EGCG联合放疗治疗鼻咽癌裸鼠移植瘤模型

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗的增敏效应及survivin和VEGF的表达及意义.方法 体外培养低分化鼻咽癌CNE-2细胞,接种于20只雄性裸鼠皮下,待肿瘤结节约4～6 mm时,随机分为生理盐水组、EGCG组(30 mg/kg)...     

人诱导多能干细胞向血管内皮细胞分化方法的建立

目的:建立一种新的促进人诱导多能干细胞(iPSc)向血管内皮细胞(VEC)分化的方法.方法:将未分化的人iPSc制备成拟胚体(EBs),分为常氧组(A组)、常氧加血管内皮生长因子(VEGF)组(B组)、常氧加甲基乙二酰氨基乙酸(DMOG)组(C组)、缺氧组(D组)、缺氧加VEGF组(E组)及缺氧加DMOG组(F组),分别给予相应处理;观察各组iPS-EBs分化的VEC形态结构,应用逆转录PCR(RT-PCR)法检测VEC特异基因CD31、CD34、VE-cad、KDR、vWF的表达,免疫荧光细胞法检测以mRNA表达最强组的VEC特异基因在细胞定位情况判断VEC分化情况.结果:RT-PCR结果显示未经诱导iPSc不表达任何VEC相关基因,A组EBs细胞仅表达微弱的VE-cad和KDR;经条件诱导后iPS-EBs细胞表达CD31、CD34、VE-cad、KDR、vWF,C组表达最强,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05);免疫荧光结果显示C组中CD31、CD34为膜表达,KDR、vWF为胞浆表达.结论:常氧状态下加入DMOG培养能成功促进人iPSc向VEC分化.     

瑞香狼香水提物小鼠药物血清诱导K562细胞凋亡

目的从细胞凋亡角度探讨瑞香狼毒(SCL)抗肿瘤作用机理.方法用SCL小鼠药物血清处理培养的人白血病K562细胞,MTT比色法观察对细胞生长的抑制作用,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化,流式细胞仪观察DNA改变.结果SCL(5～20)g*kg-1小鼠药物血清显著抑制K562细胞增殖,明显诱导K562细胞凋亡的形态学改变和DNA变化.凋亡细胞率与小鼠服用SCL水提物的剂量呈正相关.结论SCL水提物可诱导肿瘤细胞凋亡.     

异黄酮类药Genistein对原代培养大鼠成骨细胞增殖、分化、钙含量及矿化功能的影响

目的：了解异黄酮类药Genistein对体外培养成骨细胞的作用。方法：应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法，原子吸收分光光度法及茜素红染色方法观察Genistein对体外培养成骨细胞的增殖、ALP表达，基质钙含量及矿化结节形成的影响。结果：Genistein具有刺激成骨细胞增殖，提高ALP活性，细胞基质钙含量及矿化结节形成的数量的作用。结论：Genistein具有刺激体外培养成骨细胞增殖，分化成熟及促进矿化的作用。     

大鼠脂肪干细胞生物学特性的研究

目的研究大鼠脂肪干细胞的生物学特性，为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法从F344大鼠的脂肪组织分离得到脂肪干细胞，体外培养并扩增，倒置相差显微镜观察其形态，绘制生长曲线研究增殖能力，流式细胞仪检测表面标志，核型分析研究遗传学性能，最后以5．溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）进行体外标记。结果脂肪干细胞形态以梭形为主，CD11b、CD45、CD49d、CD80、CD86表达阴性，MHCⅠ、MHCⅡ表达弱阳性，CD29、CD44、CD54的表达阳性。第11代以前的脂肪干细胞有较强的活力和增殖能力，体外培养至第10代，其细胞仍稳定为二倍体核型。BrdU可标记其核。结论脂肪干细胞具有较强的自我更新能力，其形态和表面标志均类似大鼠骨髓间充质干细胞。     

异丙酚对布比卡因诱导的PC12细胞毒性的作用

目的 探讨异丙酚对布比卡因诱导的PC12细胞毒性的作用及其可能机制。方法PCI2细胞接种于96孔培养板中培养，随机分为4组：对照组、布比卡因组、异丙酚组和布比卡因＋异丙酚组，分别加入Hanks液、布比卡因（终浓度为0．03、0．06、0．09、0．12、0．15mmol／L）、异丙酚（终浓度为1、2,4、8mmol／L）以及同时加入布比卡因（终浓度为0．09mmol／L）和异丙酚（终浓度为1、2,4、8mmol／L）。培养24h时，采用二甲基噻唑二甲基四唑溴盐比色微量分析法测定各孔的细胞活力和上清液乳酸脱氢酶（LDH）的活性，应用流式细胞仪检测硫氧还蛋白-1（Trx-1）和硫氧还蛋白还原酶-1（TrxR-1）表达率。结果 与对照组比较，布比卡因组PC12细胞活力降低（P〈0．01），且呈浓度依赖性；异丙酚组PC12细胞活力差异无统计学意义（P〉0．05）。与布比卡因组的0．09mmol／L亚组比较，布比卡因＋异丙酚组的2—8mmol／L亚组PC12细胞活力增加（P〈0．05）。与对照组比较，布比卡因组和布比卡因＋异丙酚组LDH活性升高，Trx-1和TrxR-1表达率降低（P〈0．01）；与布比卡因组比较，异丙酚组和布比卡因＋异丙酚组LDH活性降低，Trx-1和TrxR-1表达率升高（P〈0．01）。结论 布比卡因对PC12细胞具有浓度依赖性的细胞毒性作用。异丙酚可通过保护内源性硫氧还蛋白系统减轻布比卡因诱导的PCI2细胞的毒性。     

