河南省带绦虫病与囊尾蚴病流行趋势及防治历程

河南省原是绦虫病、囊尾蚴病高发省份之一,主要流行绦虫种类为猪带绦虫。自20世纪70年代以来,经过多年积极有效防治,河南省人群带绦虫、囊尾蚴感染率已处于极低流行水平,推动了全国“驱绦灭囊”工作。“驱绦灭囊”和分类指导并重的工作方针在全省范围内取得较好防治效果。随着我国对外开放及“一带一路”倡议的持续推进,带绦虫病、囊尾蚴病防控工作仍存在着一些问题与挑战。本文主要回顾河南省带绦虫病和囊尾蚴病防治历程,并对目前带绦虫病和囊尾蚴病防治工作面临的挑战进行分析。     

猪囊尾蚴期特异性抗原cC1的克隆与高效可溶性原核表达

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,表达的融合蛋白Ni+-亲和层析柱纯化后经快速液相蛋白层析分离系统检测其纯度。采用SDS-PAGE和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出的片段长度为1056bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定与Genbank中cC1基因相比于423位存在1个同义突变。转化有重组质粒的E. coli BL21(DE3)经过0.05mmol/LIPTG 37℃诱导6h高效表达了占菌体蛋白总量60%的可为囊虫病患者血清识别的相对分子质量约为40000的可溶性融合蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化后纯度达94%。结论成功克隆并高效可溶性原核表达了猪囊尾蚴期特异性抗原cC1,为其进一步研究和应用奠定了基础。     

猪囊尾蚴磷蛋白基因P2的克隆及在大肠杆菌中的表达

本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA ,用磷蛋白特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出 - 36 6bp的片段 ,扩增产物连接到PGEM -Teasy载体中 ,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明 ,所克隆的 36 6bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框。将重组质粒PGEM -P2和表达载体pProEX -HTb分别酶切后 ,亚克隆至原核表达载体 pProEX -HTb中 ,筛选阳性克隆 ,用IPTG诱导表达 ,收集不同时间的菌液进行SDS -PAGE电泳、Westernblot分析 ,结果表明 ,磷蛋白基因 p2在大肠杆菌中成功表达 ,其表达产物为分子量 15kDa的融合蛋白 ,并能被猪囊虫阳性血清所识别。     

猪囊尾蚴发育过程中的细胞凋亡

目的　研究猪囊尾蚴发育过程中猪囊尾蚴细胞是否存在凋亡。方法　仔猪感染猪带绦虫卵后 ,定期剖杀 ,剥离囊尾蚴 ,作组织切片 ,采用TUNEL法检测囊尾蚴头节和囊壁细胞的凋亡率 (S -AI和W -AI)。结果　头节细胞和囊壁细胞均存在凋亡现象 ,尤以囊壁细胞凋亡明显。感染后 19d时头节细胞和囊壁细胞凋亡率较高 ,分别为 7%和 15 %左右。以后随感染时间的延长而降低 ,至 80d时稍有回升 ,并分别稳定保持在 4 %和 8%左右。结论　猪囊尾蚴发育过程中猪囊尾蚴细胞存在凋亡 ,且囊壁细胞凋亡明显。     

应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原

目的 评价单克隆抗体检测循环抗原(CAg)诊断脑囊虫病的价值。方法用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体486,以ELISA方法检测患者和对照者血清和／或脑脊液中的猪囊虫抗原。结果82例脑囊虫病患者血清CAg阳性率为79．2％(65／82),腩脊液CAg阳性率为100％(26／26),治疗一个疗程后血清CAg转阴率为85％(17／20)。从对照者标本中未检出猪囊虫CAg。486和包虫抗原有轻微交叉反应。结论CAg检测,尤其是脑脊液CAg检测有助于脑囊虫病的诊断,而血清CAg检测则有助于疗效考核。     

青海省128例带绦虫/囊虫病病例回顾调查

绦虫病和囊虫病在青海省共同流行,为进一步了解绦虫病和囊虫病的分布特征,发病趋势,为该病的防治研究提供参考。对128例绦囊虫病患者的资料进行分析统计。绦囊虫病是青海流行较为严重的寄生虫病,且感染有上升趋势。应进一步加强绦囊虫病的防治和健康教育工作。     

乳腺猪囊尾蚴病1例报告

病人女性,47岁。因右乳肿物3d于2009-04-16入院。病人3d前无意中发现右乳肿物,伴有疼痛不适感觉,月经期无明显增长。查体右乳腺5点距乳头3cm可触及1cm×1cm×1cm大小肿物,质硬,边界不清,活动度好,表面光滑,与周围组织无粘连,双侧腋窝及锁骨上未触及肿大淋巴结。乳腺彩超:右乳腺内下象限距乳头35mm可见     

脑囊虫病病人血清中特异性和非特异性免疫复合物的检测

采用羊抗人ＩｇＧ抗体包被酶标板,以酶标兔抗囊虫囊液抗体为识别系统,建立了血清中完整囊虫特异性免疫复合物的捕捉法ＥＬＩＳＡ技术,结果发现８２．３５％的脑囊虫病人血清中存在着囊虫特异性免疫复合物,对照组有６．６７％的假阳性率。同时,采用Ｃ１ｑ捕捉法测定了血清中非特异性免疫复合物,发现囊虫病人血清中非特异性免疫复合物的含量为７．３４±１１．６３μｇ／ｍｌ,对照组为２．９２±１．６６μｇ／ｍｌ,囊虫病人血清中非特异性免疫复合物明显高于正常人。相关研究未发现囊虫病人特异性和非特异性免疫复合物之间有相关性。     

丙硫咪唑对囊尾蚴糖原作用的观察

猪囊尾蚴于体外经驱虫药丙硫味唑在0,20,50,100μg/ml和96小时作用后,进行了组织化学观察。对照组囊尾蚴的糖原分布在头颈部和外囊壁上,颈部区糖原分布较均匀,外囊壁糖原较多。实验各组头颈部糖原均有减少,而外囊壁糖原无显著变化。