大鼠脑缺血再灌注损伤时脑组织血管内皮生长因子和内皮抑素的变化

目的 探讨大鼠脑缺血再灌注损伤时脑组织血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(ES)的变化.方法 雄性Wistac大鼠48只,体重270～330 g,随机分为2组:假手术组(S组,n=8)和脑缺血再灌注组(IR组,n=40).IR组采用改良的Zea Longa线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉建立局灶性脑缺血再灌注模型,缺血90 min时拔出线栓行再灌注.S组只插入线栓,不阻断大脑中动脉.S组于术后1 d时、IR组分别于再灌注6 h、1、2、4、7 d时,取8只大鼠进行神经功能损伤评分,然后处死,取脑组织,观察脑梗死情况,采用RT-PCR法测定VEGF mRNA和ES mRNA的表达,计算其比值(ES/VEGF).结果 与S组相比,IR组再灌注各时点神经功能损伤评分升高,脑组织VEGF mRNA表达上调,再灌注1、2、4、7 d时脑组织ES mRNA表达上调,再灌注2、4、7 d时脑组织ES/VEGF降低(P<0.01).再灌注2 d时神经功能损伤评分最高,VEGF mRNA表达及ES/VEGF至谷值,ES mRNA表达至峰值,脑梗死最严重.结论 大鼠脑缺血再灌注时VEGF mRNA和ES mRNA表达上调,且脑损伤程度与脑组织ES和VEGF的平衡状态有关.     

白细胞介素18与内皮抑素联合基因导入治疗肿瘤的研究

目的：选用白细胞介素18（IL-18）和内皮抑素（ES）联合以物理方法导入治疗肿瘤，以探索一种肿瘤基因治疗的新途径。方法：①采用脂质体包被肌肉注射法将作者构建的质粒pSecTag2B-mIL-18和pES1424-mES分别和联合转人Balb／c小鼠，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两种基因蛋白在动物体内的表达情况；②将小鼠分为4组：pSecTag2B-mIL-18转入组、pES1424-mES转入组、pSecTag2B—mIL-18与pES1424-mES联合转入组和对照组，观察各组肿瘤的生长情况。结果：①RT-PCR和ELISA检测证明两种质粒均能够在小鼠肌肉中表达，特别是将两种质粒同时转入同一小鼠肌肉后，能够同时在小鼠肌肉中表达；并将表达的蛋白分泌到外周血液循环中，分泌量与单独基因转入分泌表达量的差异没有统计学意义。②IL-18、ES单独应用都能明显抑制肿瘤的生长，而两基因联合治疗抑制肿瘤的效果明显好于单基因治疗组。结论：联合IL-18和ES基因治疗比两种基因单独应用能够更好地抑制肿瘤生长。     

心包剥离术对老年慢性缩窄性心包炎心钠素与内皮素变化影响的研究

目的 探讨心包剥离术对老年慢性缩窄性心包炎心钠素与内皮素变化的影响。方法 收集慢性缩窄性心包炎患者66例,区组随机化法分组为对照组和观察组,每组各33例,患者均给予相应治疗,对照组给予相应强心、扩血管药物,观察组患者行心包剥离术,治疗结束后,对所有患者的心钠素(ANF)、内皮素(ET)、血压以及临床治疗效果进行检测并比较。结果 与治疗前相比,治疗后两组患者ANF、ET、舒张压以及脉压水平均下降,收缩压水平升高(P<0.05)；与对照组相比,观察组患者ANF、ET、舒张压以及脉压水平较低,收缩压水平较高,射血分数EF值升高(P<0.05)；观察组患者术前术后的心功能评级的差异有统计学意义；观察组患者治疗总有效率较高(P<0.05)。结论 心包剥离术能够降低慢性缩窄性心包炎患者ANF、ET、舒张压以及脉压水平,升高收缩压水平,临床疗效较好,对临床有指导意义。     

联合自杀基因及内皮抑素基因双靶点治疗膀胱癌的实验研究

目的 探讨基因重组腺相关病毒自杀基因及内皮抑素(KS)联合基因治疗膀胱癌的效果.方法 (1)通过重组腺相关病毒(rAAV)-增强绿色荧光蛋白(EGFP)转染膀胱肿瘤T24细胞,来确定rAAV对该细胞的转染情况及转染效率;(2)通过rAAV-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-ES(简称rAAV-TIE)体外转染T24膀胱肿瘤细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞),应用MTT法、流式细胞仪等方法 来检测其对T24细胞及HUVEC细胞凋亡的诱导作用;(3)构建裸鼠膀胱癌模型,分析rAAV-TIE联合基因治疗膀胱癌的体内效果.结果 (1)rAAV-EGFP转染T24细胞后可以表达携带的外源基因EGFP;(2)rAAV-TK、rAAV-TIE转染T24细胞72 h后,流式细胞仪检测结果 显示,rAAV-TK、rAAV-TIE两组凋亡率分别是34.12%和36.91%,明显高于空病毒转染组[rAAV-多克隆位点(MCS)组](3.08%)和空白对照组(0.84%);(3)瘤内注射rAAV-KS、rAAV-TK、rAAV-TIE大约9 d后,肿瘤生长受到显著抑制,治疗结束后:各组肿瘤的体积分别是:rAAV-Es组(0.75±0.08)cm3、rAAV-TK组(0.71±0.11)cm3、rAAV-r11E组(0.52±0.09)cm3、rAAV-MCS组(1.27±0.13)cm3和空白对照组(1.24±0.17)cm3,除rAAV-ES组与rAAV-TK组间比较差异无统计学意义外,其余组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 体外和体内实验表明rAAV-TIE可有效抑制膀胱癌的血管生成和肿瘤的生长,能够双靶点基因治疗膀胱肿瘤.     

