Critical role of exosomes in sperm–egg fusion and virus-induced cell–cell fusion

In mammals, two integral membrane proteins, sperm IZUMO1 and egg CD9, regulate sperm–egg fusion, and their roles are critical, but yet unclear. Recent studies, however, indicate interesting connections between the sperm–egg fusion and virus-induced cell–cell fusion. First, CD9-containing exosome-like vesicles, which are released from wild-type eggs, can induce the fusion between sperm and CD9-deficient egg, even though CD9-deficient eggs are highly refractory to the fusion with sperm. This finding provides strong evidence for the involvement of CD9-containing, fusion-facilitating vesicles in the sperm–egg fusion. Secondly, there are similarities between the generation of retroviruses in the host cells and the formation of small cellular vesicles, termed exosomes, in mammalian cells. The exosomes are involved in intercellular communication through transfer of proteins and ribonucleic acids (RNAs) including mRNAs and microRNAs. These collective studies provide an insight into the molecular mechanism of membrane fusion events.     

Tumor-derived exosomes: Nanovesicles made by cancer cells to promote cancer metastasis

Nanomedicine usually refers to nanoparticles that deliver the functional drugs and siRNAs to treat cancer. Recent research has suggested that cancer cells can also make nanoparticles that also deliver functional molecules in promoting cancer metastasis, which is the leading cause of various cancer mortalities. This nanoparticle is called tumor-derived vesicles, or better-known as tumor-derived exosomes (TEXs). TEXs are nanoscale membrane vesicles (30–140 nm) that are released continuously by various types of cancer cells and contain tumor-derived functional biomolecules, including lipids, proteins, and genetic molecules. These endogenous TEXs can interact with host immune cells and epithelial cells locally and systemically. More importantly, they can reprogram the recipient cells in favor of promoting metastasis through facilitating tumor cell local invasion, intravasation, immune evasion, extravasation, and survival and growth in distant organs. Growing evidence suggests that TEXs play a key role in cancer metastasis. Here, we will review the most recent findings of how cancer cells harness TEXs to promote cancer metastasis through modulating vascular permeability, suppressing systemic immune surveillance, and creating metastatic niches. We will also summarize recent research in targeting TEXs to treat cancer metastasis.     

星形胶质细胞外泌体对缺氧缺血神经元的保护作用

目的 探索星形胶质细胞外泌体对缺氧缺血神经元的影响。方法 体外培养大鼠星形胶质细胞,通过差速离心法获取细胞上清液中的外泌体。采用透射电镜、Nanosight和Western blot鉴定外泌体;采用BCA法检测外泌体蛋白浓度。体外培养大鼠神经元,分为对照组、外泌体组、氧糖剥夺（OGD）组和OGD+外泌体组（n=3）。OGD组和OGD+外泌体组给予无糖培养基和缺氧处理;外泌体组和OGD+外泌体组分别给予终浓度为22 μg/mL的外泌体处理,对照组和OGD组给予等体积PBS处理。采用ELISA法检测神经元乳酸脱氢酶（LDH）水平;TUNEL法检测神经元凋亡指数。结果 外泌体鉴定结果显示差速离心法提取的外泌体符合外泌体特点;与对照组和外泌体组相比,OGD组LDH值和凋亡指数显著增加（P < 0.05）;与OGD组相比,OGD+外泌体组LDH值和凋亡指数均显著降低（P < 0.05）。结论 星形胶质细胞来源的外泌体对神经元缺氧缺血损伤有保护作用。     

外泌体在甲状腺癌诊治中的研究进展

甲状腺癌(Thyroid Carcinoma,TC)是世界上发病率增长最快的癌症之一,寻找新型高特异性、高灵敏度、无创的早期诊断和术后监测标记物成为当下研究热点。外泌体是细胞间信息物质交流的重要载体,由于其高稳定性、低细胞毒性、低免疫原性和高膜通透性等特征,使其具有成为无创、新型的疾病诊断和治疗手段的潜能。近年来,外泌体在甲状腺癌非侵入性疾病诊断、监测、给药、治疗和预后评估等领域取得了实质性突破。论文综述了TC来源的外泌体在肿瘤中发生和发展、诊断监测以及治疗中的应用前景。     

