喉鳞癌组织中p53蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨p5 3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化技术检测p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁非典型增生组织及正常组织中的表达。结果　p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁和正常组织中阳性表达率分别为 5 3 .7%、3 8.1%和0 ,三者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;重度非典型增生组织与中、轻度增生、癌旁单纯增生和癌旁正常黏膜 p5 3阳性表达分别有显著性差异 ,表达率分别为 68.8%、2 1.4%、16.7%、8.3 %和 0 ;在肿瘤浸润的前沿部 p5 3阳性表达显著强于浅表部 (P <0 .0 5 ) ;且癌巢边缘 p5 3表达显著强于中央部 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达与喉鳞癌的分化、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3的过度表达可能为喉鳞癌的早期发生事件 ,癌旁组织中已发生p5 3基因突变的细胞可能是肿瘤复发的根源 ;p5 3表达与喉鳞癌的浸润生长、分化及转移有关 ,为判断预后的 1个有意义指标。     

白藜芦醇通过Fas依赖途径诱导K562细胞凋亡

目的探讨白藜芦醇对K562细胞的凋亡诱导效应和可能的作用机制。方法应用噻唑蓝(MTT)比色法、WrightGiemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和细胞周期分析法检测K562细胞凋亡；采用流式细胞术(FCM)测定细胞Fas蛋白表达水平；采用RT-PCR法检测Caspase-3 mRNA表达水平，采用比色法检测Caspase-3活性。结果白藜芦醇可抑制K562细胞增殖，并呈现典型的凋亡形态改变；DNA电泳可见明显的梯状条带；细胞周期分析显示S期细胞数明显增多，出现S／G2期阻滞。40μmol／L白藜芦醇作用48h到72h后，Fas阳性率由4．1％上升到45．6％；Caspase-3 mRNA表达水平明显升高，活性明显增强。结论白藜芦醇通过Fas依赖性Caspase-3激活途径诱导K562细胞凋亡。     

反义LRP寡核苷酸对卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂耐药性的影响

目的:探讨针对肺耐药基因(LRP gene)设计的反义寡核苷酸(AsODN)对人卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂(DDP)耐药性的逆转作用.方法:采用罗丹明B(SRB)显色法检测LRP AsODN和DDP细胞毒性作用;采用脂质体(1iplfectamine 2000)介导LRP AsODN转染人卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3;采用逆转录酶链式反应(RT-PCR)和Westem blot法检测LRP AsODN转染前后OVCAR-3细胞中LRP的表达:采用流式细胞仪测定OVCAR-3细胞在顺铂作用后的凋亡率.结果:LRP AsODN浓度低于800nmol/L时,对OVCAR-3细胞无明显细胞毒作用;LRP AsODN能明显减少OVCAR-3细胞中LRP mRNA和蛋白的表达,增加其顺铂敏感性,且与剂量呈正相关;转染LRP AsODN前后的OVCAR-3细胞在DDP作用后,凋亡率分别为(15.43±1.14)%和(27.43±2.05)%,两者间差异有显著性意义(p=0.001).结论:LRP AsODN能有效阻断OVCAR-3细胞内LRP的表达,恢复细胞对DDP的敏感性.     

