胰岛素样生长因子-1对甲状旁腺激素介导成骨细胞增殖及成骨活性的影响

目的：通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法,研究胰岛素样生长因子－1（Insulin－like growth factor－1,IGF－1）及IGF－1联合重组人甲状旁腺激素1－34（recombinant human parathyroid hormone 1－34,rhPTH1－34）对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法培养乳鼠成骨细胞,并观察其形态及功能,以原代培养乳鼠成骨细胞为实验模型,分空白组、PTH组、IGF－1组及不同浓度IGF－1作用的PTH介导的成骨细胞组（0、10、50、100 ng／L）。通过不同剂量的胰岛素样生长因子－1（0、10、50、100 ng／L）联合10－9 mol／L重组人甲状旁腺素刺激体外培养的成骨细胞,用噻唑蓝（ MTT）法检测细胞的增殖能力,RT－PCR法检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 PTH和IGF－1均可促进成骨细胞增殖;IGF－1联合PTH可以促进成骨细胞增殖,且具有剂量依赖性。 PTH联合IGF－1使成骨细胞增殖能力增强、I型胶原蛋白mRNA表达增强。 IGF－1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。 IGF－1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。结论 PTH与IGF－1均可刺激成骨细胞增殖和分化,IGF－1可促进PTH对成骨细胞的分化、增殖。两者合用其作用增强,有协同促进作用。     

Rodent Osteoblastic Cells Express Voltage-Sensitive Calcium Channels Lacking a γ Subunit

Voltage-sensitive calcium channels (VSCC) open in response to external stimuli, including calcitropic hormones, that alter plasma membrane calcium (Ca²⁺) permeability. Ca²⁺ that enters the cell through these channels serves a second messenger function, eliciting cellular responses that include secretion and changes in gene expression. In osteoblasts, VSCCs serve as key regulators of Ca²⁺ permeability and are a major class of calcitropic hormone-sensitive Ca²⁺ channels present in the plasma membrane. The members of the VSCC family exist as a complex of polypeptide subunits that are comprised of a pore-forming ₁ subunit, an intracellular subunit, a dimer of disulfide-linked ₂ and subunits, and in some tissues, a subunit. Previous studies in our laboratory have shown that the major functional ₁ subunit present in osteoblasts is the _1C (Ca_V1.2). To determine the complement of auxiliary subunits present in rodent osteoblastic cells, we employed RT-PCR using a battery of subunit specific primers and appropriate tissue controls. Immunohistochemistry also was performed, using available subunit specific antibodies, to measure protein expression and localization. Cell types examined included MC3T3-E1 at various stages of differentiation, ROS 17/2.8 osteosarcoma, and primary cultures of rat calvarial osteoblasts. The results indicate that all cells expressed multiple subunit classes and ₂ dimers, but no subunits, regardless of differentiation state. We propose a structure for the functional osteoblast VSCC that consists of ₁, , ₂ subunits and is devoid of a subunit.     

骨康含药血清对成骨细胞PDGF-AA表达影响的实验研究

目的 观察中药骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞血小板衍生生长因子-AA（PDGF—AA）基因表达的调控作用。方法 将实验动物随机分成中药组、罗盖全组和蒸馏水组3组，通过体外分离和培养成骨细胞体系，运用逆转录法测定含药血清对成骨细胞PDGF-AA mRNA表达的影响。结果 用10％的血清培养成骨细胞第7d时，与空白血清组相比，骨康含药血清组和罗盖全含药血清组对成骨细胞PDGF—AA mRNA表达的平均影响率分别为149．4％和177．7％。结论 中药骨康含药血清能明显增强成骨细胞PDGF—AA mRNA的表达。     

人成骨细胞与外周血单核细胞共同培养诱导破骨细胞样细胞

目的 探讨人外周血单核细胞与原代人成骨细胞共同培养体外转化为破骨细胞样细胞的条件，并观察其体外生长，功能情况。方法 分别分离培养人成骨细胞，外周血单核细胞，并在含1，25（OH）2D3（10^-7mol/L），地塞米松（10^-8mol/L)及巨噬细胞集落刺激因子（M－CSF）（25ng/ml)的条件液中共同培养，用相差显微,抗酒石酸酸性磷酸酶染色（TRAP）观察破骨细胞样细胞生长情况，应用扫描电镜（SEM）观察骨片隐窝以反映其功能。结果 共同培养中的单核细胞逐渐融合；TRAP染色阳性多核细胞在第7天明显增多；骨片隐窝呈现多种形态。结论 人原代成骨细胞与人外周血单核细胞共同培养可以诱导出破骨细胞样细胞，但应该选择分化程度较低的细胞以及控制接种密度。     

