丹参防治顺铂肝毒性的实验研究

<正>顺铂广泛用于治疗各种实体瘤,但由于其在肝脏蓄积,且肝脏对顺铂敏感性高~[1],高剂量给药或低剂量重复给药,患者肝毒性频发。氧化应激与顺铂所致肝脏病理损伤有密切关联~[2]。而丹参具有抗氧化,清除脂质过氧化物的功效~[3]。因此,本课题旨在研究丹参对顺铂给药小鼠肝功能的影响,并探讨其作用机制。1材料1.1实验动物SPF级♂ICR小鼠,体质量20 g~23 g,购     

Nlrp3敲减对cuprizone诱导的脱髓鞘小鼠焦虑症状的影响

目的:探讨NOD样受体家族pyrin域3(Nod like receptor family pyrin domain containing 3,Nlrp3)对脱髓鞘损伤致小鼠焦虑情绪的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠分为对照组、双环己酮草酰二腙(CPZ)模型组、CPZ+Nlrp3 shiNA组和Nlrp3 shRNA组;将对照或Nlrp3 shRNA慢病毒分别立体定位注射至小鼠胼胝体。1周后,小鼠喂食CPZ并测量喂食期间小鼠体质量;开场实验检测小鼠活动区域与距离,LFB-PAS染色观察脱髓鞘程度。结果:CPZ喂食2周内,小鼠平均体质量急剧下降;到5周时,CPZ模型组平均体质量显著低于对照组与CPZ+Nlrp3 shRNA组。行为学检测显示,对照组和CPZ+Nlrp3 shRNA组小鼠后肢站立次数较CPZ模型组明显减少,而中央区域活动距离与活动总距离的比值CPZ模型组显著增加。LFBPAS染色显示CPZ模型组胼胝体膝部髓鞘几乎完全缺失,其髓鞘化评分显著低于正常和CPZ+Nlpr3shRNA组。结论:Nlrp3敲减可缓解CPZ诱导的小鼠髓鞘脱失,并改善其焦虑症状。     

以PNP酶为靶点的急性高尿酸血症小鼠模型组建

目的建立一种新的急性高尿酸血症小鼠模型并利用该模型对PNP酶抑制剂Ulodesine进行体内药效作用评价。方法小鼠腹腔注射肌苷(inosine)和皮下注射氧嗪酸钾(oteracil potassium)诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行内眦静脉或摘眼球采血,测定血清尿酸值,判断小鼠急性高尿酸血症模型成功与否;再利用酶动力学分析Ulodesine对PNP酶的体外抑制作用,并于造模前给予小鼠灌胃Ulodesine,造模后测定血清尿酸值,评价Ulodesine的降血尿酸作用。结果小鼠腹腔注射200 mg·kg~(-1)肌苷联合皮下注射200 mg·kg~(-1)氧嗪酸钾在1.5 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;酶动力学测定结果显示Ulodesine对PNP酶有极强的抑制作用,其IC_(50)值为2.293 nmol·L~(-1);另外,Ulodesine的体内药效表明,Ulodesine能够明显减低急性高尿酸血症小鼠体内尿酸水平。结论我们已经成功地建立了一种新的急性高尿酸血症小鼠模型,该造模制作方法更简单有效,且该模型可以应用于验证PNP酶抑制剂。     