结直肠癌血清P53抗体和组织P53蛋白的临床意义

目的 :检测结直肠癌患者血清p5 3抗体 (p5 3Ab)的敏感性和特异性 ,并了解其与肿瘤组织p5 3的相关性和临床意义。方法 :检测 2 0 0 2年 7月至 2 0 0 3年 12月的结直肠癌病例 178例。对照组为 4 0例正常健康志愿者。血清p5 3Ab检验采用酶联免疫法 :肿瘤组织p5 3蛋白表达测定应用免疫组化SP染色法。结果 :178例结直肠癌中33例血清p5 3Ab阳性 ,阳性率 18.5 4 % ;4 0例对照组检测阴性 ,特异性 10 0 %。血清p5 3Ab与患者的年龄、性别和肿瘤发生的部位无关 (P >0 .0 5 ) ;血清p5 3Ab阳性为Dukes’分期B期 (16 / 71,2 2 .5 4 % )、C期 (12 / 5 5 ,2 1.82 % )和D期(5 / 30 ,16 .6 2 % )。 10 3例肿瘤组织p5 3蛋白阳性 (5 7.87% ) ,75例阴性 (4 2 .13% ) ;血清p5 3Ab阳性者 6 9.7%组织表达阳性 ,30 .3%组织表达阴性 (P <0 .0 5 )。随访 6～ 2 4个月 ,肿瘤复发率在血清p5 3Ab阳性和阴性患者间无显著性差异 ;平均存活时间亦无统计学意义。结论 :研究表明血清p5 3Ab的产生伴有肿瘤组织p5 3蛋白的积聚 ;因为抗体检测的低敏感性 ,血清p5 3Ab不能作为术前的肿瘤指标 ;但由于它的高特异性 ,对今后的随访可能具有一定临床意义     

多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对恶性肿瘤的临床应用价值

 目的　研究多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对恶性肿瘤诊断的临床意义。方法　用该检测系统测定分析 4 6 9例恶性肿瘤患者 ,130例良性疾病患者和 14 4 8例健康查体者血清中 12种常见肿瘤标志物 (CA199,NSE ,CEA ,CA2 4 2 ,CA12 5 ,CA15 3,AFP ,Ferrtin ,free PSA ,PSA ,β HCG及HGH)的水平。结果　恶性肿瘤组的阳性率为 81.4 5 % ,显著高于良性疾病组 (5 0 .0 0 % )和健康查体组 (2 9.77% ) (P <0 .0 5 )。除胰腺癌之外 ,联合检测对其余 14种恶性肿瘤的敏感性均显著高于单一标志物检测 (P <0 .0 5 )。结论　运用蛋白芯片技术联合检测多种肿瘤标志物可以明显提高恶性肿瘤诊断的敏感性 ,同时也可以作为无症状人群的早期肿瘤普查手段之一 ,尤其对肿瘤高危人群的防癌普查具有一定意义。     

p53、bcl-2蛋白和p-gp在鼻咽鳞癌中表达的研究

 目的　研究 p5 3、bcl 2蛋白和 p gp在鼻咽鳞癌组织中的表达及其临床病理特征的关系 ,探讨其在预后评估中的意义。方法　采用免疫组化SP法检测 6 4例鼻咽鳞癌组织中p5 3、bcl 2和 p gp的表达。结果　鼻咽鳞癌组织中 p5 3、bcl 2和p gp阳性率分别为76 .5 6 % (4 9/ 6 4 )、89.0 6 % (5 7/ 6 4 )、17.19% (11/6 4 )。p5 3、bcl 2蛋白过表达均与颈部淋巴结转移、组织分化程度有关 (P <0 .0 1)。p gp过表达与bcl 2蛋白过表达呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,p5 3蛋白过表达与bcl 2蛋白过表达呈正相关 (P <0 .0 0 1)。结论　p5 3和bcl 2蛋白均参与鼻咽鳞癌的发生与分化 ,其表达水平的不同有助于预后判断 ;未经治疗的鼻咽鳞癌存在原发性耐药     

p53和p16蛋白在星形细胞瘤中的表达及其意义

 目的　研究 p5 3、p16蛋白在星形细胞瘤中的表达及其意义。 方法　应用S P法检测 5 6例星形细胞瘤 p5 3及 p16蛋白 ,并同时行组间对照。 结果　p5 3蛋白随肿瘤级别增高表达明显增加 ,各级别间差异性显著 (P <0 .0 5 )。而p16蛋白则随级别增高其缺失率增加 ,各级别间差异性显著 (P <0 .0 5 )。结论　p5 3蛋白高表达和p16蛋白的缺失是星形细胞瘤发生和恶变的重要原因之一。p5 3表达增高可能是星形细胞瘤恶变的信号 ,但 p16在星形细胞瘤的发生和恶性化的过程中可能起更重要的作用     

