人群TLR基因多态性与间日疟原虫感染的相关性

目的　比较间日疟原虫感染人群的Toll样受体（Toll-like receptor, TLR）5、TLR9基因3个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）位点差异,探讨其与间日疟原虫不同感染类型的相关性。方法　收集中缅边境地区（云南省盈江县和缅甸拉咱市）2017—2019年间日疟原虫感染者202例及健康对照者104例,将上述研究对象分为无症状感染组、有症状感染组及健康对照组,其中无症状感染组与有症状感染组统称为感染组;采用飞行时间质谱分型技术检测以上研究对象TLR5、TLR9基因3个SNP位点,分析不同组之间TLR5、TLR9基因SNP位点等位基因和基因型的分布差异。结果　3组研究对象之间性别与年龄分布差异均无统计学意义（P均＞0.05）;3组之间TLR9 1486C/T位点、TLR9 G1174A位点和TLR5 R392Stop位点的等位基因分布差异均无统计学意义（P均＞0.05）;健康对照组与感染组间及健康对照组与无症状感染组间TLR9 1486C/T位点的AG基因型分布差异均有显著性统计学意义（P均＜0.05）;3组之间TLR9 G1174A位点、TLR5 R392Stop位点的基因型分布差异均无统计学意义（P均＞0.05）。结论　TLR9 1486C/T位点的基因型多态性与间日疟原虫感染相关,但尚未发现TLR9 G1174A位点、TLR5 R392Stop位点与间日疟原虫感染的相关性,本研究结果可为揭示宿主基因多态性对间日疟原虫感染的影响提供重要线索。     

2012年和2018年我国输入性恶性疟原虫氯喹抗性基因多态性分析

目的对2012年和2018年我国输入性恶性疟原虫样本氯喹抗性分子标记位点基因多态性进行检测,分析恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因(Plasmodium falciparum chloroquine re sistant transporter,Pfcrt)第72~76位密码子抗性相关位点突变类型,并分析不同输入来源样本的特异性。方法收集2012年和2018年国家疟疾诊断参比实验室674例输入性恶性疟病例滤纸血样本,以样本中恶性疟原虫7号染色体上Pfcrt基因第72~76位点为扩增片段,采用巢式PCR法进行扩增并测序,对目的产物片段测序结果、地理分布等特征进行统计分析。结果2012年和2018年我国674例输入性恶性疟病例中,95.5%(644/674)来自非洲,其余4.5%(30/674)来自东南亚和大洋洲(巴布亚新几内亚);非洲又以西非和中非为主(占非洲样本的80.4%,518/644)。共检测到C72S、M74I、N75E、K76T 4个位点突变和5种单体型类型(CVMNK、CVIET、SVMNT和两种混合型),其中CVMNK与CVIET为非洲和东南亚地区恶性疟原虫共有的单体型类型,SVMNT仅在东南亚(缅甸)和巴布亚新几内亚输入样本中检测出;2种混合型为CVMNK/CVIET和CVMNK/SVMNT,前者在非洲和东南亚输入样本中分布,后者仅在东南亚缅甸来源样本中检出。自非洲输入的样本野生型较多,占77.7%(478/615);而自东南亚和巴布亚新几内亚输入的样本中,抗性分子标记样本占68.0%(17/25),两者差异有统计学意义(χ^2=28.5,P<0.05)。非洲不同地区来源样本中,抗性基因比例和野生型构成差异有统计学意义(P<0.01),西非野生型所占比例最低。结论2012年和2018年我国674例输入性恶性疟病例样本中,自东南亚输入的恶性疟原虫Pfcrt基因第72~76位点抗性基因比例和分子多态性均较非洲来源样本高。     

疫苗候选抗原Pvs48/45在中缅边境的遗传多样性特点

目的 了解间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48/45在中缅边境地区的基因多态性和自然选择特点。方法 提取39例来自中缅边境主要流行区(Laiza)的间日疟原虫基因组DNA,采用巢式PCR(nest-PCR)扩增Pvs48/45基因开放阅读区(Open reading frame, ORF);通过MEGA 4.0、DnaSP v5.10和NETWORK 4.6对Pvs48/45基因多态性和自然选择特点进行分析。结果 研究发现了6个突变位点,均为非同义突变(E35K ,H211N ,K250N ,D335Y,A376T,K418R),导致了5种单倍型;Pvs48/45基因的核苷酸多态性水平极低(π=0.00064),CRDⅢ区最高(π=0.00163);多种中性检验均表明Pvs48/45基因处于平衡选择;种群进化分析和单倍型网络图显示Pvs48/45具有较强的地理分化,且H2型为中缅边境地区频率最高的单倍型。结论 Pvs48/45在中缅边境地区遗传多样性很低,且在进化过程中经历平衡选择,提示其可作为传播阻断疫苗候选靶点;Pvs48/45在全球具有较强的地理分化,应根据地区遗传特点开发更加有效的传播阻断疫苗。     

疟原虫环子孢子蛋白的研究进展

环子孢子蛋白(circumsporzoite protein,CSP)是疟原虫成熟子孢子表面的锚定蛋白,约含400个氨基酸,由N端保守I区、种属特异性的中央重复区和C端保守Ⅱ区构成。CSP在疟原虫的迁移、靶细胞入侵和增殖过程中发挥重要作用。近年研究显示,CSP在疟疾疫苗和靶向给药系统中具有良好的应用前景。本文对疟原虫CSP的结构特征、功能及其应用前景作一综述。     

