Role of midkine-progranulin interaction during angiogenesis of hepatocellular carcinoma

Midkine (MK) is a heparin-binding growth factor involved in growth, survival, migration, and differentiation of various target cells and dysregulation of MK signaling is implicated in a variety of inflammatory diseases and cancers. Although MK has been reported to act on endothelial cells and to have proangiogenic effects, the exact role of MK in angiogenesis is poorly defined. Progranulin (PGRN) is a secreted glycoprotein that functions as an important regulator of development, cell cycle progression, cell motility, tumorigenesis, angiogenesis. We screened the PGRN from the hepatic cancer cell cDNA library which was interacted with MK, and confirmed the binding by co-immunoprecipitation and co-localization. During our study, the interaction between MK and PGRN had the important role on the HUVECs proliferation, migration, and tubulogenesis, which indicated the interaction may regulate the angiogenesis, also the in vivo angiogenesis model CAM showed the promotion effect stimulated by MK and PGRN. These findings provide the first evidence linking the association of MK and PGRN and may identify the mechanism of MK during the hepatocellular carcinoma angiogenesis.     

中期因子及血管内皮生长因子在宫颈病变中的表达

目的探讨中期因子（midkine,MK）蛋白的表达水平与宫颈癌血管生成、增殖活性、侵袭和转移的关系。方法对20例慢性宫颈炎组织、20例宫颈上皮内瘤变组织（CIN）、20例宫颈癌组织标本进行免疫组化染色,分析MK及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果 MK在宫颈炎组织中不表达,在CIN、宫颈癌组织中呈阳性表达,且宫颈癌组织中MK表达水平与患者年龄、淋巴结转移无关,与临床分期、组织学分级、肿瘤直径大小、腺体浸润有关（P〈0.05）。VEGF在宫颈炎、CIN、宫颈癌组织中呈阳性表达,且宫颈癌组织表达显著高于CIN组织及宫颈炎组织（P〈0.05）。宫颈癌组织中VEGF表达水平与患者年龄、淋巴结转移无关,与临床分期、组织学分级、肿瘤直径大小、腺体浸润有关（P〈0.05）。宫颈癌组织中MK与VEGF的表达呈正相关（r=0.433,P〈0.05）。结论 MK可能在宫颈癌的发生过程中起到重要作用;可能与宫颈癌的浸润、转移相关。     

Midkine和Caspase-3在胰腺癌中的表达与细胞凋亡的关系

目的:研究人胰腺癌组织中Midkine(MK)和Caspase-3蛋白的表达特点,探讨其表达与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法:收集人胰腺癌组织标本49例,免疫组织化学SP法检测MK和Caspase-3蛋白的表达,原位凋亡检测试剂盒辣根过氧化物酶(TUNEL)检测细胞凋亡指数.以同期15例正常胰腺组织标本为对照.结果:MK蛋白、Caspase-3蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率高于正常胰腺组织(71.4%VS 0,P＜0.01;77.6% VS 46.7%,P＜0.05),MK蛋白表达与胰腺癌组织学分化、临床分期和淋巴转移相关(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达仅与组织学分化有关;胰腺癌组织标本中,MK阳性表达组凋亡指数显著低于MK阴性表达组(5.13±2.69 VS 7.93±6.65,P＜0.05);胰腺癌组织中MK与Caspase-3蛋白的表达呈负相关(r=-0.34.P＜0.05).结论:MKC和Caspase-3参与了胰腺癌的发生发展,MK在胰腺癌组织中的高表达具有抑制细胞凋亡的生物学功能,其作用机制可能是通过抑制Caspase-3的活性.     

