Mycobacteria-reactive γδ T cells in HIV-infected individuals: lack of Vγ9 cell responsiveness is due to deficiency of antigen-specific CD4 T helper type 1 cells

Human γδ T lymphocytes expressing the variable T cell receptor elements Vγδ paired with Vδ2 are activated by antigen derived from Mycobacterium tuberculosis (M. tb.) and presented by antigen-presenting cells (APC). The subsequent proliferation is strictly dependent on the presence of CD4⁺TCRαβ⁺ T helper type 1 (Th1) cells producing interleukin-2 (IL-2). In this study, we report that the reactivity of Vγ9 cells to M. tb. stimulation in vitro was drastically decreased or absent in the majority of the analyzed HIV-1-infected individuals (CDC stages III and IV). We show that the failure of Vγ9 cells frim HIV^? individuals to proliferate following M. tb. stimulation was not due to an intrinsic qualitative or quantitative defect of γδ T cells but rather to a deficiency of M. tb.-reactive CD4 Th1 cells. Thus, Vγ9 responsiveness could be restored if cultures of M. tb.-stimulated T cells from HIV⁺ donors were reconstituted with one of the following: (i) exogenous IL-2; (ii) purified CD4T cells from allogeneic donors; or (iii) T cell-depleted APC from allogeneic donors. In the majority of HIV⁺ patients, the defective Th1 activity of M. tb.-stimulated CD4 T cells could be increased neither by cytokines known to favor Th1 development (IL-12, interferon-γ) nor by neutralization of the Th1-suppressing Th2 cytokine IL-10. We suggest that measurement of Vγ9 cell expansion within M. tb.-stimulated peripheral blood mononuclear cells provides a sensitive assay for the functional capacity of antigen (M. tb.)-specific CD4 Th1 cells in HIV-infected individuals.     

Nodular lepromatous leprosy: Report of a case diagnosed by FNA

Lepromatous leprosy can present with skin nodules which can be misdiagnosed as soft tissue tumors or infected cysts. FNA can be diagnostic of unstained, refractile, intracellular mycobacteria are recognized on Romanowsky stained smears. File stain for Mycobacterium leprae confirms the diagnosis. Awareness of the differential diagnosis of skin nodules yielding foamy histiocytes on FNA, briefly discussed, should help avoid error. Diagn Cytopathol 1994; 11:373–375. © 1994 Wiley-Liss, Inc.     

日本血吸虫32ku抗原基因的克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

日本血吸虫３２ ｋｕ抗原（简称ｓｊ３２ｋｕ）是血吸虫的一种保护性抗原,为研究其重组疫苗的保护作用,将该抗原基因的全编码序列按正确的阅读框顺序插入到穿梭质粒 ｐＢＣＧ２１００,受控于人结核杆菌热休克蛋白 ７０（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ ７０,简称ｈｓｐ７０）启动子,构建成重组表达质粒 ｐＢＣＧ－ｓｊ３２,在大肠杆菌－分枝杆菌两个系统中能稳定复制。重组分枝杆菌于 ４２℃诱导 ２ ｈ或 ４５℃诱导 ３０ ｍｉｎ,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,在 ３２ ｋｕ的位置能见到明显的蛋白条带,表明 ３２ ｋｕ抗原能在分枝杆菌中高效表达。     

Biodiversity of amoebae and amoeba-associated bacteria in water treatment plants

In this study, we enlarged our previous investigation focusing on the biodiversity of chlamydiae and amoebae in a drinking water treatment plant, by the inclusion of two additional plants and by searching also for the presence of legionellae and mycobacteria. Autochthonous amoebae were recovered onto non-nutritive agar, identified by 18S rRNA gene sequencing, and screened for the presence of bacterial endosymbionts. Bacteria were also searched for by Acanthamoeba co-culture.     

广东省广州市2001—2004年分枝杆菌初步菌种鉴定与药物敏感性试验结果分析

目的了解广州市2001—2004年3年间分枝杆菌菌种的分布状态和抗结核药物的耐受性情况,为临床诊断和治疗结核病提供可靠的科学依据。方法对2001年9月—2004年3月从1 459例患者中共分离出的2 154株分枝杆菌进行菌种鉴定,并采用绝对浓度间接法对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌进行4种抗结核药物的敏感性试验。结果非结核分枝杆菌的分离率由1998年7月—2001年9月的16.5%上升至20.3%;对2 154株分枝杆菌中的1 703株结核分枝杆菌复合群菌株进行的药物敏感性试验结果显示:原始耐药率由1998年7月—2001年9月的14.4%上升至20.3%。继发耐药率则由原来的35.4%下降至32.3%;而非结核分枝杆菌对抗结核药物基本上呈现高度的原始耐受性。结论对临床分离出的阳性标本,有必要进行分枝杆菌的菌种鉴定和药物敏感性试验。     

29株偶然分支杆菌耐药性观察

目的　了解偶然分支杆菌耐药性。方法 确定的 2 9株偶然分支杆菌临床分离株 ,进行主要抗结核药物作耐药性测定。结果 对氧氟沙星、左氧氟沙星敏感 ,对 6种抗结核分支杆菌药单一药敏试验均耐药。 2～ 3种药物联合药敏试验显示低浓度耐药 ,高浓度敏感。结论 建议采用敏感抗生素联合有协同作用的抗结核药进行化疗 ,可望取得临床治愈效果。     