A study of cytokines released from fibroblasts in cultured dermal substitute

Allogeneic cultured dermal substitute (CDS) was prepared by culturing fibroblasts on a two-layered spongy matrix of hyaluronic acid (HA) and atelo-collagen (Col). CDS can be cryopreserved and transported to other hospitals in a frozen state. The present study was designed to analyze amounts of cytokines released from fibroblasts in fresh or cryopreserved CDS. The culture medium used in preparing CDS over a cultivation period of 1 week (fresh CDS culture medium sample) contained vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), hepatocyte growth factor (HGF), platelet derived growth factor (PDGF)-AA, transforming growth factor (TGF)-beta1, keratinocyte growth factor (KGF), interleukin (IL)-6 and IL-8. After thawing of cryopreserved CDS, the CDS was re-cultured in medium for 1 week. The culture medium used in re-culturing CDS for 1 week (cryopreserved CDS culture medium sample) contained VEGF, bFGF, and HGF in the same concentration as before freezing, and TGF-beta1 and IL-8 at half the concentration before freezing. Levels of PDGF-AA, KGF, and IL-6 were significantly less than before freezing. This finding suggests that the cryopreserved CDS retains its ability to release VEGF, bFGF, and HGF that are essential for wound healing.     

完全脱蛋白骨复合rhBMP2构建人工骨及其体内异位成骨

目的: 探讨异种完全脱蛋白骨复合基因重组骨形态发生蛋白(rhBMP2) 在体外构建人工骨的可行性,并对其体内异位成骨进行评估。方法: 体外将兔骨髓基质细胞进行成骨诱导, 然后接种复合rhBMP2的小牛完全脱蛋白骨, 构建组织工程骨, 植入自体大腿肌袋内, 术后4、8周处死动物分别进行常规组织学检查、碱性磷酸酶活性测定、折弯力学测试, 观测这种组织工程骨在体内的异位成骨作用。结果: 这种方法构建和组织工程骨在体内异位成骨效应显著且抗折能力较强。结论: 异种完全脱蛋白骨复合rhBMP2可作为骨组织工程支架材料, 这种组织工程骨在体内的成骨能力随植入时间的延长而增加。     

艾易舒注射液在乳腺癌术后辅助治疗中的应用及效果评价

目的: 评价艾易舒注射液对乳腺癌术后患者化疗后细胞免疫功能及毒副反应影响。方法:将70例Ⅰ～ⅢA期乳腺癌患者随机分为艾易舒加化疗组（36例）和单纯化疗组（34例）,检测治疗前后T淋巴细胞亚群及NK细胞活性,比较两组的毒副反应及生活质量改变。结果: 艾易舒加化疗组患者CD3、CD4、CD8水平和CD4/CD8比值及NK细胞活性高于单纯化疗组(P<0.05);艾易舒加化疗组患者白细胞减少程度明显小于单纯化疗组（χ²=7.44,P=0.006）,其他毒副反应差异无显著性（P>0.05）;艾易舒加化疗组36.11%（13/36）患者KPS提高幅度高于单纯化疗组（11.76%,4/34）（χ²=5.64,P=0.018）; 艾易舒加化疗组44.44%患者体重增加,高于单纯化疗组（17.65%）（χ²=6.66,P=0.036）。 结论: 艾易舒注射液可作为乳腺癌患者术后化疗的辅助用药,提高免疫能力,减轻化疗的毒副反应,提高患者的生活质量。     

成骨生长肽对大鼠骨髓基质细胞增殖分化的影响

目的 研究成骨生长肽(osteogenic growth peptide, OGP)在体外对骨髓基质细胞增殖和成骨向分化的影响.方法 在体外培养的大鼠骨髓基质细胞中加入不同浓度的OGP(10-11～10-7 mol/L),用MTT法检测细胞增殖,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测细胞内核心结合因子1(Cbfa1) mRNA的表达.结果 OGP对骨髓基质细胞增殖有促进作用(P《0.05),最大效应浓度为10-9 mol/L;能增加细胞内ALP活性(P《0.05),最大效应浓度为10-8 mol/L;可诱导Cbfa1 mRNA的表达(P《0.05).结论 OGP可促进骨髓基质细胞的增殖,并通过诱导其内Cbfa1 mRNA的表达促进其成骨向的分化.