血浆外泌体微 RNA-126-5p在儿童注意缺陷多动障碍中的表达及临床意义

目的探究血浆外泌体微 RNA-126-5p(miR-126-5p)在儿童注意缺陷多动障碍( ADHD)中的表达及临床意义。方法选取 2021年 7月至 2022年 7月在江苏省人民医院确诊的 ADHD病儿 70例为 ADHD组,同时纳入同期江苏省人民医院健康体检的志愿者 70例为对照组,采用韦氏幼儿智力量表第 4版( WISC-Ⅳ)和家长评定行为量表( SNAP-Ⅳ)评估研究对象的临床症状,采用 miRNA测序绘制研究对象的差异 miRNA表达谱后寻找关键的 miRNA,并利用受试者操作特征曲线( ROC曲线)评价 miRNA诊断 ADHD的价值,分析 miRNA与临床症状的相关性,同时分析 miRNA的生物学功能。结果与对照组比较, ADHD病儿 WISC-Ⅳ的计算言语理解指数( VCI)［(76.99±6.93)分比( 95.30±5.94)分］、知觉推理指数( PRI)［( 75.38±4.49)分比( 94.69±6.33)分］、工作记忆指数(WMI)［(76.35±7.01)分比(94.11±5.87)分］、加工速度指数( PSI)［(81.36±6.90)分比( 89.49±6.20)分］以及总智商( FSIQ)［(79.18±9.30)分比( 90.19±5.22)分］的分值显著降低,而 SNAP-Ⅳ中注意缺陷和多动 /冲动评分明显增高。同时 miRNA测序筛选出 11个差异 miRNAs,其中 miR-126-5p在 ADHD病儿的血浆外泌体表达升高,并与病儿临床症状存在相关性,且 ROC曲线显示 miR-126-5p的 AUC为 0.817,灵敏度为 78.6%,特异度为 91.4%。此外 miR-126-5p主要涉及突触囊泡循环、轴突导向、炎症介质以及长时程增强等生物学功能有关。结论 ADHD病儿血浆外泌体 miR-126-5p升高,具有诊断 ADHD的临床应用价值,同时具有调控突触可塑性和炎症介质参与 ADHD的病理机制。     

胰岛保护和功能维护的研究进展

胰岛移植在糖尿病及其并发症的治疗中有很广阔的前景,但移植后功能不良、排斥反应和供体不足等是胰岛移植领域的瓶颈。优化胰腺保存方法对获取有效胰岛的数量及功能的维护有积极意义;在培养期间对胰岛进行抗排斥反应和抗凋亡处理,包括间充质干细胞（MSC）、MSC来源的外泌体、抗凋亡药物和基因修饰等可能成为临床胰岛移植胰岛保护与功能维护的重要方法;胰岛移植后抗立即经血液介导的炎症反应（IBMIR）药物的使用对于胰岛功能的保护也具有重要作用。本文围绕从胰岛制备到胰岛移植的全过程,探讨胰岛保护和功能维护相关策略,旨在为提升供体质量以弥补供体绝对数量的不足,提升胰岛移植效率提供参考。     

外泌体在肺移植排斥反应中的作用研究进展

肺移植术后排斥反应包括急性排斥反应(AR)和以慢性移植肺功能障碍(CLAD)为主要表现的慢性排斥反应,是影响同种异体移植物长期存活的主要因素。外泌体是真核生物细胞间通讯的一种细胞外纳米囊泡,可以携带复杂生物学信息,参与各种生理、病理过程,已成为排斥反应中的重要免疫介质,通过多种途径调控排斥反应的发生发展,在排斥反应的监测和治疗中亦发挥着关键作用。本文就肺移植术后排斥反应的类型、外泌体调控排斥反应的机制、外泌体作为生物标志物及其在排斥反应治疗中的应用做一综述,旨在为肺移植术后排斥反应的综合诊治提供新的方向。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

未成熟树突状细胞-胃癌细胞融合细胞来源的exosome诱导特异性抗肿瘤免疫

目的观察未成熟树突状细胞（DC）-胃癌细胞融合细胞来源的exosome诱导特异性抗肿瘤免疫的效果。方法以细胞培养技术将BALB／c小鼠未成熟Dc与人胃癌细胞SGC-7901融合,并提取融合细胞分泌的exosome作为瘤苗。将人胃癌细胞株接种于BALB／c小鼠以建立4组荷瘤小鼠模型,A、B、C组小鼠接种SGC-7901细胞。D蛆小鼠接种BGC．823细胞。各组2周后开始在腹腔接种相应瘤苗。A组瘤苗为对照用PBS;B组溜苗为BALB／c小鼠来源的未成熟Dc,c组及D组瘤苗为未成熟DC-SGC7901融合细胞来源的exosome。每组取6只小鼠收集脾细胞悬液,进行体外细胞毒实验。剩余每组6只小鼠留待观察生存期。结果A、B、C、D组小鼠脾细胞悬液的细胞毒性分别为（27．22±7．31）％、（58．28±7．80）％、（72．36±6．28）％、（43．15±5。60）％,4组小鼠的存活时间分别为（14．2±1．3）d、（29．2±1．8）d、（37．6±2．2）d、（22．1±2．6）d。方差分析提示组间差异有统计学意义（P〈0．05）;S-N-K检验提示各组之间的差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论未成熟DC-胃癌细胞融合细胞来源的exosome作为新型、高效肿瘤疫苗,可诱导抗胃癌细胞的特异性免疫反应。     

PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞来源的Exosome促进同源肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的Exosome对同源肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨PI3K/Akt和MAPK/ERK信号转导通路在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心的方法从胃癌MGC803细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的Exosome.应用透射电子显微镜观察Exosome的形态,MTT检测细胞活力,Weste...