antagomiR-221抑制肝癌细胞增殖的初步研究

目的 研究小分子RNA抑制剂antagomiR-221对肝癌细胞增殖的影响.方法 原位杂交法检测肝癌组织及癌旁组织中miR-221表达情况:实验分3组重组质粒pEGFPantagomiR-221转染HepG2细胞为实验组,空质粒pEGFP-N2转染HepG2细胞为阴性对照组,HepG2细胞为空白对照组.采用细胞计数法和...     

两种黔产淫羊藿总黄酮对痴呆大鼠学习记忆的影响

目的研究黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿淫羊藿总黄酮(TFE)对D-gal-AlCl3联合造模大鼠学习记忆能力的影响。方法联用D-gal-AlCl3 12周造模,同时按剂量100、50 mg.(kg.d)-1,分组po给TFE。采用Morris水迷宫实验检测其空间记忆能力;应用生化技术检测脑、血AChE活性;以免疫组化技术检测脑Bcl-2/Bax水平。结果 D-gal-AlCl3造模形成了大鼠学习记忆障碍;TFE能改善D-gal-AlCl3致痴呆大鼠学习记忆能力,降低脑、血组织中AChE的活性,明显升高bcl-2并降低Bax水平。以粗毛淫羊藿改善记忆能力效果为优。结论粗毛淫羊藿对痴呆大鼠记忆能力,脑细胞凋亡具有更明显保护作用。提示淫羊藿苷(ICA)是TFE中增强记忆的主要物质基础。     

缺氧诱导因子-1与血液肿瘤

缺氧诱导因子-1（HIF-1）是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，通过上调一些与血管新生和糖酵解有关的基因来介导组织细胞对缺氧的适应，是一种重要的缺氧应答调控因子，其生物学效应由HIF-1亚基实现。HIF-1在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管形成、细胞增殖与凋亡等很多方面都起着重要作用。本文就HIF-1的生物学特性，HIF-1在血液肿瘤发生发展中的作用及其对预后的影响等研究进展作一综述。     

间氯苯哌嗪诱导的小鼠明暗箱焦虑模型 一种新的经济简便抗焦虑药筛选模型

目的　建立经济简便的抗焦虑药模型。方法　用间氯苯哌嗪 (mCPP)诱导产生焦虑 ,观察ddy小鼠和ICR小鼠在明暗箱的行为表现。结果　mCPP在sc 1～ 4mg·kg-1的剂量下即可显著降低ddy小鼠在明箱的活动次数 ,而对暗箱的活动次数影响不显著 ;mCPP在sc 2～ 10mg·kg-1的剂量下对ICR小鼠在明箱的的活动次数影响不明显 ;用地西泮对该模型进行验证 ,发现只用较小的样本量即可得出显著结果。结论　ddy小鼠可取代Wistar大鼠进行mCPP诱导焦虑的明暗箱模型 ,且简便易得 ,经济有效。     

基于转录组学研究岩藻黄素在扰动剪切应力对EPCs炎性及增殖影响

目的 在扰动剪切应力（Oscillatory shear stress, OSS, ±4 dynes/cm2, 1 Hz）作用下内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells, EPCs）转录组学数据生物信息学分析的基础上,探讨岩藻黄素（Fucoxanthin, FUCO）对OSS作用下的EPCs炎性、增殖以及细胞周期等生物活性改变的影响作用。方法 采用Flexcell flow STR-4000流体系统模拟体内扰动流剪切应力环境;利用Illumina高通量测序平台对相应处理的EPCs进行转录组测序分析,并对筛选到的差异蛋白编码基因进行功能以及通路分析;利用实时荧光定量PCR技术（RT-qPCR）验证相应生物信息学数据;Western blot（WB）检测筛选基因-前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）蛋白表达;采用EdU和PI染色分别进行EPCs增殖和周期检测。结果 与静止对照组相比,共计差异表达基因1066个,涉及细胞增殖和死亡、感染性疾病等信号转导通路;GO功能分析显示,该类基因功能主要影响的过程有细胞及细胞组分、细胞进程、细胞器及生物进程等生物活动;根据P值<0.05且Fold change（FC）>2的条件,筛选显著差异基因数17个,并经RT-qPCR以及WB验证,显示PTGS2 mRNA差异表达最为显著（P<0.001）,PTGS2蛋白表达差异明显（P<0.05）;进一步的结果显示,与OSS组EPCs相比,FUCO处理的OSS组EPCs中PTGS2 mRNA表达显著降低（P<0.001）,其蛋白表达被抑制（P<0.05）,并且FUCO处理过的OSS组EPCs增殖活性以及DNA合成能力增强。结论 结合转录组数据基础,提示FUCO能够显著降低OSS引发的EPCs炎症反应,尤其明显抑制炎性因子PTGS2表达;促进EPCs细胞增殖和 DNA合成,这为FUCO临床干预EPCs进而完善心血管疾病干细胞治疗提供理论依据。     

