中期因子对骨折愈合过程微血管生成影响的实验研究

目的 探讨中期因子对骨折端微血管生成对骨折愈合的影响。 方法 采用兔尺骨骨折模型,给以中期因子持续刺激骨折端7天为实验组,给予生理盐水刺激的为对照组,然后在21、42、63、84天,分别获取标本。采用组织学Lane-sandhu评分分析骨组织的生成;免疫组化分析骨折端VEGF和CD34表达来探讨骨折端的微血管生长情况,采用图像分析和MVD评分进行统计分析。 结果 组织学Lane-sandhu评分在42和63天实验组明显高于对照组,VEGF表达在42和63天实验组明显高于对照组;而CD34在42、63、84天周实验组明显高于对照组。 结论 中期因子通过刺激骨折端微血管增生增加是骨折端骨痂生长加快的原因,有利于骨折愈合。     

乳腺癌组织中Midkine、Survivin、MMP2基因用于预测预后

目的：探讨Midkine、Survivin、MMP2表达与乳腺癌预后的关系。方法：通过免疫组化方法检测临床随访病例的乳腺癌组织中Midkine、Survivin、MMP2的表达,并分析与临床随访资料的关系。结果：62例乳腺癌病例中23例（37.1%）3项表达均阳性,18例（29.0%）2项表达阳性,21例（33.9%）仅1项表达阳性或均阴性。随肿瘤分期上升,表达阳性率增加。以阳性率作为危险度,显示阳性率与远处转移发生（P〈0.001）,及5年存活率下降相关（P〈0.01）。结论：联合检测乳腺癌组织中的Midkine、Survivin、MMP2有助于判断预后。     

急性白血病患者血清中期因子定量检测及其临床意义

目的 探讨血清中期因子(MK)水平在急性白血病(AL)不同发展阶段的意义及其与WT1基因的关系.方法 用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测86例初治和完全缓解的AL患者组及30名健康对照血清中MK水平;用实时定量PCR法检测其中15例初治急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中WT1表达量.结果 初治组血清MK水平(中位数及四分位数)为7.52 ng/ml[(5.44,10.55)ng/ml],缓解组MK水平为3.52 ng/ml[(1.56,5.20) ng/ml],健康对照组MK水平为2.44 ng/ml[(1.89,3.12)ng/ml],初治组较缓解组和健康对照组水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.01),缓解组和健康对照组间MK水平差异无统计学意义(P＞0.05).初治B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)组血清MK水平为7.88 ng/ ml[(5.78,15.78) ng/ml],初治AML中MK水平为6.25 ng/ml[(4.59,16.33) ng/ml],两组间差异无统计学意义(P＞0.05);血清MK水平与骨髓中WT1基因表达量间存在相关性(r=0.529,P=0.043).结论 初治AL患者血清中MK表达水平升高,完全缓解后MK表达水平下降,ELISA法测定血清MK可以作为AL患者病情评价的手段之一;MK与WT1在基因定位上相邻,临床意义相近,并且血清MK和WT1基因在定量上存在相关性.     

老年性痴呆患者血清中期因子水平检测及意义

目的 探讨血清中期因子（MK）表达水平与老年性痴呆（AD）疾病的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测39例AD患者和42例正常对照组血清MK表达水平.结果 AD患者血清MK水平高于正常对照组（P＜0.01）.28例AD患者（71.8％）血清MK表达水平高于界值（566 pg/ml）,对照组除1例外其他均低于界值（P＜0.01）.MK与AD有较强关联性（r=0.723,P＜0.05）,两组MK水平诊断试验显示特异性为0.98,阳性预测值为0.97,阳性似然比32倍,均显示有较大临床诊断价值.AD患者血清MK的高水平组与正常对照组的简明精神状态量表评分结果差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 血清中MK表达水平在AD患者中显著增加,可能与该疾病的病理进程有一定相关性,对AD患者特异性诊断有较高的价值.     

RNA干扰下调midkine基因表达对人乳腺癌细胞粘附和侵袭力的影响

目的探讨中期因子（midkine,MK）基因siRNA对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA—MB-231、MDA—MB-435、MDA—MB-468及ZR75—1细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测MK基因mRNA表达;筛选出MK表达最高者。采用MK siRNA转染乳腺癌细胞株,分别以荧光实时定量RT—PCR和免疫荧光方法观察MK基因mRNA和蛋白水平,然后以四唑蓝（MTT）比色法检测细胞粘附性,以Boyden小室方法检测癌细胞侵袭能力。结果7株乳腺癌细胞中,MK均有不同程度的表达,以MCF-7细胞最高;以MKsiRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后,癌细胞MK基因mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性;siRNA转染组细胞粘附数量明显下降,细胞侵袭力明显下降,均呈浓度依赖性（P〈0．01;P〈0．01）。结论MK基因在乳腺癌细胞粘附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染乳腺癌细胞,可抑制乳腺癌细胞粘附和侵袭能力。     

