醛固酮-WNK4途径参与盐负荷对上皮钠通道的调节

目的 通过建立生理条件下的盐负荷饮食大鼠模型,观察醛固酮和WNK4在水盐代谢调节中的作用。 方法 将SD大鼠分为5组：高盐组（H,4% NaCl）、正常盐组（N,0.4% NaCl）、低盐组（L,0.07% NaCl）、高盐加醛固酮组（H+A,4% NaCl+1 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1醛固酮）、低盐加螺内酯（L+S,0.07% NaCl+0.1 g&#8226;kg-1&#8226;d-1螺内酯）,所有大鼠自由饮水,喂养2周。用放射免疫法检测血浆醛固酮的变化。应用实时定量PCR和Western印迹法检测大鼠肾脏上皮钠通道γ亚基（γENaC）、WNK4的mRNA和蛋白的变化。 结果 H组大鼠血浆醛固酮水平低于N组（P < 0.05）,H+A组高于H组（P < 0.05）;L组大鼠血浆醛固酮水平高于N组（P < 0.05）,显示SD大鼠造模成功。L组大鼠肾脏γENaC蛋白表达高于N组,但是L+S低于L组;同时H组低于N组,H+A组高于H组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA变化趋势和蛋白变化趋势一致。H组肾脏WNK4的蛋白表达高于N组,但是H+A组低于H组;同时L组低于N组,L+S组高于L组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA的变化趋势和蛋白的变化趋势一致。 结论 饮食中的盐可以调节γENaC在肾脏的蛋白表达,醛固酮和WNK4都参与了机体对盐的调节,WNK4受到醛固酮的负调节作用。     

原发性醛固酮增多症患者钙磷代谢情况及其与成纤维生长因子23相关性分析

目的比较原发性醛固酮增多症(PA)和原发性高血压(EH)患者钙磷代谢和成纤维生长因子23(FGF23)水平的差异,探讨二者的相关性。方法选择因高血压查因住院确诊的资料完整的病例,按性别、年龄、高血压水平及其病程等匹配原则纳入123例PA患者和123例EH患者,比较两组患者的钙磷代谢指标的差异并分析其与FGF23的关系。结果 (1)PA组的FGF23、PTH水平高于EH组,分别是271.31 pg/m L(173.91,504.34)vs 160.41 pg/m L(118.08,235.60)和74.5 pg/m L(46.5,91.0)vs.43.60 pg/m L(33.75,60.25),其差异具有统计学意义(P0.001),但血钙、血磷水平低于EH组(2.18±0.17 mmol/L vs.2.33±0.17 mmol/L和1.013±0.204 mmol/L vs.1.127±0.190 mmol/L,P0.001)。(2)PA组中FGF23与与血磷水平呈负相关(r=-0.502,P=0.001),与PTH水平呈正相关(r=0.349,P=0.030)。(3)PA组中随着醛固酮水平的递增,FGF23呈上升趋势(P0.05)。结论 PA患者FGF23水平显著上升,FGF23水平与血磷和PTH水平相关,且FGF23与高醛固酮水平相关。     

ALL患儿肿瘤细胞的门冬酰胺合成酶活性研究

目的：不同类型急性淋巴细胞性白血病(ALL)对左旋门冬酰胺酶(LAsp)敏感度不完全相同,由于LAsp活性水平与细胞内门冬酰胺合成酶活性负相关,因此研究不同类型ALL患儿白血病细胞内门冬酰胺合成酶活性水平分布情况,有助于临床治疗中合理使用LAsp。方法：通过HPLCFLD及蛋白定量等技术,检测28例ALL患儿(免疫酶型TALL7例,B细胞系列ALL21例)白血病细胞内门冬酰胺合成酶活性水平。结果：TALL患儿肿瘤细胞内AS活性水平较B细胞系列ALL患儿的显著增高(P<0.05),其中TALL患儿肿瘤细胞内AS活性中位水平为每小时9.3nMAsn/mgprotein,B细胞系列ALL患儿为每小时5.2nMAsn/mgprotein。但无论是在B细胞系列ALL患儿还是在TALL患儿中,肿瘤细胞内AS活性存在多态性分布。结论：ALL患儿白血病细胞中门冬酰胺合成酶活性存在多态性分布,总体上TALL比B系ALL白血病细胞中门冬酰胺合成酶活性高。     

急性高眼压后大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶mRNA表达的变化

目的观察急性高眼压后大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶（GS）mRNA的表达变化。方法前房灌注加压至110mmHg，维持60min。提取视网膜总RNA，以RT—PCR半定量GSmRNA。结果大鼠前房加压解除后4h，GSmRNA的表达较对照眼开始升高（P〈0．05），至24h达高峰（P〈0．01），36h降低（P〈0．05），72h（P〉0．05）恢复至正常水平。结论急性高眼压后大鼠视网膜GSmRNA的表达呈现明显升高过程，可能引起GS表达上调，促进谷氨酸转化为谷氨酰胺，从而减轻视网膜神经节细胞（RGCs）的损伤。     

糖尿病视网膜病变黄斑囊样水肿与诱导型一氧化氮合成酶G-954C基因多态性

目的:分析中国人诱导型一氧化氮合成酶G-954C等位基因位点的基因表型在糖尿病视网膜病变黄斑囊样水肿患者与正常对照的差异。方法:病例对照,89例糖尿病视网膜病变黄斑囊样水肿的患者与年龄及性别匹配的90例健康对照纳入该项研究。研究采用了巢式聚合酶链式反应、限制性核酸内切酶技术、基因片段的序列测定。主要检测指标为诱导型一氧化氮合成酶G-954C位点的基因表型。结果:89例患者和90例健康对照的诱导型一氧化氮合成酶G-954C位点的基因表型全部检测结果为GG型。结论:诱导型一氧化氮合成酶G-954C位点的基因多态性可能在中国人为较低的变异频率,而且可能与糖尿病视网膜病变黄斑囊样水肿的易感性关系不大。     

旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠食管组织舒缩神经递质的影响

目的:观察旋覆代赭汤及原方倍用甘补组方对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管舒缩神经递质活力的影响。方法:将110只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组和造模组。将造模组大鼠制备成反流性食管炎动物模型后随机分为模型对照组、旋覆代赭汤原方组、原方倍用甘补方组、西药对照组。进而观察食管下段黏膜组织形态学变化及食管组织及血浆ChAT及NOS活力的表达情况。结果:原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织ChAT活力较模型组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);原方组、甘补组及西药组大鼠食管组织NOS活力较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:旋覆代赭汤能够通过影响食管组织及血浆舒缩神经递质合成酶活力,改善食管组织的舒缩功能。     

铁皮石斛蔗糖合成酶活性动态研究

目的:测定不同实验处理、不同生长时期铁皮石斛叶片的蔗糖合成酶活性变化。方法:分别采用激素(6-BA)、特殊光照和常规方法栽培铁皮石斛,在5月、10月及次年1月三个生长时期采集叶片,比色法测定其蔗糖合成酶活性。结果:不同时期采集的铁皮石斛,加以不同处理,庶糖合成酶活性有所不同。结论:人工干预措施对该酶活性有显著影响。     

不同证候小鼠肾上腺皮质激素与细胞因子表达的关系

目的 研究细胞因子在不同证候小鼠肾上腺中的表达及其与血清皮质激素的关系。方法 采用实验小鼠及其标准化四诊及辨证方法,对60只正常小鼠与190只H22肝癌荷瘤小鼠予以辨证分型,用ELISA方法检测血清皮质酮、醛固酮含量,以及实时荧光定量PCR技术检测肾上腺细胞因子表达。结果 获得正常无证、正常气盛证、正常气虚证小鼠,以及邪毒壅盛证、邪毒居中证、邪毒微弱证、邪毒气虚证荷瘤小鼠。荷瘤小鼠血清皮质激素显著高于正常小鼠（P<0.05),荷瘤小鼠4个证候组间,以邪毒壅盛证升高最显著（P<0.05)。相对于正常小鼠而言,白细胞介素（IL)-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12α、IL-12β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α)等细胞因子在荷瘤小鼠不同证候中表达升高,仅IL-1α和IL-5在荷瘤小鼠中表达下降,而IL-13和转化生长因子-β1（TGF-β1)表达呈无规律性。其中IL-4与干扰素-α（INF-α)在正常与荷瘤小鼠肾上腺中均未检测到其表达。值得注意的是,邪毒程度越严重者,皮质酮与醛固酮水平及IL-6表达越高,而IL-1β、IL-2、IL-5、IL-12α、IL-12β、TNF-α表达越低。结论荷瘤小鼠血清皮质激素水平升高可能是在肿瘤慢性应激诱导下,部分细胞因子参与肾上腺皮质激素的合成与分泌,其中IL-6可能正向调控邪毒证荷瘤小鼠皮质激素分泌,而IL-1β、IL-2、IL-5、IL-12α、IL-12β、TNF-α则可能起到负性调控作用。     

原发性高血压伴肥胖患者血浆RAAS激素水平和CYP11B2－344C/T基因多态性的相关性

目的 通过检测原发性高血压伴肥胖患者血浆肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）激素水平和醛固酮合成酶CYP11B2－344C/T基因多态性,探讨原发性高血压伴肥胖患者CYP11B2－344C/T易患基因型以及基因多态性与RAAS的关系。方法 随机选取1～2级原发性高血压患者60例,其中高血压伴肥胖者30例,单纯高血压者30例;同期体检中心体检者60例,其中单纯肥胖者30例,健康者30例。采用PCR-RFLP和琼脂糖凝胶电泳等方法检测CYP11B2－344C/T基因多态性,用放射免疫法检测血浆RAAS水平。结果 TT基因型例数与TC+CC基因型例数进行多重比较,有显著差异（P<0.05）,其中以原发性高血压伴肥胖组差异最为显著;T与C等位基因例数进行多重比较,有显著差异（P<0.05）,其中以原发性高血压伴肥胖组差异最为明显。按基因型分组统计分析各组血浆肾素、血管紧张素Ⅱ及醛固酮水平,TT基因型组显著高于TC、CC基因型组（P<0.05）。结论 原发性高血压伴肥胖患者CYP11B2－344C/T基因型以TT基因型为主,等位基因以T等位基因为主。TT基因型血浆RAAS激素水平各组份比TC、CC基因型显著升高,TT基因型可能为原发性高血压伴肥胖患者易感基因型。     

原发性醛固酮增多症的定位诊断与手术径路选择的初步研究——附10例报告

收治10例原发性醛固酮增多症。所有病例术前均经B超、CT扫描、血管造影及取肾上腺静脉血测醛固酮浓度4种定位方法检查。CT扫描和取肾上腺静脉血样分别获得75％和71.4％的肾上腺腺瘤诊断准确率。综合上述4种方法,7侧术前做出腺瘤定位诊断,其中5例获得术中和病理组织学证实,定位准确率为71.4％。并对手术入路的选择进行讨论,单侧腰切口仍然不能代替经腹切口。