脾虚证胃粘膜形态DNA cAMP微量元素改变的临床与实验研究

目的研究脾虚证实质、脾虚证与胃癌发生的关系。方法采用 IBAS2000型图象分析系统、501B 型扫描电镜附有9100/60型能量色散 X 分析仪,以及组织化学与放射免疫方法,检测脾虚证患者胃粘膜超微结构、肠化生亚型、DNA、cAMP、微量元素及其氧化物。结果脾虚色滞证患者中胃癌发生率、不完全性结肠型肠化生发生率和"背景病变"发生率均显著高于脾气虚证患者;胃粘膜 cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 Cuo 含量,随着肠化生完全性至不完全性、小肠型至结肠型的顺序递减;而 DNA 含量则随以上顺序递增,P<0.05～0.001。胃粘膜不完全性结肠型肠化生组织内 DNA、cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 CuO 含量则与胃癌组织同元显著性差异。结论脾虚气滞证胃病有癌变倾向;不完全性结肠型肠化生与胃癌的发生有密切关系。@何雪芬$目的!研究脾虚证实质、脾虚证与胃癌发生的关系。方法采用 IBAS2000型图象分析系统、501B 型扫描电镜附有9100/60型能量色散 X 分析仪,以及组织化学与放射免疫方法,检测脾虚证患者胃粘膜超微结构、肠化生亚型、DNA、cAMP、微量元素及其氧化物。结果脾虚色滞证患者中胃癌发生率、不完全性结肠型肠化生发生率和"背景病变"发生率均显著高于脾气虚证患者;胃粘膜 cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 Cuo 含量,随着肠化生完全性至不完全性、小肠型至结肠型的顺序递减;而 DNA 含量则随以上顺序递增,P<0.05～0.001。胃粘膜不完全性结肠型肠化生组织内 DNA、cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 CuO 含量则与胃癌组织同元显著性差异。结论脾虚气滞证胃病有癌变倾向;不完全性结肠型肠化生与胃癌的发生有密切关系。@尹玉芬$目的!研究脾虚证实质、脾虚证与胃癌发生的关系。方法采用 IBAS2000型图象分析系统、501B 型扫描电镜附有9100/60型能量色散 X 分析仪,以及组织化学与放射免疫方法,检测脾虚证患者胃粘膜超微结构、肠化生亚型、DNA、cAMP、微量元素及其氧化物。结果脾虚色滞证患者中胃癌发生率、不完全性结肠型肠化生发生率和"背景病变"发生率均显著高于脾气虚证患者;胃粘膜 cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 Cuo 含量,随着肠化生完全性至不完全性、小肠型至结肠型的顺序递减;而 DNA 含量则随以上顺序递增,P<0.05～0.001。胃粘膜不完全性结肠型肠化生组织内 DNA、cAMP、Zn、Cu、ZnO 和 CuO 含量则与胃癌组织同元显著性差异。结论脾虚气滞证胃病有癌变倾向;不完全性结肠型肠化生与胃癌的发生有密切关系。     

大肠癌预防的现状及研究进展

2003年初将上市某应用基因公司研制的一种基于粪便DNA多项指标分析筛查大肠腺瘤和癌的检测技术。该项检测技术的上市名称是PreGen-Plus，可以检测5种不同的DNA异常，其中包括APC，k-ras，p53和BAT-26(一种微卫星不稳定性标志物)以及DNA片段完整性分析。该检测技术将用于拒绝大肠镜检查的普通人群。目前，美国正在进行两个多中心、大样本的筛查验证。     

