凋亡抑制因子Livin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的：研究凋亡抑制蛋白家族(IAP家族)新的凋亡抑制因子Livin在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其与肿瘤分级、分期、复发之间的关系。方法：采用免疫组织化学SP法,对54例BTCC和8例正常膀胱组织中Livin的表达情况进行检测,分析其在膀胱癌组织和非膀胱癌组织中的表达及其与肿瘤病理学分级、临床分期和患者复发情况的关系。结果：Livin在8例正常膀胱组织中均不表达,而在54例膀胱移行细胞癌组织中表达率为85．2%(P＜0．01)。Livin的表达和膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期、是否复发无明显相关(P＞0．05)。结论：细胞凋亡抑制因子Livin在BTCC组织中表达上调,提示Livin可能通过抑制细胞凋亡,对BTCC的发生发展起重要作用;Livin在膀胱癌中的高表达有望成为一种有效、敏感的瘤标,并为BTCC的基因治疗提供新的靶点。     

Hvin和Ki-67蛋白在胆管癌组织中表达的意义

目的 探讨Livin和Ki-67蛋白在胆管癌组织中的表达及两者之间的关系和临床意义.方法 采用SP法检测2002年1月至2003年12月中国医科大学附属盛京医院手术切除的55例胆管癌组织和12例慢性胆管炎组织中Livin和Ki-67蛋白的表达,并分析这两种蛋白与胆管癌临床病理特征的关系.应用Spearman等级相关分析、χ2检验和t检验对结果进行分析.结果 Livin蛋白在胆管癌标本中的阳性表达率为71%(39/55),明显高于慢性胆管炎标本的0(0/12)(χ2=20.361,P<0.01);Livin蛋白的表达受胆管癌患者的分化程度和淋巴结转移影响(χ2=4.193,4.245,P<0.05).Ki-67蛋白在胆管癌标本中的阳性表达率为96%(53/55).临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者Ki-67标记指数分别为22%±16%、33%±12%、43%±15%、49%±10%,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ期比较差异有统计学意义(t=2.307,2.871,3.957,P<0.05);有无局部淋巴结转移的患者Ki-67标记指数分别为43%±13%、34%±16%,两者比较差异有统计学意义(t=2.334,P<0.05).胆管癌组织中Livin蛋白的表达与Ki-67标记指数呈正相关(r=0.502,P<0.01).结论 Livin蛋白在胆管癌的发生、发展中起重要作用,并且与胆管癌增殖活性相关,两者结合可作为胆管癌恶性程度和判断预后的标准.     

星形细胞瘤中Livin的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨一种新的凋亡抑止蛋白Livin在人脑星形细胞瘤中的表达及其对瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用免疫组织化学和原位细胞凋亡检测法检测人脑胶质瘤细胞中Livin、PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,结合胶质瘤病理分级分析其相关关系。结果随着人脑胶质瘤WH0病理分级的增高,Livin、PCNA的表达强度明显升高（P〈0.05）,细胞凋亡率也明显升高（P〈0.05）,其中高度恶性组（WHO分级Ⅲ、Ⅳ级）均显著高于低度恶性组（WHO分级I、Ⅱ级）（P〈0.05）;随着Livin表达强度的增高,PCNA表达强度及细胞凋亡率均增高,但PCNA的表达比细胞的凋亡有更明显的增高趋势。结论人脑星形细胞瘤中Livin、PCNA的表达强度和细胞凋亡率异常升高;星形细胞瘤的发生和演变可能与Livin、PCNA及细胞凋亡的综合作用密切相关。     

Ｌｉｖｉｎ特异性ｓｉＲＮＡ表达载体在胃癌细胞中的稳定表达

目的:构建以Livin基因为靶基因的siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo/Livin,获得稳定沉默Livin基因的胃癌细胞SGC-7901/siRNA-Livin.方法:化学合成siRNA,Livin寡核苷酸,将其分别克隆进载体pGPU6/GFP/Neo,进行核酸序列测定.脂质体法转染SGC-7901细胞,半定量RT-PCR和Western blot检测Livin基因在SGC-7901细胞中的沉默效率,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆.结果:酶切分析显示,所有质粒均为阳性重组载体,核酸测序表明合成的序列准确插入pGPU6/GFP/Neo载体,G418筛选基因转染SGC-7901细胞后形成稳定克隆.其中pGPU6/GFP/Neo/Livin-4转染后Livin mRNA沉默效率大于70%.结论:成功获得Livin特异性siRNA表达载体,SGC-7901细胞Livin基因的表达受到抑制,转染胃癌细胞后获得SGC-7901/siRNA-Livin细胞克隆.     

凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的 分析Livin基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况,并探究其在喉鳞状细胞癌发生、发展及预后中的作用及机制,为喉鳞癌的临床诊断、治疗以及病情预测提供可参考依据.方法 选取2013年3月至2016年10月南充市中心医院耳鼻咽喉头颈外科经手术切除的34例喉鳞癌组织、19例癌旁组织和15例正常喉黏膜组织,分别应用SP免疫组化法检查Livin的表达情况,并结合患者的病理结果和随访资料,探究Livin表达与各临床特点以及预后的关系.结果 Livin在喉鳞癌组织中的高表达率为70.59%,在癌旁组织中的高表达率15.79%,在正常喉黏膜组织中无Livin高表达,差异有统计学意义(P<0.05);在喉鳞癌中,Livin高低表达与临床分期、淋巴结是否转移、病理分级以及病程差异有统计学意义(P<0.05),但与患者年龄、性别、肿瘤病灶大小和临床分型差异无统计学意义(P>0.05);经Cox 回归性分析发现,Livin阳性表达、病程长、淋巴结转移、病理分级和癌症晚期是影响喉鳞癌患者生存率的独立危险因素.结论 Livin基因的阳性表达在喉鳞癌的发生、发展及预后中发挥着重要作用,可将其作为判断喉鳞癌病情进展及预后的主要指标之一.     

凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体的构建及表达

目的:构建凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livin。方法:设计合成扩增Livinα和Livinβ基因全长cDNA序列的特异性PCR引物,以食管鳞状细胞癌EC9706细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,将获得的cDNA序列克隆入T载体,再用BglⅡ和EcoRⅠ双酶切,亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP,将重组质粒用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,G418筛选得到稳定表达的细胞克隆,Western-blot检测转染细胞Livinα和Livinβ蛋白的表达情况。结果:构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,测序分析证实插入序列正确;转染的NIH3T3细胞,可稳定表达Livinα或Livinβ蛋白。结论:成功构建Livinα和Livinβ真核表达载体。     

凋亡抑制蛋白Livin shRNA真核表达载体的构建

目的设计构建Livin的shRNA真核表达载体，并转染宫颈癌HeLa细胞，进一步研究该表达载体对目的基因Livin的沉默效果，为宫颈癌基因治疗探索新方法。方法以Livin为靶基因，以Pgenesil-1质粒为载体，构建重组体，根据Livin基因cDNA序列，设计shRNA寡核苷酸序列，退火后克隆到空载体Pgenesil-1中，转化DH5α菌株，提取质粒，进行酶切鉴定和测序分析。将构建好的真核表达载体转染宫颈癌HeLa细胞。结果经酶切鉴定出的重组体测序结果与目的序列相同，重组载体构建成功，并被成功转入宫颈癌HeLa细胞，可见绿色荧光蛋白表达，48 h转染效率最高。结论利用RNA干扰技术可成功构建小干扰RNA重组体，为进一步研究宫颈癌基因治疗奠定基础。     

FAF1、Livin蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌患者胃癌组织中FAF1、Livin蛋白的表达变化及其临床意义.方法 用免疫组化染色SP法检测53例胃癌患者病变组织及50例浅表性胃炎患者正常胃黏膜组织中FAF1、Livin蛋白的表达水平,并进行相关性分析.结果 胃癌组织中FAF1蛋白表达率（28.30％,15/53）明显低于正常胃黏膜组织（84.00％,42/50） （P ＜0.05）;Livin蛋白表达率（73.58％,39/53）明显高于正常胃黏膜组织14.00％ （7/50） （P ＜0.05）;在胃癌组织中FAF1蛋白表达与胃癌组织学分化程度有关（P＜0.05）;Livin蛋白表达与胃癌肿瘤大小、浸润深度、分化程度、癌细胞转移及TNM分期有关（P＜0.05）;FAF1、Livin蛋白在胃癌组织中的表达水平无相关性（r,=0.307,P＞0.05）.结论 FAF1蛋白的表达缺失可能参与胃癌的形成并抑制组织细胞的分化.胃癌的发生、发展、浸润、转移可能与Livin蛋白异常高表达有关.联合检测FAF1、Livin蛋白为胃癌的早期诊断及推断演进方向提供重要依据.     

宫颈癌中Livin和PTEN蛋白表达与预后的相关性研究

目的：探讨宫颈癌组织中Livin和PTEN蛋白表达及其与临床病理因素以及预后的关系。方法：应用免疫组化Envision法检测65例宫颈浸润性鳞状细胞癌组织中Livin和PTEN蛋白表达,分析其表达与临床病理因素以及预后的关系。结果：宫颈癌组织中Livin的表达与肿瘤的临床分期、病理学分级和淋巴结转移情况显著相关（P＆lt;0.05）,和患者的年龄无关。 PTEN在宫颈癌和正常组织中的阳性表达率比较差异有统计学意义,与临床分期和淋巴结转移相关（P＆lt;0.05）,而与患者的年龄和宫颈癌病理学分级无相关性。Livin蛋白与PTEN蛋白两者表达呈负相关（P＆lt;0.05）。在死亡组中,Livin表达明显高于生存组（P＆lt;0.05）,而PTEN表达明显低于生存组（P＆lt;0.05）。结论：宫颈癌中Livin表达上调和PTEN蛋白表达缺失,与宫颈癌的发生、发展及转移、浸润密切相关;联合检测Livin和PTEN,有助于筛选出具有高复发及转移危险的宫颈癌患者,从而指导临床治疗。     

Livin与Caspase-9在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测Livin和Caspase-9蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的表达,并探讨其临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测56例SCC组织、20例正常皮肤组织中Livin和Caspase-9蛋白的表达.结果 SCC组织中Livin蛋白的阳性表达率(73.2％)高于正常皮肤组织(0.0％),差异有统计学意义(p＜0.05);Livin蛋白的表达与肿瘤的分化程度显著相关,其阳性率随SCC病理分级的降低而升高,差异有统计学意义(P＜0.05);在有淋巴结转移的SCC组织中的阳性率(93.3％)明显高于无淋巴结转移者(65.9％),差异有统计学意义(P＜0.05).SCC组织中Caspase-9蛋白的阳性表达率(30.4％)低于正常皮肤组织(90.0％),差异有统计学意义(P＜0.05);在SCC中Caspase-9蛋白的表达与肿瘤的分化程度显著相关(P＜0.05),即随SCC病理分级的增高而升高;有淋巴结转移的SCC组织中Caspase-9蛋白的阳性表达率(6.7％)低于无淋巴结转移者(39.0％),差异有统计学意义(P＜0.05).两种蛋白在SCC组织中的表达呈负相关(rs=-0.612,P ＜0.05).结论 Livin在SCC组织中高表达,Caspase-9在SCC组织中低表达,且与Livin的表达呈负相关,提示两者可能共同参与SCC发病过程.