细胞穿透肽YARA介导增强型绿色荧光蛋白转导入人结直肠癌细胞的实验研究

目的 构建原核表达载体pET15b-YARA EGFP,表达并纯化出融合蛋白YARA-EGFP,观察其穿透人结直肠癌细胞的情况.方法 用分子克隆技术构建出表达型载体pET15b-YARA-EGFP,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白YARA-EGFP,将鉴定和纯化后的融合蛋白加入体外培养的人结直肠癌细胞.结果 得到纯化的融合蛋白YARA-EGFP,能高效地转导入体外培养的人结直肠癌细胞,并表现出剂量和时间依赖性,MTT法检测在其高浓度时仍对细胞无毒性.结论 YARA-EGFP融合蛋白能高效地转导入体外培养的人结直肠癌细胞.     

miR-31调控PAX9对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 研究miR-31调控配对盒基因9(PAX9)对肺癌细胞侵袭和增殖能力的影响.方法 运用免疫组织化学检测肺癌组织和癌旁正常组织PAX9蛋白的表达;运用荧光定量PCR检测肺癌组织、癌旁正常组织和肺癌细胞株M14中miR-31的表达.通过转染miR-31-inhibitor下调M14细胞中miR-31的表达,双荧光素酶活性检测miR-31对PAX9转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-31对M14细胞的侵袭能力的影响;平板克隆实验检测miR-31对M14细胞的增殖能力的影响.结果 与癌旁正常组织比较,PAX9蛋白在肺癌组织中表达降低,miR-31在肺癌组织中表达明显升高(P<0.05);双荧光素酶活性检测结果显示,miR-31可以直接调控PAX9的转录活性;抑制miR-31的表达后,肺癌细胞株M14的PAX9蛋白表达水平上调,侵袭和转移能力明显降低(P<0.05).结论 miR-31靶向PAX9的表达,从而调控肺癌细胞的侵袭和增殖能力.     

厄洛替尼与培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌疗效的间接比较

目的：根据临床研究文献,采用间接比较的方法综合评价厄洛替尼与培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法：计算机检索国内外公开发表的关于厄洛替尼或培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌的中英文文献,采RevMan5.0和ITC软件对纳入的研究进行间接比较。结果：共纳入7项吉非替尼vs厄洛替尼和7项吉非替尼 vs培美曲塞的文献进行间接比较。厄洛替尼与培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌的有效率和疾病控制率的RR值分别为1.11(P=0.40)、1.12(P=0.69)。结论：厄洛替尼和培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌的疗效无显著性差异,但二者的临床有效性尚需要更多高质量的大规模随机对照研究来进行证实。     

野罂粟悬浮细胞培养及其野罂粟生物碱的产生

对野罂粟细胞悬浮培养及其次生代谢物野罂粟生物碱进行了研究。结果显示，在培养的中后期补充营养物质可促进细胞生长及生物碱的累积。3％的蔗糖浓度对细胞的生长最为有利；4％的蔗糖对总生物碱的累积最为适宜。悬浮细胞在pH5．7的培养基中生长最为旺盛，而在pH5．4的培养基中总生物碱的含量最高。取IC法测定野罂粟悬浮培养物中野罂粟碱的含量为0．0235mg/g DW，黑龙辛甲醚的含量为0．022mg/g DW。     

中药（复方）成分提取动力学数学模型的建立及对六味地黄汤梓醇的验证试验

目的建立封闭体系中药复方成分溶出动力学数学模型，并对六味地黄汤中有效成分梓醇的提取动力学参数进行研究与分析。方法将数学建模方法应用于中药提取过程的研究中，根据提取原理、Fick定律建立中药提取过程的数学模型，对数学模型进行拟合和参数分析。可求得函数表达式，运用该模型研究六味地黄汤中梓醇的动力学参数。结果建立了包舍三项e的指数形式的成分溶出浓度解析厦各参数分析方法。结论封闭可溶中药复方扩散体系的成分溶出符合线性动力学数学模型，各参数可根据溶出浓度表达式关系计算得到。