分支杆菌临床分离株的16S-23S rRNA基因转录间隔区的序列分析

目的　建立鉴定分支杆菌分离株的 16S - 2 3SrDNA转录间隔区 (internaltranscribedspacer ,ITS)序列分析的方法 ,用该方法对临床分离株进行鉴定。方法　对从重庆某医院分离的 2 9株分支杆菌菌株分别进行了PCR扩增 ,得到它们的16S - 2 3SrDNAITS片段 ,并测定所得到片段的DNA序列。用DNA分析软件将所获得的序列与GenBank的分支杆菌序列相比较 ,计算种间相似性 ,并用序列构建分支杆菌菌株的系统发育树 ,对分离株进行鉴定。结果　在ITS序列分析中 ,有 10株的序列分别与结核分支杆菌复合群 (Mycobacteriumtuberculosiscomplex ,MTC)、戈登分支杆菌 ,脓肿分支杆菌的序列完全一致。依据完全一致的序列可以准确鉴定这些临床分离株为相应的种 ;4株 16SrDNA序列分析不能准确鉴定的分离株中其中 3株(M 4、M 5、M 12 )鉴定为戈登分支杆菌 ,1株 (M 2 3)鉴定为脓肿分支杆菌。部分分离株的的ITS序列在GenBank序列检索中无完全一致的匹配序列 ,这些不同的序列之间的相似程度为 2 7.1%～ 99.2 %。用临床分离株的ITS序列与其最相似的已知分支杆菌的ITS序列构建的系统发育树 ,菌株分群与 16SrDNA序列构建的系统发育树的分群基本一致。结论　分支杆菌的16S - 2 3SrDNAITS序列比 16SrDNA序列有更大的多样性 ,该序列分析可作为     

分支杆菌临床分离株的16S rRNA基因序列分析

目的　建立分支杆菌的 16SrDNA序列分析的方法 ,采用该方法鉴定临床结核分支杆菌分离株。方法　用PCR从重庆某医院的肺部感染病人的痰标本中分得的 2 9株分支杆菌菌株中扩增 16SrRNA基因 (16SrDNA)的 5′端片段 (～5 0 0bp) ,并测定所得到片段的DNA序列。用DNA分析软件将所获得的序列与GenBank的分支杆菌序列相比较 ,计算种间相似性 ,并用序列构建分支杆菌菌株的系统发育树 ,对分离株进行分类与鉴定。结果　有 14株的 16SrDNA序列分别与已知结核分支杆菌复合群 (Mycobacteriatuberculosiscomplex ,MTC)、戈登分支杆菌、新金色分支杆菌、氯酚红分支杆菌、龟分支杆菌或脓肿分支杆菌的序列完全相同。依据完全一致的序列可以准确鉴定这些临床分离株为相应的种 ;部分分离株的 16SrDNA在GenBank序列检索中无完全一致的匹配序列。用临床分离株的 16SrDNA序列与已知的分支杆菌 16SrDNA序列构建的系统发育树 ,结果提示某些菌株可能是与已知分支杆菌密切相关的新种或是它们的亚种。结论　 16SrDNA序列分析鉴定分支杆菌是一种快速、可靠、成本较低的方法 ;重庆地区非结核分支杆菌感染的种类与其它地区的报告有明显不同     

RAPD技术在武汉地区结核分枝杆菌指纹分型中的应用

目的探讨武汉地区结核病的分子流行病学规律。方法采用DNA随机扩增多态性(RAPD)指纹分型法,对武汉市129例肺结核患者的结核分枝杆菌进行基因指纹分型。结果129株中以Ⅰ型菌株(46株,35．7％)、Ⅱ型菌株(32株,24．8％)、Ⅲ型菌株(26株,20．2％)为主。初治与复治者的RAPD指纹类型的分布有显著性差异(P＜0．05)。所检菌株耐药与否,在RAPD指纹类型中分布也有显著性差异(P＜0．05)。耐药菌株中主要以耐链霉素为主(81．2％)。结论RAPD指纹分型是一种较好的分型方法。武汉地区结核病主要由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型菌株引起,但耐药病例主要由Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型菌株引起。     

贝达喹啉、氯法齐明和德拉马尼对常见致病性非结核分枝杆菌体外抑菌活性及耐药机制的研究进展

近年来,非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria, NTM)引起的感染呈逐渐上升趋势,严重威胁人类健康。NTM致病的菌种繁多,不同菌种NTM对药品的敏感性各异,使其治疗存在较大困难。因此,寻找NTM病治疗效果较佳的药品非常有必要。NTM种属分布常具有地域特点,在多数地区鸟-胞内分枝杆菌复合群、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌为较常见的致病菌种。贝达喹啉(bedaquiline, Bdq)、氯法齐明(clofazimine,Cfz)及德拉马尼(delamanid,Dlm)因对治疗NTM病体现出了良好的治疗潜力而受到泛关注。为了提高对抗NTM药品敏感性及耐药机制的认识,作者就Bdq、Cfz和Dlm对以上常见致病性NTM的体外抑菌活性及耐药相关机制进行综述。