阿仑磷酸钠和辛伐他汀对体外培养成骨细胞的影响

目的探讨辛伐他汀和阿仑磷酸钠对体外培养成骨细胞的影响。方法分离3周龄成骨细胞，体外培养时以辛伐他汀和阿仑磷酸钠刺激，观察成骨细胞碱性磷酸酶水平和成骨细胞增殖率。结果辛伐他汀、阿仑磷酸钠可以促进成骨细胞增殖，增加碱性磷酸酶的分泌，二者共同作用后作用更显著。结论辛伐他汀和阿仑磷酸钠能促进成骨细胞增殖和分泌碱性磷酸酶，可以联合作用促进骨形成。     

氟化钠对乳鼠成骨细胞c—fos,c—jun基因表达及细胞增殖？…

目的 探讨氟对钠（ＮａＦ）对离体成骨细胞ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ基因表达的调控及细胞增殖的影响。方法 采用新生大鼠头盖骨分离成骨细胞,在不同浓度ＮａＦ（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）中进行培养,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖,用免疫组化ＳＰ法结合计算机图像处理系统检测ＮａＦ诱导的ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ表达。结果 实验表明ＮａＦ可刺激成骨细胞增殖,并诱导成骨细胞     

氟对骨的影响研究进展

综述了氟对骨的作用特性、致病特点以及氟对成骨细胞、破骨细胞的作用,以期为氟骨病的基础和临床研究提供文献依据。     

不同月龄雌性SD大鼠成骨细胞内雌激素受体表达规律分析

目的探讨不同月龄雌性SD大鼠成骨细胞内雌激素受体表达规律,以此拟描述不同年龄人类女性个体成骨细胞内雌激素受体表达的生理曲线。方法以不同月龄雌性SD大鼠为标本,二次酶消化法收集成骨细胞并培养,倒置相差显微镜观察成骨细胞形态,钙钴法碱性磷酸酶染色、上清液碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(OCN)检测对成骨细胞进行鉴定。结果二次酶消化法获得的成骨细胞,形态呈多边形,碱性磷酸酶染色阳性细胞染色率80%,不同培养时间的成骨细胞和成纤维细胞上清液碱性磷酸酶和骨钙素含量相比较成骨组明显高于成纤维组。结论二次酶消化法可获得较多的成骨细胞,符合成骨细胞的生物学特性,可作为成骨细胞相关研究的细胞来源。     

生物降解性骨组织工程支架材料-可吸收性珊瑚羟基磷灰石

目的：比较可吸收性珊瑚羟基磷灰石(BCHA) Interpore 500R、珊瑚羟基磷灰石(CHA) Interpore 500及天然角孔珊瑚(NGC)复合成骨细胞后，在动物体内形成新骨数量和质量上的差异，对它们作为骨组织工程支架材料的优劣做出评价。方法：应用x一射线衍射分析仪对孔径为500μm的Interpore 500R、Interpore 500及NGC的组成成分进行比较，将三种材料制成标准大小的薄片，植入裸鼠体内，测定不同时间点的降解率。同时将生长状态良好的成骨细胞接种于三种支架材料上，体外孵育4～6h后植入裸鼠背部皮下，分别于术后30、60和90天取材，测量其体积变化，并进行组织学观察，利用图像分析系统测定三种残余材料与形成新骨的面积百分比。结果：Interpore 500R的主要化合物成分为90％文石 10％羟基磷灰石(HA)。它具有高孔隙率，孔隙大小分布均匀，孔隙间交通好。Interpore 500R的生物降解率介于Interpore 500和NGC之间，但从组织工程骨形成的数量、质量上来看均高于其他两种。结论：BCHA作为骨组织工程支架材料明显优于CHA和天然珊瑚(NC)，是目前较为理想的骨组织工程支架材料。