光谱法研究替诺昔康与小牛胸腺DNA相互作用

目的研究替诺昔康与小牛胸腺DNA(ct DNA)之间的相互作用。方法借助紫外光谱和荧光光谱考察了替诺昔康与ct DNA之间的相互作用,同时通过热变性研究、黏度法试验考察了替诺昔康与ct DNA的相互作用模式。结果 ct DNA加入使替诺昔康紫外光谱出现轻微减色效应,且随着ct DNA浓度的增大,减色效应变强;替诺昔康的加入使ct DNA-盐酸小檗碱发生荧光猝灭,且其猝灭程度具有浓度相关性。替诺昔康对于ctDNA溶液的黏度和热变性温度影响不大。结论替诺昔康与ct DNA是以沟槽方式结合,并且替诺昔康可以使ct DNA-盐酸小檗碱发生静态荧光猝灭。     

乙型肝炎病毒感染患者外周血白细胞介素-18表达水平与乙型肝炎病毒感染的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血白细胞介素(IL)-18表达水平与HBV感染的相关性。方法选取2018年5月至2019年5月我院收治的HBV患者190例,其中包含HBV携带者33例,急性乙型肝炎组30例,慢性乙型肝炎轻度组42例,慢性乙型肝炎中度组26例,慢性乙型肝炎重度组16例,重度急性肝炎组14例,重度慢性肝炎组29例,并选取同期我院接受健康体检的健康人23名作为健康对照组。分析所有入组人员IL-18水平,分析不同HBV载量患者IL-18表达情况,探讨HBV感染患者外周血IL-18表达水平与HBV感染的相关性。结果与健康对照组比较,急性乙型肝炎组与慢性乙型肝炎轻度组患者IL-18水平明显降低(P<0.05),病毒携带组患者IL-18水平无明显变化(P>0.05),慢性乙型肝炎中度组、重度组、重度急性肝炎组以及重度慢性肝炎组患者IL-18水平明显升高(P<0.05),随HBV感染所导致的肝脏炎症坏死程度加重IL-18水平呈现明显升高趋势;本次研究接受组织病理检测患者43例,其中HBV携带者23例,慢性乙型肝炎轻度组20例,G4分级IL-18水平高于G3、G2、G1以及G0患者(P<0.05),G3分级IL-18水平高于G2、G1以及G0患者(P<0.05),G2分级IL-18水平高于G1以及G0患者(P<0.05);HBV高载量患者IL-18水平低于中载量、低载量组(P<0.05),HBV中载量患者IL-18水平低于低载量患者(P<0.05);经相关性分析显示,外周血IL-18与HBV载量存在负相关性,差异有统计学意义(r=-0.862,P<0.05)。结论外周血IL-18水平与患者HBV载量呈负相关性,可以通过对患者IL-18水平进行分析的方式,了解患者疾病进展情况以及预后情况。     

DDX41蛋白通过活化IRF3抑制乙型肝炎病毒的复制

目的 探讨含DEAD框解旋酶41 (DDX41)基因对乙型肝炎病毒(HBV)复制能力的影响及其作用机制.方法 通过慢病毒包装将稳定过表达DDX41或特异敲低DDX41的短发卡RNA (shRNA)重组质粒转染至HepG2.2.15细胞系,筛选和建立稳定过表达或敲低DDX41的细胞株;通过CRISPR-Cas9技术构建敲除DDX41的HepG2.2.15细胞株;蛋白免疫印迹法检测DDX41蛋白表达水平以及通路验证;酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HBV复制相关DNA、RNA以及干扰素mRNA表达水平;Noahern印迹法检测HBV总RNA.结果 过表达DDX41可显著抑制HepG2.2.15细胞系中HBV的复制;而敲低或敲除DDX41可显著促进HepG2.2.15细胞系中HBV的复制.过表达DDX41可显著促进干扰素调节因子3(IRF3)的磷酸化和干扰素β(IFN-β)的表达;而敲低或敲除DDX41可显著抑制IRF3的磷酸化和IFN-β的表达.结论 在肝癌细胞系HepG2.2.15中,DDX41蛋白通过促进IRF3的磷酸化并诱导干扰素β的表达,进而发挥抑制HBV复制的功能.     