长期吸烟老年人检测血清血管内皮生长因子和内皮抑素对肺癌早期诊断的临床意义

目的 探讨长期吸烟老年人血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和内皮抑素(endostatin)水平的变化及其临床意义.方法 测定52例长期吸烟老年人血清VEGF和endostatin水平,其中伴肺癌组32例,不伴肺癌组20例,20例不吸烟健康老年人为正常对照组.结果 (1)伴肺癌组血清VEGF水平明显高于不伴肺癌组(t=13.681,P＜0.01)和对照组(t=9.372,P＜0.01).不伴肺癌组高于对照组(t=5.250,P＜0.05);(2)伴肺癌组血清endostatin水平明显高于对照组(t=5.332,P＜0.01),但与不伴肺癌组比较,差异无统计学意义(t=0.814,P＞0.05).不伴肺癌组与对照组比较,差异有统计学意义(t=3.700,P＜0.05);(3)伴肺癌组血清endostatin/VEGF比值明显低于不伴肺癌组(t=6.270,P＜0.01)和对照组(t=7.138,P＜0.01),但不伴肺癌组与对照组比较,差异无统计学意义(t=1.022,P＞0.05).结论 长期吸烟老年人应定期检测血清VEGF、endostatin水平及endostatin/VEGF比值,endostatin/VEGF比值可能是长期吸烟老年人早期诊断肺癌的指标之一.

Abstract：

Objective To explore the changes and clinical significances of serum vascular endothelial growth factor (VEGF) and endostatin concentrations for early detection of lung cancer in elderly long-term smokers. Methods Serum VEGF and endostatin concentrations were determined in 52 elderly long-term smokers and 20 elderly non-smokers by enzyme linked immunoabsent assay (ELISA) or competitive enzyme immunoassay. The 52 elderly long-term smokers were divided into lung cancer group (n = 32) and non-lung cancer group (n = 20). Results The concentration of serum VEGF was markedly higher in lung cancer group [(15. 7±8. 0) ng/L] than in non-lung cancer group and normal control group (t= 13. 681, t= 9. 372, respectively, both P＜0. 01). And the level of serum VEGF was significantly higher in non-lung cancer group than in normal control group (t=5. 250, P＜0. 05). The level of serum endostatin was significantly higher in elderly long-term smokers with or without lung cancer than in normal control group (t=5. 332, t=3. 700, respectively, P＜0. 01 and P＜0.05). But there was no statistic difference between non-lung cancer group and lung cancer group (t = 0. 814, P＞ 0.05 ). Notably, the endostatin/VEGF ratio was lower in lung cancer group than in non-lung cancer group and normal control group (t= 6. 270, t= 7. 138, respectively, both P＜0.01), while there was no significant difference between non-lung cancer group and normal control group (t= 1. 022, P＞0.05). Conclusions These findings suggest that the periodic detection of serum VEGF and endostatin and endostatin/VEGF ratio, especially endostatin/VEGF ratio, is of clinical importance and can be used as an early diagnostic marker of lung cancer in elderly long-term smokers.     

重组人血管内皮抑素对非小细胞肺癌患者血流灌注和乏氧改善作用的观察

目的 通过CT灌注成像和乏氧显像技术评价非小细胞肺癌患者使用重组人血管内皮抑素（恩度）后癌组织血流灌注和乏氧状态的动态变化。 方法 选择初发初治肺癌患者15例,分为治疗组10例和对照组5例;治疗组静脉滴注恩度(7.5 mg/m2×10 d),在第1、5、10天同时行CT灌注成像和乏氧显像,以了解恩度治疗后肿瘤组织的血流...     

