致敏小鼠肺组织eotaxin和TNF-α的表达及药物的影响

目的：建立测定肺组织趋化因子eotaxin mRNA、α-肿瘤坏死因子(TNF—α)mRNA表达的方法，观察抗炎药物对其表达的影响。方法：采用半定量RT—PCR法测定肺组织eotaxin mRNA、TNF—αmRNA表达，并通过观察支气管肺灌洗液中白细胞总数和嗜酸性粒细胞的数目来验证eotaxin和TNF—αmRNA表达增多的功能。结果：致敏小鼠抗原攻击后肺组织eotaxin mRNA和TNF—αmRNA表达与正常小鼠比较明显增多，支气管肺灌洗液中白细胞总数和嗜酸性粒细胞数目相应增加。抗炎药地塞米松对eotaxin mRNA、TNF—αmRNA表达以及炎症细胞浸润均有明显抑制作用；受试的复方中药对eotaxin mRNA表达以及炎症细胞浸润有明显抑制作用，对TNF—α表达无明显影响。结论：肺组织eotaxin mRNA表达与嗜酸性粒细胞增多一致，表明半定量RT—PCR测定肺组织eo—taxin mRNA的方法可用于探索平喘药物的作用机制。     

烟曲霉提取物对人支气管上皮细胞嗜酸性粒细胞趋化因子浓度的影响

目的 探讨烟曲霉对呼吸道上皮细胞人嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）浓度变化的影响及其可能机制,为研究烟曲霉在变应性支气管肺曲霉病发病机制中的作用奠定基础.方法 分别应用不同浓度（0、8、16、20 mg/L）的烟曲霉提取物（AFE）作用体外培养人支气管上皮细胞（16HBE） 不同的时间（12、24、48、72 h）.应用ELISA法检测细胞上清液Eotaxin浓度.结果 正常未给予AFE刺激培养条件下的对照组细胞表达一定量Eotaxin,而给予不同浓度的AFE作用24 h后,细胞合成和分泌Eotaxin的量明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,并呈明显的时间依赖性.热处理的AFE仍然能刺激16HBE细胞分泌Eotaxin并呈时间依赖性.随着AFE浓度的升高在相同作用时间下AFE刺激16HBE细胞分泌Eotaxin 的浓度并未呈现上升趋势.结论 AFE并非依赖其蛋白酶活性促进呼吸道上皮细胞合成和分泌Eotaxin,一定浓度的AFE刺激16HBE 细胞分泌Eotaxin呈明显的时间依赖性.     

福莫特罗对过敏性哮喘大鼠嗜酸性粒细胞炎症的作用

目的：研究福莫特罗对过敏性哮喘大鼠嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）炎症的作用以及影响肺组织内嗜酸性粒细胞浸润的机制。方法：48只雄性wister大鼠随机分为6组：正常对照组（A）、哮喘模型组（B）、小剂量（0．08mg·kg^-1）福莫特罗组（C）、中剂量（0．12mg·kg^-1）福莫特罗组（D）、大剂量（0．16mg·kg^-1）福莫特罗组（E）、地塞米松（0．5mg·kg^-1）组（F）,每组8只。卵蛋白致敏诱发建立哮喘大鼠模型,福莫特罗口服,地塞米松腹腔注射给药7d。常规HE染色观察病理变化;原住凋亡法（TUNEL）检测细胞凋亡指数;酶联免疫吸附法测肺组织匀浆中嗜酸性粒细胞趋化活化因子（eotaxin）及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophil cationic protein,ECP）的含量。结果：（1）A组气道炎症无明显变化;B组炎症变化明显,大量EOS浸润,与A差异显著（P〈0．01）;随着福莫特罗治疗量的增大炎症逐渐减轻,浸润EOS数量明显减少（P〈0．01）。（2）B组凋亡指数下降,与A组有显著差异（P〈0．01）;D、E组凋亡指数较B组显著下降（P〈0．05）。（3）B组eotaxin较A组显著升高（P〈0．01）;各用药组显著下降（P〈0．05）。各用药组eotaxin与EOS数量呈正相关。（4）B组ECP含量较A组显著升高（P〈0．01）;各用药组均显著低于13组（P〈0．01）。结论：（1）哮喘大鼠气道中嗜酸性粒细胞增多。（2）在体内福莫特罗能够抑制嗜酸性粒细胞凋亡。（3）福莫特罗能够明显降低气道中EOS数量,与抑制EOS趋化有关。（4）福莫特罗可能通过减少肺组织内eotaxin的表达来抑制EOS趋化。（5）福莫特罗能够抑制EOS活化,减少肺组织中的ECP含量。     