微针介导HGF基因表达治疗湿疹的实验研究

目的 通过微针经皮递送携带肝细胞生长因子(HGF)重组质粒pHGF,探究微针介导HGF基因表达治疗湿疹的作用.方法 制备筛选pHGF透明质酸可溶性微针贴并进行表观机械性能检测、皮肤插入染色试验及小动物活体成像.实验小鼠随机分为模型组、阳性对照组、微针贴组及皮下注射组,采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)皮肤致敏建立湿疹模型,按皮肤症状评分和苏木素-伊红(HE)染色切片观察皮肤病理情况,评价载药微针贴的治疗效果.结果 透明质酸可溶性微针贴结构完整,机械强度较好,能较好地插入小鼠皮肤成功染色并能将质粒DNA有效递送到皮内表达.第28天后与模型组BALB/c小鼠相比,微针贴组和皮下注射组皮损积分较低(均P＜0.01),HE病理染色切片显示,皮肤炎性浸润较轻,皮下附件修复较好.结论 微针经皮递送pHGF基因表达能对湿疹模型小鼠起到较好的治疗作用.     

等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型

目的了解人群CYP2C19基因型的分布,评价等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型。方法等位基因特异荧光PCR法和金标准Sanger DNA直接测序法检测356名供者外周血CYP2C19基因型,实验采用同步盲法。结果 CYP2C19*1/*1型、CYP2C19*1/*2型、CYP2C19*2/*3型、CYP2C19*3/*3型、CYP2C19*2/*2型及CYP2C19*1/*3型的频率分布:使用PCR荧光法检测时分别为46.6%(166/356)、33.2%(118/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、10.7%(38/356)及6.7%(24/356);采用DNA测序法时分别为46.3%(165/356)、33.4%(119/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、11.0%(39/356)及6.5%(23/356)。两种方法检测CYP2C19基因型具有一致性(P=0.392),且一致性较好(Kappa=0.987);两种方法基因型检测结果一致率为99.2%。结论为保障医疗安全,临床需开展CYP2C19基因型检测;等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型简便可靠。     

不同类型霍奇金淋巴瘤EBV检测的原位杂交和免疫组化方法比较

目的 探讨EBER原位杂交和免疫组化EnVision两步法在检测不同类型霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)中EBV的表达和意义.方法 收集68例不同类型HL标本(结节硬化型38例、混合细胞型18例、淋巴细胞丰富型7例、淋巴细胞消减型5例),石蜡切片后,分别采用EBER原位杂交法检测EBV编码的mRNA(epstein barr encoded RNAs1,EBER1)以及免疫组化EnVision两步法检测EBV潜伏膜蛋白1(laten mbmbrane proteins,LMP1)在不同类型HL中的表达.结果 68例标本中,免疫组化EnVision两步法检测结果 总阳性率为36%(25/68),其中结节硬化型为23%(9/38),混合细胞型为66%(12/18),淋巴细胞丰富型和淋巴细胞消减型分别为28%(2/7)和40%(2/5);原位杂交检测结果 总阳性率为55%(38/68),其中结节硬化型为42%(16/38),混合细胞型为88%(16/18),淋巴细胞丰富型和淋巴细胞消减型分别为42%(3/7)和60%(3/5).结论 在对不同类型HL的EBV检测中,EBER原位杂交方法 比免疫组化EnVision两步法检出率更高,定位更清晰,同时也更具特异性和敏感性.     

癌细胞微核核膜的毁灭性破坏——癌症诊断新标记物

细胞有丝分裂时,染色体可寻找自身核膜进而形成微核。研究发现微核破坏可以引起染色体上大量DNA损伤,这或在癌症形成过程中发挥了较以前要更为积极的作用,且对于包括非小细胞肺癌（NSCLC）在内的许多实体瘤（在诸如NSCLC等实体籀中,超过60咣的微核出现了灾难性的功能异常,促使形成致癌性非整倍体）,