肥胖伴血压晨峰患者血清中期因子水平与胰岛素抵抗的关系

目的探讨肥胖伴血压晨峰(morning blood pressure surge,MBPS)患者血清中期因子(midkine,MK)与胰岛素抵抗的关系。方法选择诊所血压正常的肥胖者100例和体质量正常的健康体检者47例(对照组),均行24 h动态血压监测,按MBPS结果肥胖患者分为血压晨峰组(MBPS≥35 mm Hg)42例和单纯肥胖组(MBPS<35 mm Hg)58例。采用酶联免疫吸附法检测外周血清MK含量,并测定空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、血浆胰岛素水平,采用稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistence index,HOMA-IR)来评价胰岛素抵抗,同时分析血压晨峰组患者MK水平与HOMA-IR的相关性。结果 1MK:与对照组和单纯肥胖组比较,血压晨峰组的血清MK明显升高[(0.86±0.11)、(0.90±0.15)比(1.44±0.32),P均<0.01];单纯肥胖组与对照组比较差异无统计学意义。2HOMA-IR水平比较:血压晨峰组(5.23±0.96)高于单纯肥胖组(2.72±0.37)和对照组(1.81±0.21),差异有统计学意义(P均<0.01);单纯肥胖组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3Pearson相关分析显示,血压晨峰组MK水平与HOMAIR呈正相关(r=0.494,P<0.01)。结论肥胖患者存在高胰岛素血症,合并血压晨峰的肥胖患者随着胰岛素抵抗程度的加重MK水平升高。胰岛素抵抗与血清MK可能共同参与了肥胖合并MBPS的发病。     

急性髓系白血病患者中期因子基因表达与化疗耐药及预后的关系

目的：探讨中期因子（Midkine，MK）与急性髓系白血病（AML）患者预后的关系。方法：采用半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测65例初治及复发AML患者、15例缓解期患者及15例正常人骨髓单个核细胞（MNCs）MK、mdr-1、bcl-2mRNA的表达，并采用蛋白印迹（Westernblot）法检测20例AML患者和5例正常人MNCs孵育24h后，培养基中MK的蛋白表达。结果：65例初治及复发AML患者中25例MK基因表达阳性，15例正常人MK基因表达均阴性。MK基因表达阳性患者的完全缓解（CR）率明显低于表达阴性者（分别为63．16％和93．55％，P〈0．05）；MK基因表达阳性患者的复发率（100％）明显高于表达阴性者（40．00％），P〈0．05。MK与bcl-2基因表达呈正相关（r=0．556，P〈O．01）。结论：AML患者白血病细胞可以产生MK，且MK阳性率的高低与AML病期相关，MK过度表达可能导致临床化疗耐药，是影响AML患者近期预后的重要因素之一。     

中期因子对大鼠急性心肌梗死后心室重构和基质金属蛋白酶9水平的影响

目的探讨中期因子(MK)对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心室重构及血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平的影响。方法雄性Wistar大鼠60只采用随机数字抽样法分为4组,每组15只:空白组(Control组),伪手术组(Sham组),AMI组,MK治疗组(MK组)。结扎大鼠左冠状动脉前降支制作AMI模型,模型建立成功后,MK组立即给予MK心肌注射。4周后,取各组剩余大鼠称重,测血流动力学指标;ELISA法测定血清MMP-9水平;心脏称重,计算心体比;取心尖部分切片,一部分MASSON染色,测定左心室游离壁梗死区厚度、长度和梗死面积,心肌梗死区及非梗死区胶原容积分数(CVF),另一部分HE染色,观察毛细血管生成情况。结果 A MI组较Control组和Sham组心室重构和心功能受损明显(P<0.05),血清MMP-9水平明显升高[(6.93±0.09)ng/ml比(4.66±0.06)ng/ml和(4.71±0.06)ng/ml,均为P<0.05];MK组较AMI组心室重构程度轻、心功能改善明显(P<0.05),血清MMP-9水平明显降低[(5.33±0.06)ng/ml比(6.93±0.09)ng/ml,P<0.05 ]。结论 AMI后立即给予MK能够有效抑制心室重构,改善心功能;降低血清MMP-9水平是MK发挥心肌保护作用的途径之一。     