nm23-H1基因对人肺癌细胞中细胞外信号调节激酶活性的影响

目的探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响.方法应用特异性识别总ERK1/2(p44/42 MAP kinase)和双磷酸化ERK1/2(phospho-p44/42 MAP kinase)的抗体及蛋白印迹法(Western blot),检测L9981(缺失nm23-H1基因的原代肺癌细胞株)、L9981-nm23-H1(转染了nm23-H1基因的L9981细胞株)、L9981-PLXSN(转染了空载体的L9981细胞株)中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2的水平.磷酸化ERK1/2活性应用非放射性免疫沉淀和Western blot法以及p44/42 MAP kinase分析试剂盒予以检测.结果 L9981-nm23-H1细胞株中磷酸化ERK1/2的水平,以及ERK1/2活性均显著低于L9981细胞株和L9981-PLXSN细胞株(P<0.01),L9981和L9981-PLXSN细胞株间磷酸化ERK1/2水平和ERK1/2活性比较均无显著性差异(P＞0.05).三个细胞株间总ERK1/2水平比较均无显著性差异(P>0.05).结论 nm23-H1基因可明显靶向地抑制人高转移肺癌细胞株L9981中ERK1/2的转录表达和ERK1/2的活性.推测nm23-H1基因的作用机制可能与其抑制了MAPK/ERK信号传导通路有关.     

多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的诊断价值

目的　研究多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的诊断价值。方法　用该检测系统测定10 8例肺癌患者、48例肺良性病变患者和 14 5例正常人血清中 12种肿瘤标志物 (CA199,NSE ,CEA ,CA2 42 ,CA12 5 ,CA15 3 ,AFP ,ferritin ,free PSA ,PSA ,β HCG及HGH)的水平。 结果　肺癌组的芯片阳性率为 83 .3 3 %( 90 / 10 8) ,显著高于肺良性病变组 ( 5 2 .0 8% ,2 5 / 48)和健康组 ( 2 8.97% ,42 / 14 5 ) (P <0 .0 0 1) ;肺癌不同分期组间阳性率存在显著性差异 ,以Ⅳ期肺癌组阳性率最高 (P =0 .0 48) ,但不同病理类型肺癌组间无显著性差异(P =0 .5 19) ;不同分期之间CA199、CEA以及CA2 42血清水平存在显著性差异 (P =0 .0 41,P =0 .0 18和P =0 .0 0 2 ) ;CEA阳性率以腺癌组最高 ,与其它组织学类型肺癌比较无显著性差异 (P =0 .0 7) ;NSE阳性率以小细胞肺癌组最高 (P <0 .0 0 1) ;联合检测在提高诊断敏感性的同时 (P <0 .0 0 1) ,特异性有所下降 (P <0 .0 0 1)。结论　运用蛋白芯片联合检测多种血清肿瘤标志物可明显提高肺癌诊断的敏感性 ,同时对于确定其临床分期 ,鉴别病理类型以及监测疗效均有一定的意义。由于该法特异性及阳性预测值偏低 ,更适合于无明显症状的门诊患者和肺癌高危人群的筛查。     

高表达P73基因抑制肺腺癌细胞VEGF、bFGF mRNA表达

目的　观察高表达的p73基因对肺腺癌细胞生长曲线以及血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA表达水平的影响 ,探讨高表达 p73基因在肺腺癌血管生成中的作用。 方法　将 p73α、p73 β以脂质体法转染A5 49细胞、H12 99细胞 ,采用细胞计数法绘制转染前后两种细胞生长曲线 ,RT PCR法半定量分析转染前后两种细胞中VEGF、bFGFmRNA的表达水平的变化。结果　转染p73基因后 ,A5 49细胞、H12 99细胞生长受到抑制 ,VEGF、bFGFmRNA表达水平下降 ,较未转染 p73基因的细胞有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其中 p73 β对VEGFmRNA表达的抑制作用更为显著 (P <0 .0 1)。 结论　高表达的 p73基因能够抑制肺腺癌细胞生长 ,降低肺腺癌细胞中VEGF、bFGFmRNA表达水平 ,提示高表达的 p73基因可能参与调控人肺腺癌VEGF和bFGF基因表达 ,从而起到一个抑癌基因的作用