兔抗MAGE-n血清的制备、纯化及鉴定

目的: 制备高效价、特异性的兔抗人MAGE-n血清。方法: 对原核表达的MAGE-n蛋白进行纯化, 与弗氏佐剂混合免疫新西兰兔制备抗血清, 用硫酸铵盐析法及溴化氰活化的Sephrose4B(CNBr-ActivatedSephrose4B)亲和层析柱纯化抗血清, 以双向免疫扩散实验、ELISA、Westernblot和免疫组化对兔抗人MAGE-n血清进行鉴定。结果: 经免疫得到高效价的兔抗人MAGE-n血清, 抗血清能够与MAGE-n特异性结合, 免疫组化结果表明MAGE-n是一种胞质蛋白。结论: 用MAGE-n蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔, 制备得到高效价的抗血清, 纯化后的特异性兔抗人MAGE-n血清, 为进一步研究MAGE-n在各种组织中的表达奠定了基础。     

HOXB7 siRNA表达载体在裸鼠体内对人恶性黑色素瘤细胞株的影响

目的 探讨转染同源盒第7基因(HOXB7)siRNA质粒表达载体对人恶性黑色素瘤细胞株A375在裸鼠体内生长的影响.方法 裸鼠皮下接种人恶性黑色素瘤A375细胞,对2周后形成的瘤块进行分组干预.随机分为生理盐水对照组、阴性质粒组、HOXB7质粒组,观察转染后各组裸鼠移植瘤的生长情况;免疫组化法比较瘤体内微血管密度(MVD).结果 HOXB7质粒组的裸鼠移植瘤块生长慢、体积明显小于生理盐水对照组[(0.134±0.039)cm3比(1.006±0.235)cm3,P＜0.05],而阴性质粒组瘤块体积大小与生理盐水对照组无统计学差异[(0.929±0.157)cm3比(1.006±0.235)cm3,P＞0.05].HOXB7质粒组裸鼠体内肿瘤MVD低于生理盐水对照组[(2.8±1.9)比(19.9±5.6),P＜0.05],阴性质粒组与生理盐水对照组无统计学差异[(18.1±5.5)比(19.9±5.6),P＞0.05].结论 针对HOXB7 siRNA质粒表达载体可有效抑制A375细胞裸鼠体内肿瘤生长和瘤内血管生成.     

Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶在癌细胞系中的表达及其与明胶酶A活？…

目的 探讨Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶在人肿瘤细胞系中的表达情况及其与明胶酶的分泌和活化的关系。方法 运用逆转录巢式ＰＣＲ,ＲＮＡ印迹分析和蛋白质印迹分析的方法,检测ＭＴ１－ＭＭＰ,ｍＲＮ和ＭＭＰ２蛋白在４个黑色素瘤,２个肺癌和２个前列腺癌细胞系中的表达水平。结果 ＭＴ１－ＭＭＰｍＲＮＡ在所有癌细胞系中均有表达,但表达水平很不一致;在４个黑色素瘤细胞系中的表达水平明显高于肺癌和前列腺癌细胞系;     

γ射线引起HLA—B8表达缺失黑色素瘤细胞株的克隆研究

用７００ｒａｄγ射线照射ＨＬＡ－Ｂ８＋黑色素瘤细胞，于照射后第３天用抗ＨＬＡ－Ｂ８ＩｇＭ型单抗及补体做免疫选择。存活细胞培养１ｗ后，进行第２次免疫选择。存活细胞继续培养１ｗ，然后用有限稀释法在９６孔平底细胞培养板内进行克隆。从５×１０６个受诱变的细胞中共获得６个细胞克隆，其中１个克隆经流式细胞仪表型分析显示ＨＬＡ－Ｂ８无表达，此细胞的ＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ电泳分析表明ＨＬＡ－Ｂ各亚型基因的总表达量减弱，提示克隆到ＨＬＡ－Ｂ８表达缺失的突变株。本研究方法的建立及此突变株的获得，为进一步制备广谱型黑色素瘤“瘤苗”以及研究ＨＬＡｃｌａｓｓⅠ各亚型分子在肿瘤免疫中的作用提供了有力工具。     

重组腺病毒载体mIL-12治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

目的： 观察重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤的治疗效应.方法： 皮下注射B16黑色素瘤细胞给C57BL/6小鼠建立荷瘤模型.于瘤内注射重组腺病毒载体AdmIL-12治疗, 观察皮下肿瘤的生长及荷瘤小鼠的存活期.采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结果： 重组腺病毒载体AdmIL-12治疗后, 能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长, 明显延长荷瘤小鼠的存活时间, 增强荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结论： 重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤有显著的治疗效应.     