Involvement of midkine in autoimmune and autoinflammatory diseases

Abstract

Midkine (MK) is a heparin-binding growth factor that markedly expressed during embryogenesis but downregulated to inconsiderable levels in healthy adults. However, MK is upregulated during tissue repair and in many pathologic conditions, mostly malignancies and inflammatory diseases. MK promotes a number of functions in target cells such as migration, proliferation, survival, growth, reproduction and repair, angiogenesis, and gene expression. It acts as a pro-inflammatory cytokine and contributes to chronic inflammation via promoting chemotaxis and tissue infiltration of neutrophils and macrophages. Furthermore, MK upregulated the production of various inflammatory mediators (i.e. interleukin (IL) 6 and IL8). Recent studies have demonstrated strong evidence that MK is involved in the onset and progression of autoimmune rheumatic diseases, including rheumatoid arthritis (RA), systemic lupus erythematosus (SLE), and Sjögren’s syndrome (SS) and other autoimmune conditions such as multiple sclerosis (MS). Additionally, it has been shown that MK is overexpressed in two major clinically defined forms of inflammatory bowel diseases (IBD), Crohn’s disease (CD) and ulcerative colitis (UC), which are classified as autoinflammatory diseases. Taken together, MK is involved in the pathogenesis of autoimmune and autoinflammatory diseases and may serve as an indicator and biomarker in these conditions. Furthermore, MK inhibitors are expected to contribute in the management of these diseases.     

肥胖伴隐匿性高血压患者血清中期因子水平分析

目的 探讨肥胖伴隐匿性高血压(masked hypertension,MH)患者血清中期因子(midkine,MK)水平及临床意义.方法 选择诊所血压(CBP)正常的肥胖者100例和体质量正常的健康体检者50例作为对照组,均行24h动态血压监测(ABPM).按日间血压监测结果,肥胖组被分为肥胖MH组(诊所血压正常,日间动态血压高于正常值)41例和单纯肥胖组59例.采用酶联免疫吸附法检测检测外周血MK含量.对比分析两组血清MK水平及其与日间血压的关系.结果 (1)MK比较:与单纯肥胖组和对照组比较,肥胖MH组血清MK明显升高(P均＜0.05);单纯肥胖组与对照组比较差异无统计学意义.(2)血压比较:肥胖MH组的dSBP、dDBP均明显高于单纯肥胖组和对照组(P均＜0.01).Pearson相关分析显示,肥胖MH组血清MK水平与dSBP、dDBP均呈正相关(P均＜0.01).结论 肥胖患者MH与血清MK水平有关,MK可能参与了肥胖患者高血压的发生发展过程.     

Midkine、MMP-2在胆囊癌中的表达及其临床意义

目的：探索中期因子（Midkine）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在胆囊癌中的表达水平及两者的相关性。方法：采用免疫组织化学方法检测40例胆囊癌和15例慢性胆囊炎中Midkine、MMP-2的表达,并结合临床特征分析两者的表达,数据统计采用SPSS 13.0统计软件完成。结果：Midkine、MMP-2在胆囊癌和慢性胆囊炎组织中的表达呈显著性差异（P〈0.05）;在胆囊癌组织中有无淋巴结转移、分化程度、远处转移组高表达率方面具有显著性差异（P〈0.05）,而在年龄、性别、肿瘤浸润程度组则无显著性差异（P〉0.05）。结论：Midkine、MMP-2共同参与了胆囊癌的发生、发展,促进肿瘤细胞的增殖、迁徙,临床上联合检测有利于胆囊癌的早期诊断及判定胆囊癌的生物学行为。     

中期因子在下咽癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨中期因子（Mikdine,MK）在下咽鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测47例下咽鳞状细胞癌组织中MK的表达,并根据检测结果分析与下咽癌各临床病理因素之间的关系。结果 MK的阳性表达率为68.08%,MK表达与临床分期、淋巴结转移有关。结论 MK与下咽癌分期及淋巴结转移具有相关性,与下咽癌的分化程度无相关性,可作为一个有价值的肿瘤标记和预后指标。