靶向中期因子反义寡核苷酸的体内抗肿瘤双应

目的 观察靶向中期因子反义寡核苷酸的体内抗肿瘤效应.方法 构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型48只,随机分6组,生理盐水对照组,MK-AS(每日25、50、100mg/kg)组,MK-Sen(每日50mg/kg)组和5-Fu(每日10 mg/kg)组,放免法检测血清AFP浓度,Western blot检测组织MK、p53、bax、bcl-2和Caspase-3蛋白水平.结果 (1)与生理盐水对照组比较,MK-AS治疗组的肿瘤体积明显减小,[(807.75±195.19)mm3比(552.75±84.38)、(532.00±121.57)、(294.50±70.66)mm3],差异有统计学意义(P<0.01);(2)MK.AS治疗组的肿瘤瘤重与生理盐水对照组比较显著降低,[(1.29±0.13)g比(0.70±0.14)、(0.64±0.18)和(0.44±0.18)g],差异有统计学意义(P<0.01);(3)MK-AS明显下调肿瘤组织MK和bcl-2蛋白的表达,而p53、bax、Caspase-3表达上调.结论 MK-AS具有明显的体内抗肿瘤效应;MK-AS的抗肿瘤效应可能与凋亡相关蛋白p53、bax、Caspase-3表达水平的上调和bcl-2的下调有关.     

胸苷磷酸化酶、中期因子及CD105在喉癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胸苷磷酸化酶(TP)、中期因子(MK)和CD105在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测43例喉鳞状细胞癌组织中TP、MK的表达和CD105标记的微血管密度(MVD)情况.结果:TP的阳性表达率为67.4%,MK的阳性表达率为60.5%,CD105标记的MVD值为6.01±1.78.TP和MK均为阳性时CD105标记的MVD值(7.07±3.26)明显高于TP和MK均为阴性时的MVD值(4.03±1.90)(P＜0.05).三者表达均与临床分期、淋巴结转移有关.单因素分析显示TP、MK表达和高MVD(≥6)均影响喉癌患者的生存期,但通过多因素分析显示只有淋巴结转移和MVD是影响喉癌患者生存期的预后因素.结论:TP、MK表达与喉癌血管生成关系密切,是喉癌肿瘤血管生成的重要因子,三者与喉癌进展、淋巴结转移密切相关.淋巴结转移和CD105标记的MVD是影响喉癌预后的因素;TP、MK可能通过促肿瘤血管生成作用对喉癌预后产生影响;TP、MK及CD105可作为一组有价值的肿瘤标记和预后指标.     

Midkine在局灶性脑缺血中的表达及意义

目的 探讨Midkine(MK)在局灶性脑缺血中的表达及意义。方法 采用腔内线栓法制成大鼠局灶性脑缺血模型LMCAO。应用RT-PCR检测缺血后1d组，2d组，14d组及对照组的MK表达情况。结果 在局灶性脑缺血后1d即有MK的表达，14d无MK表达，对照组呈阴性，结论 MK是一种即时表达因子。参与脑缺血急性期的修复。     

Stimulation of collagen expression and glycosaminoglycan synthesis by midkine in human skin fibroblasts

Midkine is a retinoid-inducible regulator of cell differentiation and cell growth in developing embryonic tissues. The effects of midkine on the expression of the extracellular matrix components, collagens and glycosaminoglycans, in dermal fibroblasts were studied. Midkine did not alter fibroblast proliferation. Collagen synthesis was stimulated in a dose- and exposure time-dependent manner and the maximum twofold stimulation was achieved at a concentration of 100 ng/ml for 72 h treatment. Midkine increased the synthesis of type I and III collagens to the same extent. Glycosaminoglycan synthesis was also stimulated twofold, mainly acounted for by an increase in hyaluronan synthesis. Midkine enhanced mRNA levels of α ₁ (I), α ₁ (III), α ₁ (VI) collagens, transforming growth factor β1 and matrix metalloprotease-2 but did not alter the mRNA levels of elastin, MMP-1 and tissue inhibitor of metalloproteases-1. These results suggest that midkine is a potent stimulator of collagen and glycosaminoglycan synthesis and may prove useful in the therapy of delayed wound healing. Received: 9 October 1996     

血清midkine检测在非小细胞肺癌辅助诊断及预后评估中的价值

目的探讨血清中期因子（S-MK）检测对非小细胞肺癌（NSCLC）辅助诊断的价值。方法选择NSCLC患者120例（观察组）,同期因肺部良性肿瘤住院的患者62例（肺良性肿瘤组）及健康对照组64例,采用ELISA法测定观察组患者术前及术后（S-MK）水平,以及肺良性肿瘤组和健康对照组的S-MK水平。结果NSCLC组（术前）S-MK水平为（285.70±20.52）pg/ml,高于肺良性肿瘤组（211.88±15.69）pg/ml和健康对照组（189.06±12.92）pg/ml（t=2.402、3.257,均P＜0.01）。NSCLC组（术后1个月时）S-MK水平（218.26±10.77）pg/ml,低于术前（285.70±20.52）pg/ml,差异有统计学意义（t=3.303,P＜0.01）。结论NSCLC患者S-MK水平升高,且术后出现一定程度的下降,S-MK水平可作为一种临床肿瘤标志物,为NSCLC的诊断、疗效评价提供一定的依据。