免疫检查点治疗:癌症治疗的新突破

如今癌症已成为全球最为关注的公共卫生难题之一,积极探索癌症新疗法的努力和尝试从未间断过。近年来,免疫治疗正成为癌症治疗领域的新宠,受到越来越多专家的青睐。2016年,91岁高龄的美国前总统卡特成功地通过免疫疗法治愈了黑色素瘤,引起了业界广泛关注。卡特总统使用的便是免疫检查点治疗,也是时下倍受推崇的一种癌症治疗方式。     

色素膜恶性黑色素瘤误漏诊临床分析

色素膜恶性黑色素瘤 ,多发生于 50～ 70岁的老年人 ,临床上比较少见 ,易误诊、漏诊。我院自 1990年 1月至 2 0 0 1年 4月共收治 11例 ,其中 4例误漏诊 ,现总结如下 :1　临床资料1.1　一般情况 :男性 3例 ,女性 1例 ,右眼 2例 ,左眼 2例 ;年龄最大者 59岁 ,最小者 4 4岁 ,平均 52 .5岁。全球内恶性黑色素瘤 1例 ,脉络膜恶性黑色素瘤 2例 ,睫状体黑色素瘤 1例。1.2　眼部表现及初诊情况 :全球内恶性黑色素瘤 1例 ,左眼 ,男 ,4 4岁 ,视力Ｖｏｄ为 5.0 ,Ｖｏｓ无光感 ,左眼疼痛伴同侧头痛剧烈 ,角膜点状浸润混浊 ,虹膜前粘连 ,晶体前纤维渗出 ,…     

直肠恶性黑色素瘤一例报告

<正> 1.病例报告 患者,女,66岁。肛门无痛性肿物10天收入院。患者于10天前自感排便困难,便后有脓血便,即到医院来就诊,考虑为痔,给予对症治疗,但效果不明显.于七天前行钡灌肠造影检查。1·1 结肠气钡双对比造影检查 直肠隆起性病变,直肠末端可见一隆起性病变.边缘光滑.有蒂,大小2.0×1.5cm~2。周围粘膜影无明显改变,肠管扩张良好,壁柔软。1·2 结肠镜检查 距肛门5cm处可见直径1.5cm肿物,表面似有蓝色血管,病理活检为恶性黑色素瘤。患者30年前曾行乳腺癌根治术,     

血管生成因子在咽喉部恶性黑色素瘤的表达及与血管生成的关系

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)、转化生长因子β1 (TGF-β1 )及其受体和肿瘤源性粘附因子 (TAF)在咽喉部恶性黑色素瘤中的表达特点 ,以及它们与肿瘤内微血管密度(MVD)和病人预后的关系。　方法　应用免疫组织化学和形态计量方法检测 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤 MVD、VEGF、b FGF、TGF- β1 及其受体和 TAF的表达 ,并应用多因素 Cox比例风险模型检测上述因素和病人预后的关系。　结果　 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤中 ,VEGF阳性 19例 (6 7.9% ) ,b FGF阳性 2 1例 (75 .5 % ) ,TGF- β1 阳性 16例 (5 7.1% ) ,TAF阳性 18例 (6 4.3% )。血管生成因子与其受体表达具有一致性 ,并与 MVD值显著相关。Cox模型分析显示 MVD和 VEGF是影响咽喉部恶性黑色素瘤的重要因素 (P<0 .0 5 )。　结论　 VEGF、b FGF、TGF- β1 和TAF是咽喉部恶性黑色素瘤中血管生成的重要因子 ,并通过促进血管生成影响病人的预后。其中 MVD和 VEGF是评估咽喉部恶性黑色素瘤病人预后的重要指标。     

从手术切缘变化看预防恶性黑色素瘤不良预后理念的改变

扩大切除是目前早期皮肤恶性黑色素瘤的一线治疗方案。为预防肿瘤复发, 扩大切除范围经历了从经验切除到基于病理精准检测确定安全距离, 从以切净肿瘤为目标到把肿瘤预后作为治疗评判参数的演变。未来恶性黑色素瘤切除范围的确定需将循证医学证据与个体特性相结合以预防不良结局。