ALPPS治疗巨大原发性肝癌患者近远期疗效研究

目的 探讨联合肝脏分隔和门静脉结扎的二步肝切除术(ALPPS)治疗巨大原发性肝癌(PLC)患者的近远期疗效.方法 2016年1月～2018年2月我院诊治的98例巨大PLC患者,其中20例接受ALPPS治疗(A组),38例在经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗后手术切除肿瘤(B组),和40例接受直接手术切除肿瘤(C组).术...     

喜树碱多相脂质体对肿瘤细胞动力学及分子药理学研究

喜树碱多相脂质体对肝癌细胞具有抑制增殖的效应,明显损伤S期细胞,对于G_0期细胞亦有轻度损伤,G_2期细胞进入M期也受到一定抑制。10mg/kg静注后肝癌组织中cAMP水平明显增加,而肝癌组织中DNA和蛋白质含量显著下降,cAMP与cGMP比值大幅度提高。喜树碱多相脂质体对肝癌细胞DNA合成的最高抑制率为73.7%,后作用约4小时,对癌细胞RNA合成的抑制率达82.9%。     

腹腔镜肝切除术治疗原发性肝癌患者应用氢吗啡酮联合纳布啡静脉自控镇痛控制疼痛作用研究

目的 探讨腹腔镜肝切除术(LH)治疗原发性肝癌(PLC)患者应用氢吗啡酮联合纳布啡静脉自控镇痛(PCIA)控制疼痛的效果。方法 2018年1月～2021年1月我院收治的PLC患者104例,随机分为对照组52例和观察组52例,两组患者均接受LH手术,在对照组,给予舒芬太尼联合纳布啡用于术后PCIA,而在观察组给予氢吗啡酮联合纳布啡用于术后PICA。采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评价术后疼痛程度,使用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群CD3⁺细胞、CD4⁺细胞、CD8⁺细胞和NK细胞百分比。结果 在术后24 h,观察组静态VAS和动态VAS分别为(2.5±0.8)分和(3.7±1.2)分,显著低于对照组【分别为(4.3±1.2)分和(5.8±1.7),P<0.05】,在术后72 h,静态VAS和动态VAS分别为(1.1±0.4)分和(3.2±0.9)分,显著低于对照组【分别为(2.6±0.7)分和(5.1±1.3),P<0.05】;术后,两组肝功能指标变化无显著性差异(P>0.05);在术后7 d,观察组外周血...     

MRI与4DCT联合指导勾画原发性肝癌患者放疗靶区初步研究

目的 探讨磁共振成像(MRI)与四维计算机断层扫描(4DCT)图像联合用于原发性肝癌(PLC)患者首次放疗靶区勾画的价值。方法 2019年5月～2021年5月我院收治的56例PLC患者,在放射治疗前,分别行MRI和4DCT检查,将获得的图像上传至工作站,在自动配准结束后以Reg Reveal和Reg Refine行配准和图像质量评估,锁定局部感兴趣区。比较配准前后4DCT不同时相图像中的肿瘤靶区体积、大体内靶区体积,观察T2加权像(MR-T2)图像与4DCT图像配准精度。结果 在4DCT配准后,CT₀₀、CT₁₀、CT₂₀、CT₃₀、CT₄₀、CT₅₀、CT₆₀、CT₇₀、CT₈₀和CT₉₀肿瘤靶区体积分别为(389.8±52.5)cm³、(393.4±59.7)cm³、(390.7±50.3)cm³、(...     

灵芝多糖对HepG2细胞诱导的肝癌小鼠肠道菌群及其菌群代谢功能的调节作用

目的 研究灵芝多糖对HepG2细胞诱导的肝癌小鼠肠道菌群及其菌群代谢功能的调节作用.方法 采用HepG2细胞构建肝癌小鼠模型,将21只造模成功的肝癌小鼠随机分为模型组、灵芝多糖(GLP)和益生菌处理组,每组7只,另选择正常小鼠7只作为对照组,给予药物处理组动物GLP或益生菌灌胃,另两组采用生理盐水灌胃,连续干预2 w....     

p21基因对肝癌细胞的生物学影响

目的探讨逆转录病毒介导的p21基因对肝癌Hep3B细胞的杀伤作用。方法通过脂质体将有p21基因的逆转录病毒载体MMLV-p21转染肝癌Hep3B细胞系,并用G418筛选。试验分为转p21基因的Hep3B-P21组及相同遗传背景及培养过程的两对照组肝癌Hep3B系细胞组、转Hep3B-MMLV组3组。采用RT-PCR检测实验组p21基因的表达;应用流式细胞计数分别分析3组细胞周期;MTT法检测细胞增殖并比较细胞抑制率。结果野生p21基因阻止Hep3B系细胞进入S期,停滞在G1期,Hep3B-P21组细胞增殖比两对照组明显受到抑制（P〈0.05）。结论逆转录病毒介导p21基因可有效抑制肝癌Hep3B系细胞的增殖并诱导肝癌细胞的凋亡。     

抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化(P>0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。     

The adjuvant effects of Antrodia Camphorata extracts combined with anti-tumor agents on multidrug resistant human hepatoma cells

AIM OF THE STUDY: The objectives of this study were to investigate the adjuvant anti-tumor effects of Antrodia camphorate in human hepatoma cells (C3A and PLC/PRF/5) which are resistance to most anti-tumor agents, elucidate the possible regulation pathways, and measure the tumor growth and survival rate in xenograft-nude mice after combined with anti-tumor agents. MATERIALS AND METHODS: The AC extracts were measured by using a phenol/sulfuric acid method as previously described. The in vitro cell proliferation assay of ACs and anti-tumor agents was tested on C3A and PLC/PRF/5 cell lines. The percentage of human hepatoma cells undergoing apoptosis and distributing in different phases of cell cycle were determined by Flow cytometric analysis. Western blot analysis for MDR-1 and apoptosis- related proteins. The measurements of tumor growth and survival analysis of hepatoma implanted nude mice treated with Antrodia camphorata extracts and anti-tumor agents alone or in combinations. RESULTS: We have found that Antrodia camphorata extracts, when combined with anti-tumor agents, showed adjuvant antiproliferative effects on hepatoma cells (in vitro) and on xenografted cells in tumor-implanted nude mice (in vivo), which then extended their median survival days. Furthermore, solid-state extracts of Antrodia camphorata (AC-SS) showed its adjuvant effects through the inhibition of MDR gene expressions and the pathway of COX-2- dependent inhibition of p-AKT, which ultimately resulted in the induction of apoptosis in hepatoma cells. CONCLUSIONS: In this study, we have found that Antrodia camphorata extract, when combined with anti-tumor agents, showed adjuvant antiproliferative effects on hepatoma cells (in vitro) and on xenografted cells in tumor-implanted nude mice (in vivo).     

SOX4基因抑制肝癌细胞增殖与侵袭能力

【摘要】目的 探讨小干扰RNA技术（siRNA）沉默SOX4基因对肝癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 构建siRNA转染人肝癌细胞株SMMC 7721,按转染质粒区别分为siRNA SOX4组、siRNA NC组,并设立空白对照组。实时荧光定量聚合酶联反应（RT PCR）检测各组细胞SOX4 mRNA,蛋白印迹法（WB）测定SOX4蛋白水平,噻唑蓝法（MTT）测定转染不同时间肝癌细胞增殖能力,流式细胞术测定肝癌细胞凋亡率,Transwell小室实验测定肝癌细胞侵袭能力。结果 转染后siRNA SOX4组SOX4 mRNA相对表达量低于空白对照组和siRNA NC组（P＜005）;转染后siRNA SOX4组SOX4蛋白表达量为低于空白对照组和siRNA NC组（P＜005）;转染不同时间siRNASOX4组细胞增殖活性均低于空白对照组和siRNA NC组（P＜005）;转染后siRNA SOX4组细胞凋亡率高于空白对照组和siRNA NC组（P＜005）;转染后siRNASOX4组穿膜细胞比例低于空白对照组和siRNA NC组（P＜005）。结论 siRNA技术沉默SOX4基因可降低肝癌细胞增殖及侵袭能力,促进癌细胞凋亡。     

TWEAK蛋白对肝癌细胞增殖的影响

目的 观察TWEAK蛋白对肝癌细胞系增殖的影响,探讨TWEAK对肝癌细胞增殖的作用.方法构建PAVU6-TWEAK siRNA干涉质粒,转染HepG2和QGY7703肝癌细胞株,MTT法检测抑制TWEAK蛋白表达对肝癌细胞增殖的影响,并于培养体系中加入TWEAK蛋白,检测肝癌细胞增殖活性.结果成功构建PAVU6-TWEAK siRNA干涉质粒,转化肝癌细胞后肝癌细胞增殖受抑.肝癌培养体系中加入TWEAK蛋白后,肝癌细胞增殖活性有所增强.结论 TWEAK蛋白可促进肝癌细胞的增殖活性,抑制TWEAK表达,一定程度上可抑制肝癌细胞增殖.