丙氨酰-谷氨酰胺治疗烧伤后抗生素相关性腹泻的疗效分析

目的探讨丙氨酰-谷氨酰胺治疗烧伤后抗生素相关性腹泻的临床疗效。方法将2007-05～2012-05在我科住院期间出现腹泻的62例大面积烧伤病人随机分成两组,即治疗组与对照组。治疗组给予丙氨酰-谷氨酰胺结合双歧三联活菌片与蒙脱石散,对照组给予口服双歧三联活菌片和蒙脱石散。72 h后进行疗效观察。结果治疗组显效率65.6%,总有效率为96.7%,对照组显效率46.7%,总有效率76.7%。丙氨酰-谷氨酰胺治疗效果明显优于对照组(P<0.05)。结论治疗组在大便性状、次数以及全身症状改善等方面,均优于对照组;且不良反应少,故丙氨酰-谷氨酰胺治疗烧伤后抗生素相关性腹泻在临床上值得应用推广。     

脂肪细胞谷氨酰胺合成酶抑制结肠癌细胞的肝、肺转移

目的 探讨脂肪细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)对结肠癌细胞迁移及转移的调控作用.方法 分别用野生型(WT)小鼠和脂肪细胞GS转基因(TgGS)小鼠的脂肪细胞条件培养基处理结肠癌MC38及CT26细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;通过尾静脉注射结肠癌MC38细胞建立肿瘤血行转移小鼠模型,病理切片观察肝、肺组织的转移情况.结果 CCK-8检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的增殖无明显影响(P＞0.05);流式细胞仪检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);划痕实验和Transwell实验结果显示TgGS小鼠脂肪细胞条件培养基可以抑制结肠癌MC38及CT26细胞的迁移能力(P＜0.05);尾静脉注射结肠癌MC38细胞后,与WT小鼠比较,TgGS小鼠肺转移瘤的大小及数量明显减少(P＜0.01),且TgGS小鼠较WT小鼠更不易发生肝转移(P＜0.0l).结论 脂肪细胞GS可以抑制结肠癌细胞的迁移及转移.     

Protective effect of glutamine-enriched early enteral nutrition on intestinal mucosal barrier injury after liver transplantation in rats

Background

The effect of glutamine-enriched early enteral nutrition (Gln-EEN) on intestinal mucosal barrier injury after liver transplantation (LT) remains uncertain.

Methods

The Wistar-to-Wistar rat LT model was used to explore the protective effect of Gln-EEN. Morphologic changes of intestinal mucosa, levels of intestinal malondialdehyde and secretory immunoglobulin (sIgA), plasma endotoxin, D-lactic acid, serum tumor necrosis factor-α (TNF-α), rates of bacterial translocation, and expression of intestinal nuclear factor-κB, TNF-α, and intercellular adhesion molecule-1 were determined.

Results

After LT, intestinal mucosa was damaged seriously. At 12, 24, and 48 hours posttransplantation, levels of intestinal sIgA were decreased; levels of malondialdehyde, endotoxin, D-lactic acid, and TNF-α, the ratio of bacterial translocation, and the expression of intestinal nuclear factor-κB, TNF-α, and intercellular adhesion molecule-1 all were increased. However, changes in earlier-mentioned parameters in recipients treated with Gln-EEN were attenuated remarkably at 24 to 48 hours.

Conclusions

Our data show that Gln-EEN is a potent protectant against intestinal mucosal barrier injury after LT.     

酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的　构建S 腺苷甲硫氨酸合成酶基因工程菌 ,为酶促转化法生产S 腺苷甲硫氨酸奠定基础。方法　应用PCR技术从S 腺苷甲硫氨酸高产酿酒酵母染色体DNA中扩增得到S 腺苷甲硫氨酸合成酶基因sam2 ,将其克隆至表达载体pT7 7,转化大肠杆菌 ,1%琼脂糖电泳比较大小 ,筛选重组子。结果　SDS PAGE显示重组菌S 腺苷甲硫氨酸合成酶亚基分子量约为 4 2KDa ,平均表达量约占菌体总可溶性蛋白的 4 2 % ,酶活达到 14 .1U/g湿菌体 ,比宿主菌酶活提高 15 .7倍。结论　酿酒酵母SAM合成酶基因在大肠杆菌中高效表达 ,重组菌已具有初步的工业化应用价值     

含不同剂量谷氨酰胺肠内营养在老年危重患者营养支持中的应用

目的通过不同剂量谷氨酰胺肠内营养对老年危重患者的营养支持,观察老年危重患者营养状态、胃肠道功能改善情况。方法将90例老年危重患者完全随机化法分成3组：不含谷氨酰胺的营养支持对照组（A组）,低剂量谷氨酰胺[0．3g/（kg·d）]肠内营养组（B组）,高剂量谷氨酰胺[0．6g／（kg·d）]肠内营养组（C组）。于营养支持的第1、7、14天清晨采集空腹静脉血,测定血浆二胺氧化酶、谷氨酰胺,观察血清谷氨酰胺含量变化对肠黏膜屏障功能的影响,并测定血红蛋白、血清白蛋白、转铁蛋白、前白蛋白等营养指标及氮平衡情况,同时观察患者的腹胀、腹泻、胃潴留等胃肠道功能情况。结果营养支持后第7、14天B组和C组血浆谷氨酰胺水平分别为（1886．8±420．5）、（2228．6±440．2）g/L和（1889．6±436．1）、（2174．3±440．8）g/L,较A组（1612．0±493．5）和（1869．7±559．8）μg/L显著升高（P=0．027,P=0．008）;二胺氧化酶在B组和C组分别为（2310±1271）、（1602．5±1137．9）U／L和（2076．3±567）、（1586．3±530．9）U／L,较A组的（3250±923）和（2476±862）U／L显著降低（P=0．000,P=0．000）。营养支持后第7天转铁蛋白、前白蛋白明显改善（P=0．023,P=0．047）,第14天血红蛋白明显改善（P=0．003）。B、C组成功实施EN人数和达到EN目标人数分别是4和25例、3和27例,较A组12和13例多（P=0．008,P=0．000）,胃肠道的并发症发生率较A组少。结论含谷氨酰胺的肠内营养能早期改善危重患者的肠黏膜屏障功能和营养状态,减少胃肠功能并发症。通过肠道给予谷氨酰胺,有利于成功实施肠内营养,并实现全肠内营养。     