诱导化疗并三维适形放疗加重组人血管内皮抑制素治疗局部晚期非小细胞肺癌

目的 观察诱导化疗并三维适形放疗加重组人血管内皮抑制素治疗局部晚期非小细胞肺癌的疗效及毒副反应.方法 将30例局部晚期NSCLC患者按随机数字表法分为两组,观察组15例:采用诱导化疗+重组人血管内皮抑制素+放疗,第1天,第8天,长春瑞滨25 mg/m2,第2～4天,顺铂30 mg/m2;第1～14天,重组人血管内皮抑制素注射液7.5 mg/m2,间隙7d后,重复使用,共2～4个疗程.对照组15例:采用诱导化疗+放疗,第1天,第8天,长春瑞滨25 mg/m2+第2～4天,顺铂30 mg/m2.放疗均采用三维适形放疗,处方剂量为60～ 68 Gy/30 ～34次.用WHO的标准评价疗效,比较有效率、毒副反应、中位无进展生存时间、1年生存率.结果 观察组和对照组总有效率(CR+ PR)分别为66.7％和60.0％,(P＞0.05).观察组和对照组中位无进展生存时间分别是12个月和10个月.观察组和对照组中位生存时间分别是20个月和18个月.两组1年总生存率分别为80.0％(12/15)和73.3％(11/15),(P＞0.05).两组主要毒副反应为血液毒性、胃肠道反应、放射性食管炎和放射性肺炎,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 重组人血管内皮抑制素联合诱导放化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌在客观缓解率和总生存率方面均有所提高,毒副反应可以耐受,但差异无统计学意义,其结果有待进一步的随机多中心Ⅲ期临床研究.     

肝细胞癌介入栓塞前后血管内皮生长因子和内皮抑素的变化与预后的关系

目的 探讨肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术(TACE)前后血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(ES)变化规律与预后的关系.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者TACE术前及术后1周血清VEGF和ES水平.结果 肿瘤直径≥5 cm的患者,ES在治疗前后分别为(43.35±9.80)ng/ml、(48.35±10.89)ng/ml;VEGF分别为(310.23±64.31)ng/ml、(369.10±60.11)ng/ml.肿瘤伴有门静脉癌栓的患者ES在治疗前后分别为(54.28±8.78)ng/ml、(50.28±7.51)ng/ml;VEGF分别为(331.26±63.38)ng/ml、(400.29±60.98)ng/ml.VEGF和ES水平与肿瘤大小、门静脉癌栓以及临床分期密切相关(P＜0.05).肝细胞癌患者临床分期越晚,TACE前、后VEGF和ES水平均越高.晚期肝癌患者VEGF/ES比值明显高于早期患者.VEGF/ES比值越低生存时间越长.结论 VEGF、ES、VEGF/ES比值可作为预测肝细胞癌治疗效果的指标.     

腺病毒载体介导的内皮抑素基因治疗小鼠黑素瘤的实验研究

目的　探讨腺病毒载体介导的内皮抑素基因（Ad-mES）在体外和体内的生物学活性。方法　不同感染复度（MOI）的腺病毒体外感染靶细胞;RT-PCR法检测目的基因的表达;MTT法检测Ad-mES对靶细胞生物活性的影响。观察各组小鼠黑素瘤的生长、转移和生存率;免疫组化法鉴定肿瘤组织内内皮抑素蛋白的表达。电子透射电镜观察肿瘤组织内皮细胞、肿瘤细胞的凋亡情况。结果　腺病毒体外能够有效感染靶细胞,MOI为10,20,50,100,200,500时,B16F10细胞和ECV304细胞的腺病毒感染率分别为15.6%、35%、73%、88%、95.2%、97%和19%、35%、80%、90%、97%、98.5%。靶细胞明确表达内皮抑素基因;Ad-mES对B16F10细胞的增殖没有影响;而Ad-mES能抑制ECV304细胞的增殖,且随MOI增大,抑制内皮细胞增殖效果越强。瘤细胞接种后第8天,各组成瘤率100%。开始出现小鼠死亡的最早日：PBS组第16天、Ad-GFP组第18天、Ad-mES单剂、重复治疗组均在第20天。结论 Ad-mES体外和体内均影响靶细胞的生物学活性;Ad-mES治疗组小鼠平均生存时间延长（P < 0.05）,肿瘤体积增长减慢（P < 0.05）。     

吡柔比星和内皮抑素对乳腺癌细胞的影响

【目的】观察吡柔比星和内皮抑素（Endostatin,ES）对乳腺癌细胞的影响。【方法】将人乳腺癌MCF-7细胞株分为对照组;不同浓度的吡柔比星组;ES组以及不同浓度吡柔比星＋ES组。用MTT法测定不同浓度吡柔比星及ES作用于MCF-7细胞72h后的增殖活性并进行比较。【结果】吡柔比星单独应用时,平均制率（IR）随着吡柔比星浓度的增加依次增加,作用72h时,各浓度组均对增殖活性均有抑制作用（P〈0．05）;ES单独应用时,作用72h时对增殖活性具有抑制作用（P〈0．05）,吡柔比星与ES联合应用时,平均IR亦随着其中吡柔比星浓度的增加依次增加,作用72h后,3种浓度的吡柔比星与ES联合应用,均具有协同作用（P〈0．05）。【结论IES与吡柔比星两者联用在抑制肿瘤生成方面具有协同作用。