心肌特异性microRNA修饰型CVB3病毒诱导小鼠免疫保护作用的研究

利用基因组中含肌肉特异性miRNA互补序列的修饰型CVB3病毒感染小鼠,研究修饰型病毒在小鼠体内的复制状况以及诱导小鼠免疫保护作用的能力。前期我们在CVB3m株病毒基因组中插入miRNA-133和miRNA-206的互补序列获得修饰型CVB3病毒,命名为CVB-3*T。以对照组(CVB-CON)和紫外灭活野生型CVB3m株病毒组(UV-CVB3-WT)作为对照,测定各组病毒对小鼠的LD50剂量、CVB-3*T对小鼠的致死率、感染小鼠心脏和胰腺的病毒滴度以及心脏病理损伤情况,并检测小鼠血清中炎性细胞因子及中和抗体表达水平以及免疫后小鼠抗病毒能力。结果显示,CVB-3*T对小鼠的LD50明显高于对照组;以相同剂量病毒感染小鼠,CVB-3*T可以明显改善小鼠的生存率,心肌部位的病毒量较对照组明显降低,心肌处病理损伤减轻,而胰腺部位的病毒滴度无明显改变;CVB-3*T组小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的含量较UV-CVB3-WT组明显升高,IL-4含量无差异;免疫后,CVB-3*T可诱发机体产生高效价抗CVB3中和抗体,可提高小鼠抵抗病毒再次感染的能力。修饰型CVB3病毒感染可以降低病毒对心肌的亲嗜性,激发小鼠抗病毒免疫,还可以诱导小鼠产生抵抗病毒再次感染的能力。本研究为探索制备CVB3疫苗新途径提供了实验证据。     

桉柠蒎肠溶软胶囊对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的改善作用

目的:研究桉柠蒎肠溶软胶囊对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的改善作用。方法:将60只小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和桉柠蒎肠溶软胶囊低、中、高剂量组(100、300、900 mg/kg),每组12只。给药组小鼠ig相应药物,空白对照组和模型对照组小鼠ig等体积生理盐水(0.1 m L/10 g)。给药2 h后,除空白对照组外,其余各组小鼠均采用LPS雾化吸入的方法诱导ALI模型。造模6 h后,处死小鼠取肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,镜下观察肺组织形态学变化;血细胞计数板计算BALF中总细胞数和瑞氏-吉姆萨染色后计算BALF中中性粒细胞数;二喹啉甲酸法检测BALF上清液中总蛋白浓度;酶联免疫吸附法检测BALF上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠肺组织发生明显病理学损伤,肺水肿严重;BALF中总细胞数、中性粒细胞数和BALF上清液中总蛋白浓度以及TNF-α、IL-6含量均显著增加(P<0.01)。与模型对照组比较,桉柠蒎肠溶软胶囊高剂量组小鼠肺组织病理损伤明显改善,BALF中总细胞数、中性粒细胞数和BALF上清液中总蛋白浓度以及TNF-α、IL-6含量均显著减少(P<0.05);其余各组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量桉柠蒎肠溶软胶囊能明显改善LPS诱导的小鼠ALI。     

归脾颗粒对饮酒小鼠血醇变化的影响

目的观察归脾颗粒对饮酒小鼠血醇质量浓度变化的影响。方法用体积分数56%的白酒或归脾颗粒灌胃小鼠,实验设置了归脾防醉组、防醉对照组、归脾保养组和保养对照组,考察死亡率、血醇质量浓度变化及肝组织病理切片,辅以体质量变化、睡眠情况来评价归脾颗粒对饮酒小鼠的影响。结果归脾颗粒能促进小鼠对酒精的吸收代谢,降低动物死亡率,延长死亡时间,改善醉酒小鼠的睡眠情况,减弱酒精对小鼠正常生长发育的影响。结论归脾颗粒对饮酒小鼠有较好的解酒功效。     

健脾益气法对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的影响研究

目的:观察健脾益气中药对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠白细胞介素(Interleukin,IL)-6和表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)蛋白的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用偶氮氧化甲烷/葡聚糖硫酸钠方法建立结直肠炎相关结直肠癌小鼠模型,治疗组以加减四君子汤颗粒加蒸馏水配成溶液,药物质量浓度19.92%,3.32 g/kg灌胃,模型组以蒸馏水灌胃。4周后处死各组小鼠并留取血液和结直肠组织组织标本,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent method,ELISA)法检测血清IL-6浓度,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin Staining,简称HE染色法)染色镜下观察小鼠结肠组织病理变化,Western-blot法检测EGF蛋白表达。结果:健脾益气治疗组小鼠的体质量较模型组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠血清IL-6表达量比模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠的EGF蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾益气中药能增加结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的体质量,减少炎症因子IL-6的表达和降低EGF蛋白表达,可为健脾益气中药抗结肠癌临床应用提供科学依据。