3)As细胞与Raji细胞间的黏附也增强；(4)ConA与AS细胞的结合增强。结论CD54和LFA-1的相互作用在AS Jurkat T细胞的黏附性增强中起重要作用。细胞骨架重排也可能起作用。As细胞的蛋白质发生了N-糖基化修饰。     

γ型干扰素、CD4+CD25+调节性T细胞与自身免疫病

γ型干扰素在适应性免疫应答中起重要作用.在MHC-Ⅱ类分子限制性自身免疫病中,T细胞反应主要以1型辅助性T细胞(Th1)为主,并伴有IFN-γ水平增高,而剔除小鼠胸腺来源的CD4 CD25 调节性T细胞则导致自身免疫病的发生,有研究认为调节性T细胞在诱导免疫耐受产生的过程中起关键性作用.IFN-γ及其受体缺陷小鼠的CD4 CD25 调节性T细胞的免疫抑制能力明显受损,这表明IFN-γ及其受体在CD4 CD25 调节性T细胞免疫调节作用中以及在自身免疫病发生中可能发挥重要而复杂的免疫调节作用.本文仅就IFN-γ与调节性T细胞及自身免疫病发病三者之间关系的研究进展进行简要综述.     

注射型藻酸钙/BMP复合材料的制备及成骨性能研究

研究藻酸钙（CaAG）／BMP-2复合材料的成骨性能，并观察骨髓基质细胞（BMSC）的加入对成骨性能的影响。采用藻酸钠、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和氯化钙（CaCl2）混合制备藻酸钙／BMP复合材料，以加有骨髓基质细胞的该材料为对照，进行体外观察和肌袋试验，通过用X射线、ALP染色、Von Kossa染色、HE染色、新生骨计量等方法，研究其诱导成骨活性。CaAG-BMP组和CaAG-BMP—BMSC组均在4～6周形成新生骨组织，两组标本均为编织骨形态．X线检查、AKP染色、Von Kossa染色、HE染色提示成骨过程相似。两组在新生骨计量上无显著性差异。藻酸钙／BMP复合材料可在肌肉环境下有效形成一定体积的新生骨组织；应用骨骼肌异位诱导成骨原理，该复合材料在成骨过程中无需加入外源性的种子细胞。     

人外周血T细胞活化状态对血卟啉单甲醚吸收的影响

目的：观察健康人外周血T细胞的活化状态对其吸收新型光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的影响。以期为进一步研究HMME-PDT对活化T细胞选择性作用提供实验依据。 方法： 以流式细胞仪检测孵育浓度和孵育时间对活化T细胞吸收HMME的影响。密度梯度法常规分离人外周血淋巴细胞，分别以多克隆刺激剂PHA和PDB+Ion刺激T细胞活化，同时设立未加刺激剂的静止T细胞作对照。在评价孵育浓度对T细胞吸收HMME的影响时，将上述处理的淋巴细胞分别与0、5、10、20、30和40 mg/L的HMME孵育1 h，经CD3抗体染色后进行T细胞HMME吸收分析。在评价T细胞活化状态对HMME吸收量与孵育时间相关性的影响时，将培养的淋巴细胞与10 mg/L的HMME分别孵育0-160 min后进行检测。 结果： T细胞的活化使其HMME吸收量的孵育浓度相关曲线以及孵育时间相关曲线较静止T细胞右移和上移。在一定孵育浓度范围内(5-20 mg/L)，活化T细胞对HMME的吸收量明显大于静止T细胞，差别具有统计学意义。然而，随着孵育浓度的进一步增加，活化T细胞与静止T细胞对HMME吸收量的差异逐渐减小。在10 mg/L HMME孵育浓度的条件下，不论活化与否，随着孵育时间的延长，T细胞内HMME的吸收量在逐渐增强。在15-60 min之间，活化T细胞HMME吸收量明显高于静止T细胞。 结论： 活化T细胞与静止T细胞HMME吸收量的差别取决于其孵育浓度和孵育时间，在一定孵育浓度和孵育时间范围内，活化T细胞HMME的吸收量明显高于静止T细胞，提示这可能有助于形成选择性删除活化T细胞的剂量关联和时间关联的HMME-PDT治疗窗口。     

利用神经网络集成预测MHC-Ⅰ类分子结合肽

目的：利用神经网络集成（NNE）预测MHC-Ⅰ类分子结合肽。 方法： 基于HLA-A*0201编码的MHC-Ⅰ类分子结合肽数据库（含有628个9聚物）及其结合能力分类，利用NNE分别对具有无、低、中和高4类亲合性的结合肽进行分类预测；同时还进一步利用T细胞真实表位集（含50个表位）评估了NNE的预测性能。 结果： 集成数为12的NNE对上述分类的平均预测命中率可达0.8,而且NNE对潜在T细胞表位的预测能力也较高，约84%的真实表位归于高和中等亲合性的潜在抗原肽一类。 结论： 可以利用神经网络集成预测MHC-Ⅰ类分子结合肽，并进而预测相应的T细胞表位。经适当修改，NNE预测工具可扩展为能涵盖任意长度的Ⅰ类分子结合肽甚至可扩展到Ⅱ类分子结合肽的预测。     

细胞因子对T细胞生长激素基因表达的影响

目的 探讨各种细胞因子对T细胞生长激素（GH）基因表达的影响。方法 构建含人GH调控序列的荧光素酶报告基因质粒pGL2-GH-luc，然后转染入T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞中，在培养液中分别加入各种细胞因子。结果 生理浓度的IL－1β，TNF－β和IFN－γ，对Jurkat细胞中荧光素酶的表达具有抑制作用（P＜0．05）。结论 细胞因子参与了调节淋巴细胞GH基因的表达。     

SARS病人外周血T淋巴细胞的动态变化及其在发病进程和发病机理中的意义

目的 :通过研究严重急性呼吸综合征 (SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)患者外周血免疫细胞的动态变化 ,探讨外周血免疫细胞在SARS发病进程中的意义 ,初步探讨SARS的发病机理 ,并为SARS的诊断和治疗提供有力的实验室依据。方法 :回顾性动态观察我院收治的已治愈SARS病例和SARS死亡病例外周血CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞 ,评估外周血免疫细胞在SARS发病进程及预后中的作用。实验方法为流式细胞术检测和分析免疫细胞表面特异性荧光抗体标记 ,T细胞表面标志组合为CD3 CD8 CD4 5 CD4。结果 :所有治愈的SARS病人的CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞都有不同程度的可逆性下降 ,而所有的死亡病例有不可逆性显著下降 ,直至死亡。T细胞下降程度和维持的时间与病情密切相关。普通型SARS病例最低CD4 + T淋巴细胞数为 30 5± 15 0cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 139± 6 9cells μl(P <0 .0 0 1) ,普通型SARS病例最低CD8+ T淋巴细胞数为 2 2 3± 89cells μl(P <0 .0 0 1)、重型为 171± 92cells μl(P <0 .0 0 1)。所有普通型病例和大部分重型病例T淋巴细胞恢复正常 ,个别重型病例低于正常或接近正常 ,恢复后普通型平均为 991± 2 86cells μl,重型平均为 5 4 5± 2 2 5cells μl。恢复时间有所不同 ,普通型平均为 17± 5天