哮喘豚鼠外周血及肺组织IL-5、Eotaxin的表达及糖皮质激素的影响

目的探讨哮喘发病中IL-5、Eotaxin的表达及糖皮质激素的作用。方法24只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘组和地塞米松（DXM）干预组。卵蛋白（OVA）致敏和激发制作哮喘豚鼠模型，采集豚鼠外周血利用ELISA法测定IL-5、Eotaxin的含量，制备豚鼠肺组织病理标本，肺组织切片用IL-5、Eotaxin多克隆抗体染色，光镜下分别记数阳性细胞比例。结果与正常对照组相比较，哮喘组豚鼠外周血及肺组织IL-5、Eotaxin含量、阳性细胞比例显著增高（P〈0．05），DXM干预后明显下降（P〈0．05）。结论哮喘豚鼠模型外周血及肺组织IL-5、Eotaxin表达明显增强，糖皮质激素可抑制IL-5、Eotaxin表达．     

IL-5 and Eotaxin Levels in Middle Ear Effusion and Blood from Asthmatics with Otitis Media with Effusion

Objective--The purpose of this study was to evaluate eosinophil infiltration as well as IL-5 and eotaxin levels in middle ear effusion (MEE) and blood from otitis media with effusion (OME) patients with asthma and to compare the findings with those from OME patients without asthma (control group). Material and methods--Levels of IL-5 and eotaxin in MEE and blood were measured by means of enzyme-linked immunosorbent assay. Results--IL-5 levels in MEE were significantly higher than those in blood in both groups of patients and in OME patients with asthma than in the control group. In addition, in OME patients with asthma, there was a significant correlation between the percentage of eosinophils and IL-5 levels in MEE. Eotaxin levels in blood were significantly higher than those in MEE in both groups of patients and in OME patients with asthma than in the control group. In addition, in OME patients with asthma, the percentage of eosinophils and eotaxin levels in blood tended to correlate, but did not reach statistical significance. Conclusion--These data suggest that, in OME patients with asthma, eosinophilia in MEE depends more on IL-5 than on eotaxin, and that eotaxin may play an important role in the mobilization of eosinophils from the bone marrow into the blood.     

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中血管细胞黏附因子-1与Eotaxin的表达及临床意义

摘要：目的分析血管细胞黏附因子 1(vasular cell adhesion molecule 1, VCAM 1)与Eotaxin在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中的表达及临床意义。方法SD健康大鼠40只随机分为2组:卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏组和生理盐水(sodium chloride,SC) 组。以卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,HE染色和甲苯胺蓝染色观察鼻黏膜组织病理学变化,免疫组织化学SP法测定鼻黏膜组织中VCAM 1、Eotaxin的表达。结果 OVA 致敏组可见鼻黏膜高度肿胀,大量炎性细胞浸润,SC组病理学未见异常表现;OVA 致敏组与SC组比较,VCAM 1和Eotaxin表达强度差异均具有统计学意义(P均<0.01); OVA 致敏组大鼠鼻黏膜组织中VCAM 1表达强度与Eotaxin呈正相关(r=0.886,P<0.01)。结论Eotaxin及VCAM 1参与了变应性鼻炎的发病过程,且二者有协同作用。     