疟疾

疟疾(Malaria)经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病。临床以周期性寒战、发热、头痛、出汗和贫血、脾肿大为特征。儿童发病率高,大都于夏秋季节流行。寄生于人体的疟原虫有4种:间日疟原虫(P.lasmodium)、恶性疟原虫(P.falciparum)、三日疟原虫(P.malarial)和卵形疟原虫(P.ovale)。我国以     

应用密切值法综合评价疟原虫血片质量

在疟原虫血片制作、 染色和清洁度3个单指标评价基础上, 利用密切值法对连云港市8个县 （区） 16个镜检站的血片质量进行了综合评价。结果显示, 连云港市各镜检站血片质量较高。密切值法原理简单、 评价结果合理、 易于操作, 具有一定的适用性。     

中缅边境恶性疟原虫pfmdr1基因多态性及pfmsp1等位基因分型研究

目的 分析中缅边境恶性疟原虫多抗药基因1(riamoaium Jaicipparum mumarug resustance1,pfmdr1)基因编码蛋白86位点多态性及裂殖子表面蛋白1(P.falciparum merozoite surface protein 1 gene,pfmsp1)等位基因的分型特征.方法 采用chelex-100法提取DNA,PCR扩增pfmdr1基因编码蛋白86位点及pfmsp1基因第2区与第3区部分片段,并对其进行DNA测序,对扩增片段基因的结构、同源性进行分析.结果 检测的50份血样中,49份成功扩增pfmdr1基因,49份在第25位氨基酸均发生缺失,且在第27～29位氨基酸由STA都突变为EYR,9份在第35位氨基酸缺失,第86位氨基酸均未发生点突变.50份恶性疟患者样本中有49份共扩增出72个pfmsp1基因片段,以MAD20型为主导型占93.88％,K1、RO33型为次之,并存在不同基因株混合感染现象.结论 中缅边境恶性疟原虫株pfmdr1基因第86位氨基酸点无突变,pfmsp1存在MAD20型、K1型和RO33型3种等位基因型,以MAD20型为优势虫株.     

江苏省2010年输人性恶性疟病例分析

目的 通过对江苏省2010年输入性恶性疟病例的个案分析,研究其发病和流行特征,为进一步做好全省输入性恶性疟防控工作提供依据.方法 对江苏省网络直报的恶性疟疫情和流行病学调查资料进行分析.结果 2010年江苏省报告输入性恶性疟病例207例,比2009年(101例)上升104.95％.输入性恶性疟病例主要分布于出国务工人员较集中的苏中和苏北地区,扬州、泰州、南通和淮安4市共报告输入性恶性疟病例为109例,占全部病例的52.66％.207例输入性恶性疟病例均为从非洲或东南亚等疟疾高度流行区的回归人员.207例患者中21例为临床诊断病例,占10.14％,186例为发热患者血片镜检疟原虫阳性,占89.86％;207例患者中初发病例125例,占60.39％,再燃病例82例,占39.61％.结论 江苏省输入性恶性疟日趋增多,应加强重点地区劳务输出归国人员的疟疾防治管理工作.     

NK细胞在TLR9激动剂CpG抑制肝期约氏疟原虫发育中的作用

目的探讨NK细胞在TLR9激动剂CpG抑制肝期约氏疟原虫发育中的作用。方法小鼠尾静脉注射NK细胞拮抗剂Anti-Asialo-GM1 40μg后48h给予1 000个约氏疟原虫BY265株子孢子攻击,采用Real-time PCR检测肝脏虫荷并血检疟原虫,分析CpG在NK细胞阻断小鼠中对肝期约氏疟原虫发育的影响。结果 NK细胞阻断后GM1+CpG组小鼠肝脏虫荷与CpG组相比显著增加(t=3.539,P<0.01),与PBS对照组相比显著降低(t=3.658,P<0.01);GM1组与PBS对照组比较差异无统计学意义(t=1.768,P>0.05)。CpG组未出现原虫血症,GM1+CpG组出现原虫血症,但出现时间和PBS对照组相比推迟且原虫血症的峰值降低,小鼠逐渐自愈。PBS组和GM1组小鼠从感染第13d开始出现死亡,第15d全部死亡。结论 NK细胞参与对肝期疟原虫的杀伤过程,TLR9激动剂CpG依赖NK细胞杀伤肝期疟原虫。     

Parasight—F试剂盒快速诊断云南恶性疟

评价Ｐａｒａｓｉｇｈｔ－Ｆ试剂盒快速诊断云南恶性疟的现场应用价值。用Ｐａｒａｓｉｇｈｔ－Ｆ试剂盒检测１８７例疑似恶性疟病人血样，与镜检法进行比较。检出恶性疟（包括４例混合感染）敏感度和特异度分别为８７．５％和９８．７％；其敏感度与原虫密度呈正相关（趋势卡方Ｘ＾２＝３４．５４，Ｐ〈０．０１）；检测１０例间日疟患者血样无交叉反应。培训每个卫生技术人员，可在３０ｍｉｎ内学会。度剂盒在常温下保存一年以上仍