蛋白O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺改善感染性休克大鼠血管低反应性中的作用

目的 评价蛋白O位-N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)修饰在谷氨酰胺改善感染性休克大鼠血管低反应性中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只、2～3月龄,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、感染性休克组(C组)、谷氨酰胺组(G组)和四氧嘧啶组(A组).采用盲肠结扎穿孔法制备感染性休克模型.于造模前1hG组和A组经30 min静脉输注谷氨酰胺0.75 g/kg,A组同时腹腔注射四氧嘧啶90 mg/kg.于造模后6h、依次静脉注射去氧肾上腺素(PE) 0.5、1,0、2.0、2.5 μg/kg,每次间隔20 min,计算给药后MAP的增幅百分比.经心内穿刺采集血样,测定血清NO浓度.处死后取胸主动脉环行血管张力实验,计算离体血管环对PE反应的半数有效浓度(EC50)和最大效应(Emax);测定胸主动脉蛋白O-GlcNAc修饰和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平.结果 与S组比较,C组、G组和A组MAP增幅百分比、离体血管环对PE反应的Emax降低,离体血管环对PE反应的EC50、血清NO浓度、胸主动脉iNOS含量和蛋白O-GlcNAc修饰水平升高(P＜0.05);与C组比较,G组胸主动脉蛋 白O-GlcNAc修饰水平升高,离体血管环对PE反应的EC50降低,G组和A组MAP增幅百分比、离体血管环对PE反应的Emax升高,胸主动脉iNOS含量和血清NO浓度降低(P＜0.05);与G组比较,A组高体血管环对PE反应的EC50、血清NO浓度、胸主动脉iNOS含量升高,MAP增幅百分比、离体血管环对PE反应的Emax和蛋白O-GlcNAc修饰水平降低(P＜0.05).结论 谷氨酰胺通过提高蛋白O-GlcNAc修饰水平改善感染性休克大鼠血管低反应性.     

miR-578调控长链脂酰辅酶A合成酶4表达对胃癌细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨miR-578调控长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。方法 选取人胃癌细胞MKN-45、SNU-1、MKN-7、KTAO3、N87及人正常胃黏膜细胞GES-1为研究对象,将MKN-45细胞分为对照组、miR-578 NC组、miR-578 mimic组、miR-578 mimic+pc-ACSL4组,测定各组MKN-45细胞活力及凋亡、侵袭、迁移能力,测定细胞中miR-578、ACSL4、凋亡相关蛋白（Bax、Caspase-3、Bcl-2）、侵袭相关蛋白（MMP-9、MMP-2）的表达,验证miR-578与ACSL4的靶向关系。结果 miR-578在人胃癌细胞中低表达;与对照组相比,miR-578 mimic组MKN-45细胞活力、侵袭、迁移能力、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）,凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）;与miR-578 mimic组相比,miR-578 mimic+pc-ACSL4组MKN-45细胞活力、侵袭、迁移能力、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;荧光素酶实验结果显示,miR-578与ACSL4存在靶向调节关系。结论 miR-578可抑制人胃癌细胞MKN-45的增殖及迁移能力,可能是通过抑制ACSL4表达实现的。     

丙氨酰谷氨酰胺辅助治疗消化性溃疡出血的临床疗效分析

目的：观察全肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)添加丙氨酰谷氨酰胺治疗消化性溃疡所致上消化道出血的疗效。方法以2011年1月-2013年12月间入住该院的198例消化性溃疡出血患者为研究组,以2011年1月-2013年12月间入住该院的74例消化性溃疡出血患者为对照组,所有患者均于入院24 h内行急诊胃镜检查,明确诊断后两组均经常规治疗,根据病情给予禁食、补液、营养支持、抑酸、止血、保护胃粘膜等治疗。研究组给予丙氨酰谷氨酰胺(力太)20 g加入500 mL全肠外营养液中静脉输注Qd。对照组给予同样500 mL全肠外营养液但不加入力太。一周后复查胃镜,观察两组患者胃镜下的溃疡分期及再出血情况。结果272例消化性溃疡出血患者初次检查镜下溃疡均为活动期,其中研究组A1期182例(91.92%),A2期16例(8.08%);复查胃镜有142例(71.72%)患者进入愈合期,其中H期140例(70.70%),S期2例(1.01%),溃疡愈合率为71.72%。对照组初次检查镜下溃疡分期：A1期52例(70.27%),A2期22例(29.73%);复查胃镜有38例(51.35%)患者进入愈合期,其中H期26例(35.14%),S期12例(16.22%),溃疡愈合率为51.35%。两组愈合率比较差异有统计学意义。研究组一周内再出血18例(9.09%);对照组一周内再出血20例(27.03%);两组再出血率比较差异有统计学意义。结论对于消化性溃疡合并出血患者,常规治疗的同时加用含丙氨酰谷氨酰胺肠外营养可以促进溃疡愈合,降低再出血率。