IL-8和Eotaxin在哮喘大鼠中的表达及地塞米松的作用

目的研究哮喘大鼠外周血、肺泡灌洗液(BALF)中白介素-8(IL-8)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)水平和肺组织Eotaxin mRNA及蛋白表达及地塞米松(DXM)对其影响。方法 30只SD大鼠随机平均分为正常组、哮喘组、DXM组。以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠哮喘模型,BALF行细胞计数和分类;ELISA法检测血、BALF中IL-8、Eotaxin水平;肺组织切片HE染色观察病理变化;采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测肺组织Eotaxin mRNA及蛋白表达。结果哮喘大鼠BALF中白细胞总数,嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞百分比显著高于正常组(P<0.01);血清、BALF中IL-8、Eotaxin水平均显著高于正常组(P<0.01),DXM组明显低于哮喘组(P<0.05);哮喘组肺组织Eotaxin mRNA及蛋白的表达水平明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),DXM组介于两组之间。结论 IL-8和Eotaxin参与了哮喘炎症过程,DXM可通过抑制其表达来减弱中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的趋化与激活,这可能是DXM减轻哮喘炎症反应的作用机制之一。     

1,25-二羟维生素D_3对哮喘大鼠血清中Eotaxin及IL-8表达的影响

目的探索1,25-（OH）2D3对哮喘大鼠血清中Eotaxin及IL-8表达的影响。方法 50只Wistar大鼠随机分为正常对照组（N）、哮喘组（A）、1,25-（OH）2D3组（VD）、布地奈德组（B）及1,25-（OH）2D3＋布地奈德联合治疗组（L）,每组10只。用ELISA法检测血清中Eotaxin及IL-8的表达水平。结果 Eotaxin和IL-8的表达,A组较N组和治疗组明显增高;VD组较A组明显减低,明显高于N组、B组及L组;L组较A组、B组和VD组明显减低。结论哮喘急性发作时血清中Eotaxin及IL-8的表达水平显著增高,1,25-（OH）2D3有效抑制了哮喘时的Eotaxin和IL-8的表达水平,1,25-（OH）2D3与布地奈德联合治疗作用更为明显。     

细胞间粘附分子和嗜酸细胞趋化因子在哮喘患儿血清中的表达及意义

目的探讨支气管哮喘患儿血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、血管内皮细胞间粘附分子-1（sVCAM-1）、嗜酸细胞趋化因子（Eotaxin）水平的相关性及临床意义。方法采用ELISA双抗体夹心法对38例哮喘患儿和36例正常对照组儿童血清sICAM、sVCAM-1、Eotaxin进行检测。结果哮喘患儿血清sICAM-1、sVCAM-1、Eotax-in水平均较对照组显著升高（P〈0．01）,而哮喘发作期患儿与缓解期患儿之间差异也具有统计学意义（P〈0．05）,重度发作患儿较轻、中度发作升高明显（P〈0．05）。哮喘患儿血清sICAM-1、sVCAM-1水平与Eotaxin水平之间存在正相关（r=0．632,P〈0．01）。结论sICAM-1、sVCAM-1、Eotaxin参与了哮喘的病理过程,其水平的高低可能与哮喘病情的严重程度有关,可视为哮喘气道炎症诊断和观察病情活动性的重要指标。     

孟鲁司特联合舒利迭对支气管哮喘患儿血清Leptin、Eotaxin、ECP、LPO、细胞免疫及微量元素的影响

目的:研究孟鲁司特联合舒利迭对支气管哮喘患儿血清Leptin、Eotaxin、ECP、LPO、细胞免疫及微量元素的影响。方法:选取2011年6月～2012年7月于本院进行治疗的86例支气管哮喘患儿为研究对象,将其随机分为对照组(舒利迭组)和观察组(孟鲁司特联合舒利迭组),每组各43例,检测并比较两组患儿治疗前与治疗后6、12周的血清Leptin、Eotaxin、ECP、LPO、细胞免疫及微量元素水平。结果:观察组治疗后6、12周的血清Leptin、Eotaxin、ECP及LPO水平均低于对照组,而细胞免疫指标优于对照组,血Ca、Zn、Fe、Se、Cu及Mg水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:孟鲁司特联合舒利迭对支气管哮喘患儿血清Leptin、Eotaxin、ECP、LPO、细胞免疫及微量元素的影响较大,对于改善患儿的综合状态发挥着积极的临床作用。