高密度cDNA微阵列技术检测乳腺癌差异表达基因

目的 描绘乳腺癌的基因差异表达谱，以寻找乳腺癌新的肿瘤相关候选基因和分子标志。方法 用含14000个cDNA克隆的表达微阵列检测乳腺癌组织、乳腺癌旁组织及乳腺非癌组织的mRNA表达，并分析其表达的差异。结果 乳腺癌组织与乳腺非癌组织比较有80个差异表达基因，乳腺癌组织与乳腺癌旁组织比较有57个差异表达基因，乳腺癌旁组织与乳腺非癌组织比较有29个差异表达基因，在乳腺癌组织与乳腺非癌组织和乳腺癌旁组织比较中有14个差异表达基因是一致的。结论 用微阵列技术对乳腺癌的肿瘤相关基因和分子标志作初步探索，为了解中国女性乳腺癌发生发展的分子机制、发展新的诊断和治疗手段提供了信息。     

表达端粒酶逆转录酶siRNA的溶瘤腺病毒对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用

Objective To investigate the antitumor effect of oncolytic adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene for renal cancer therapy. Methods Nude mice were divid-ed randomly into 4 groups (8 mice/group),and were treated by intratumoral injections of ZD55-hTERT ( an oncolytic adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene) ,ZD55-EGFP ( an on-colytic adenovirus) and Ad-hTERT (replication-defective adenovirus armed with small interference RNA targeting hTERT gene) with three consecutive daily at 7 × 108 pfu/day or treated with PBS as a control. The expression of E1A and hTERT, and apoptosis of tumor xenografts were assessed by immunohistochemi-cal technique at the 7th day after injections. The tumor volume was measured at the 50th day after injec-tions. Results The tumor volume in ZD55-hTERT treatment group ( 124.1±27.5) was significantly less than that in ZD-EGFP (499.8±77.1 ) and Ad-hTERT ( 609.0±102.5 ) treatment groups. The E 1A pos-itive expression in ZD55-hTERT treatment group was significantly higher than that in Ad-hTERT treatment group. The hTERT positive expression in ZD55-hTERT treatment group was significantly lower than that in Ad-hTERT treatment group. ZD55-hTERT treatment of tumor xenografts resulted in an increased apoptotie cell death as compared with ZD55-EGFP and Ad-hTERT treatment. Conclusion The antitumor effect of ZD55-hTERT was more potent than oneolytie adenovirus ZD55-EGFP and Ad-hTERT.     

东部马脑炎病毒E2基因与GM-CSF共表达质粒的构建及其免疫原性初步研究

目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4 /CD8 淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价.     

针刺抗衰老机制研究进展

近年来，人们对针刺抗衰老机制作了大量研究，特别在研究抗自由基损伤、调节机体免疫、调节神经内分泌功能、调节衰老相关基因的表达等方面取得了较大进展。本文就1995年以来针刺抗衰老相关机制研究加以整理，综述如下。     

冠心病与肿瘤坏死因子β基因多态性的相关性初步研究

目的研究肿瘤坏死因子-β(TNF-β)基因多态性与冠心病的关系.方法聚合酶链反应扩增TNF-β第1内含子含有1069位核苷酸A→G多态位点的基因片段,NcoI内切酶进行限制性酶切反应.结果 63例冠心病患者及103例正常对照TNF-β基因型及等位基因频率均无显著性差异.结论 TNF-β基因多态性与冠心病无关联.     

NOV蛋白免疫反应阳性神经元在鲢、鸡和几种哺乳动物脑的比较发育

目的：研究鲢、鸡、牛、犬和大鼠脑肾母细胞瘤过度表达基因（ｎｏｖ）蛋白免疫反应阳性神经元的比较发育。方法：免疫组织化学技术。结果：低等脊椎动物鲢脑仅有少量ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元，分布于延髓的一些核团、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元除广泛分布于脑干外，小脑、间脑和大脑纹状体的多数脑区阳性神经元亦较多。哺乳动物牛、犬和大鼠脑ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元广泛分布，脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。结论：ｎｏｖ基因在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中非常保守，提示它在脑神经元生长、分化及正常生理功能中可能具有重要作用     

CLONING AND CHARACTERIZATION OF A METAL RESPONSIVE ELEMENT-CONTAINING FRAGMENT FROM THE WILSON DISEASE GENE LOCUS BY JUNCTION TRAPPING

All mammalian metallothionaln genes studied to dare have several metal responsive elements (MRE) with consensus sequences of TGCRCNC (R, purlne) in their regulatory region. MRE-11ke sequeaees were also found in many other metal-related genes. To see whether there is also such a sequence at the genetic locus (13q14. 3) d Wilstm disease, which is a genetic disorder d copper metabolisa‘‘n, junction-trapping method baaed on the MRE sequence was used. A fragment containing MRE and MRE-like sequences from YAC 27D8 at the WND locus was successfully cloned and mapped back to the YAC by PC, R, Presence of such a sequence in the copper transporter gene at the W‘‘D locus might imply that it has a possible interesting role in the regulation of WD gene expression.     

结核病患者血清结核菌基因检测结果分析

自1989年法国学者Hance。等首次报道用聚合酶链反应（PCR）检测结核杆菌以来，PCR技术已广泛应用于结核病的诊断。作者将一年来在住院期间完成了血清和其它临床标本结核杆菌基因聚合酶链反应（下简称TB－DNA－PCR检测的物例结核病患者，以及5例乙型肝炎患者血清TB－DNA－PCR检测结果进行分析，旨在评价结核病患者血清TB－NDA－PCR检测的临床应用价值。1临床资料1．l一般资料：46例患者均经过病史、临床表现、体征、胸部X线检查、细菌学检查或治疗后诊断为结核病。其中肺结核31例，结核性脑膜炎7例，结核性脑膜炎5例，结核性腹…     

遗传性多指（趾）畸形及相关基因研究进展

先天性肢异常是人群中较为常见的遗传缺陷，而多指畸形是最常见的先天手畸形。本综述了多指畸形的分类及遗传特点，总结了脊椎动物中肢发育相关基因的研究现状，以及人类多指畸形相关基因的研究进展，并对其研究意义及前景作了展望。     

多药耐药基因在淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤中的表达及临床意义

本文应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）技术检测急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）２０例，慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）８例，多发性骨髓瘤（ＭＭ）１７例等肿瘤细胞多药耐药（ＭＤＲ１）基因的表达，其中初治２８例，难治复发６例，完全缓解（ＣＲ）１１例。发现ＭＤＲ１基因在ＡＬＬ、ＣＬＬ及ＭＭ中表达阳性率分别为３５．７％，８３．３％及９％。难治复发组明显高于初治及ＣＲ组，三者比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。初治ＭＤＲ１基因阴性表达组ＣＲ率（９４．４％）显著低于ＭＤＲ１基因阳性表达组（３０％）（Ｐ＜０．０１）。其结果表明：①淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤细胞中ＭＤＲ１发生有原发性和继发性两种形式，其中ＭＭ发生率较低。②淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤患者ＭＤＲ１基因表达与肿瘤细胞多药耐药性密切相关，可为临床合理制定化疗方案提供有用的依据。