人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建

目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。     

细菌 DNA拮抗措施研究进展

细菌DNA能够激活哺乳动物巨噬细胞、树突状细胞、B细胞以及自然杀伤细胞(NK)等多种免疫细胞，诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1、IL-12、γ型干扰素(IFN-γ)等炎症介质释放，引起急性炎症反应，甚至发展为全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)并导致死亡。细菌DNA免疫刺激效应的结构基础是CpG基元(CpG motif)，即以未甲基化的     

中国仓鼠肺成纤维细胞和HeLa细胞DNA氧化损伤的自身修复能力与比较

目的:研究不同氧化相关因素对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)和HeLa细胞DNA损伤的自身修复情况.方法:将CHL细胞和HeLa细胞用不同氧化相关因素处理一定时间[CHL细胞:过氧化氢(H2O2)25 min,重铬酸钾(K2Cr2O7)105 min,阿霉素(Dox)75 min;HeLa细胞:H2O2 25 min,K2Cr2O7 105 min],随后立即去毒培养0、0.5、1、2、3 h,以碱性单细胞凝胶电泳技术检测DNA链断裂情况.结果:①CHL细胞经H2O2、K2Cr2O7、Dox作用后引起DNA链断裂,去毒培养1 h链断裂修复明显(P<0.01);去毒培养2～3 h,前两毒剂的损伤组完全修复,而Dox组链断裂仍高于未损伤组;②HeLa细胞经H2O2、K2Cr2O7作用后引起DNA链断裂,去毒培养0.5 h链断裂明显修复(P<0.01),去毒培养1 h则完全修复;③CHL细胞和HeLa细胞损伤后修复的拖尾率与修复时间的回归系数显著不同(P<0.05).结论:两种细胞在氧化性DNA损伤后均迅速启动自身修复,但HeLa细胞比CHL细胞有更快的修复能力;同时这两种细胞由Dox所致损伤修复能力均较H2O2、K2Cr2O7所致的差.     

肿瘤细胞的铁代谢及其调节

铁是细胞生长增殖及机能活动所必需的微量元素之一。它在细胞的DNA合成、电子传递、氧运送等过程中起着极其重要的作用。如果没有铁，细胞便不能从G1期进入到细胞周期的S阶段。此外，在细胞周期(例如：p53，GADD45和WAF1／p21)中，铁对大量分子的表达和调控上似乎也起着重要作用。     

DNA—蛋白质交联在砷中毒人群遗传损伤监测中意义及与皮肤癌变的关系

目的 :探讨ＤＮＡ 蛋白质交联 (ＤＰＣ)在监测砷中毒遗传损伤及皮肤病变的发生发展中的应用价值。方法 :依据皮肤病理组织学检查结果对砷接触者进行分组 ,并采用12 5Ⅰ 后标记法测定其ＤＮＡ 蛋白质交联状况。结果 :燃煤砷接触可增加人体ＤＮＡ 蛋白质交联的发生率 ,其发生早于皮肤损害 ,与对照、病区非病人及一般病变组比较 ,皮肤角化过度、癌前病变及癌变组明显增高 (Ｐ <0 0 5或Ｐ <0 0 1) ;该指标的增高与尿砷、发砷值密切相关 ;吸烟及燃煤年限可对其产生影响 ,年龄分层中以 4 0岁以上者ＤＰＣ形成最为突出 ,男性的ＤＰＣ形成高于女…     

二十二碳六烯酸对神经细胞生长发育的影响

目的：观察二十二碳六烯酸（DHA）对神经细胞生长发育的影响。方法：将无血清培养的新生大鼠大脑神经细胞分为实验组和对照组，实验组加入0.33mol/L乳化DHA 40μl。对两组细胞进行形态学观察及蛋白质含量测定。结果：实验组大脑神经细胞的突起生长速度、胞体面积和直径、神经细胞存活率及蛋白质含量均显著高于对照组。结论：DHA对神经细胞的生长有促进作用，这一作用可能与促进神经细胞蛋白质合成有关。     

母体血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的应用

目的：建立一种从孕妇血浆中检测胎儿DNA的无创性产前诊断新方法。方法：对30例孕7－41周妇女血浆进行聚合酶链式反应，特异性扩增的胎儿基因为Y染色体上的DYZ1位点，扩增片段的大小为149bp。30例孕妇血浆均经过酚－氯仿法提取DNA作为模板，进行聚合酶链反应。结果：20例妊娠男性胎儿孕妇中有17例出现DYZ1基因扩增条带，检出率为85．0％。10例妊娠女性胎儿孕妇中未出现阳性扩增条带，无假阳性结果。本研究中早、中、晚孕期性别符合率分别为80％、80％、90％，总符合率为85％。结论：使用酚－氯仿法提取血浆中的DNA，可以提高模板的浓度和纯度，改善PCR条件，提高了结果的准确性，作为无创性产前诊断方法有应用于临床。     

乳腺癌易感基因与DNA定量分析的研究进展

乳腺癌是危害妇女健康最常见的恶性肿瘤，近年来在我国的发病率有上升趋势。因此，乳腺癌的病因是国内外学者非常重视的研究课题。一个重大突破是1990年Hall．J等用连锁方法发现乳腺癌易感基因BRCA1，随后MiKi．Y等成功地克隆此基因。目前认为BRCAl是一种肿瘤抑制基因。乳腺癌易感基因BRCAl的突变在乳腺癌的发生过程中起着非常重要的作用。BRCA1的发现，被称为癌(抑癌)基因研究中的一个重要里程碑。     

用DNA控制你的皱纹

无论你的基因如何，你都能让自己看起来更加年轻。专家认为皱纹的出现是由10％的基因和90％的环境与生活方式决定的。基因决定了皮肤的厚度和皱纹的样式。不过，你还有90%的机会控制你的皱纹。以下变美五招不妨一试。     

JX-1对雄性小鼠生殖细胞致突变作用的研究

本文采用小鼠精子试验和小鼠睾丸DNA合成抑制试验,检测了JX-1对雄性生殖细胞的致突变作用。实验结果表明JX-1对小鼠精子总数、精子活动率及精子畸形率均无统计学意义的增加,与小鼠睾丸DNA合成抑制试验阴性反应一致。作者认为JX-1对雄性生殖细胞为一种非诱变剂。