幽门螺杆菌处理前后HepG2细胞蛋白质双向电泳图谱的差异分析

目的：利用蛋白质组学方法，识别并鉴定幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）处理HepG2细胞后差异表达的蛋白质，为进一步探讨幽门螺杆菌对肝细胞的病理作用机制奠定基础。方法：运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离H．pylori处理前后HepG2细胞的总蛋白质，用图象分析软件比较分析，以识别差异表达的蛋白质；应用质谱仪（mass spectrometry）得到相应的肽质指纹图谱（peptide mass fingerprint，PMF），然后搜索数据库鉴定差异蛋白质。结果：鉴定出12种差异表达蛋白质．这些蛋白质包括整合素β-1、蛋白激酶C—α、PINCH蛋白、Ras相关蛋白Rab-37、LIM同源盒蛋白Lhx1、HLAⅠ类抗原、血管抑制素和金属蛋白酶抑制因子2等。这些差异蛋白质涉及基因表达调控、细胞免疫、细胞生长和信号传导等众多关键事件。结论：H．pylori处理前后HepG2的蛋白质组具有差异，这些差异表达的蛋白质可能参与了H．pylori对肝细胞的病理作用过程，这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝脏疾病的关系。     

STUDY ON RELATIONSHIP BETWEEN CHEMOSENSITIVITY OFBREAST CANCER AND EXPRESSION OF p73α AND p53

Breast cancer is the most common malignancy among women in the western world. Although adjuvant chemotherapy improves survival of breast cancer patients, the occurrence of drug resistance to anticancer agents is one of the main obstacles for successful chemotherapy in breast cancer. Identifying factors predicting the response to chemotherapy would assist the clinician in selecting the right patients for chemotherapy and saving the rest from unnecessary toxicity. p73, as one of the p53 family m…     

人组织中大肠癌负相关基因ST13的蛋白表达研究

目的原核表达大肠癌负相关基因ST13，制备ST13蛋白单克隆抗体，研究人大肠等组织中表达的ST13蛋白的生物学特性。方法将ST13 ORF克隆至GST融合蛋白表达质粒，原核表达并以Glutathione纯化GST—ST13蛋白，以凝血酶切得到ST13蛋白。以GST-ST13融合蛋白免疫小鼠，以ST13蛋白筛选杂交瘤细胞株，按杂交瘤技术制备ST13蛋白单克隆抗体，并以ST13蛋白亲和层析纯化单抗。以该单抗作Western—blot及免疫组化检测临床标本。结果蛋白表达和纯化以SDS-PAGE证实。融合蛋白表达量占大肠杆菌总蛋白20％，每升培养物回收融合蛋白2．5mg，纯度为91．3％。建立了3个ST13蛋白单抗的杂交瘤细胞株，腹水中单抗的ELISA效价达10^4-10^5，并具有对ST13蛋白的高度特异性。Western—blot证实组织细胞中天然ST13蛋白的SDS—PAGE表观分子量约50KD，比其计算分子量大约10KD，但无糖基化修饰。免疫组化表明该蛋白均匀分布于SW480细胞及大肠上皮细胞浆，计算机分析系亲水性分子。免疫组化还表明该蛋白可表达于大肠、胃及肝等多种组织上皮，但在各种正常组织和肿瘤组织之间，正常组织之间，以及肿瘤组织之间的的着色强度不一。结论原核表达了ST13蛋白，制备了相应的单抗，建立了检测组织标本中ST13蛋白的方法。研究表明人组织ST13蛋白系表观分子量50KD的细胞浆可溶性分子，可表达于大肠等多种上皮组织。ST13蛋白在大肠癌组织呈低表达，在多种正常和肿瘤组织中的表达程度不一。cDNA同源性及蛋白质特性比较表明ST13与Hip(hsp70-interacting protein)为同一蛋白质，提示ST13／Hip经Hsp70等分子伴侣途径而在大肠癌发生发展中起作用。     

柴胡皂甙d通过磷酸化p38诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡

目的研究柴胡皂甙d(SSd)抑制视网膜母细胞瘤(Rb)细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法应用~3H-胸腺嘧啶掺入分析法观察SSd对细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析SSd对Y79细胞周期的影响,以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡,用Westem blot分析p38的磷酸化。结果SSd可明显地抑制Y79细胞的生长,10μg/ml SSd处理9h时,~3H-胸腺嘧啶掺入率下降达55．15%,此条件下,SSd可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中,p38被激活,即磷酸化。结论SSd可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由磷酸化的p38介导。     

中医精气学说与蛋白质组学

中医精气学说建立在科学技术不发达的时代，前辈由于时代的限制，对人体的功能作了科学的描述；在科学技术发展的今天，中医学者必须在坚持中医整体思想特色的同时，吸收当今迅猛发展的生命科学技术，进一步发展完善自身，使传统中医学现代化。精是基因组整体功能的集中和综合表现．而气则是蛋白质组的集中和综合表现，吸收当今的生命科学技术的优秀成果是中医学现代化的必然。     

凋亡抑制因子sFas、Bcl-2与Graves病的相关性研究

Graves病（GD）是一种常见的自身免疫性甲状腺病，最近研究发现细胞凋亡及凋亡的调控异常与GD的发生密切相关，甲状腺细胞凋亡的抑制可能是GD甲状腺增生及功能亢进的潜在机制。其中Fas／FasL（Fas配体）凋亡途径及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达异常备受关注。我们探讨血清中凋亡抑制因子sFas、Bcl-2是否与GD发病有关，为明确Graves病的发病机制提供新的依据。     

范可尼贫血蛋白与急性髓系白血病

范可尼贫血(FA)是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病,表现为进行性骨髓衰竭、先天性骨骼畸形和易患癌症等.FA患者细胞染色体自发不稳定,并对DNA交联剂如丝裂霉素C(MMC)高度敏感.因FA常发展成急性髓系白血病(AML),被认为是白血病前状态.目前已发现11种FA基因,通过共同的机制在维持细胞基因组稳定性中发挥作用.FANCF蛋白作为一种灵活的衔接蛋自在FA蛋白复合物正确组装形成过程中发挥着重要作用,它的形成使FANCD2蛋白单一泛素化,泛素化FANCD2蛋白导向染色质与乳腺癌抑制蛋白(BRCA1)相瓦作用,修复DNA损伤.FA基因缺陷将导致基因组不稳、染色体断裂的发生率增高,经过遗传损伤的积累最终导致AML及骨髓增生异常综合征(MDS)的发生.     

表面增强激光解离和激光离子化蛋白芯片技术与二维凝胶电泳质谱技术的比较

人类基因计划组揭开了人类基因框架的面纱,自此,生命科学研究步入了后基因时代,其核心便是蛋白质组研究.蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者.     

通过改造工程细胞提高重组蛋白类药物产量的研究进展

哺乳动物细胞是表达蛋白类生物产品的理想宿主细胞。但是,表达水平常较低。通过对工程细胞进行改造,如抑制细胞凋亡、对细胞周期进行调控、提高翻译后加工能力、改变细胞新陈代谢的特性、实现基因组热点整合等,可有效地提高重组蛋白类药物的产量,为生物药品的规模化生产奠定基础     

长苞凹舌兰提取物对亚急性衰老小鼠学习记忆和凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究长苞凹舌兰提取物(CE)能否改善衰老小鼠的学习记忆能力,及其与神经元凋亡的关系。方法ipD-半乳糖120mg·kg-1·d-1和亚硝酸钠90mg·kg-1·d-1连续60d建立衰老模型,从d47开始igCE2.5,5,10mg·kg-1·d-1,连续14d。跳台实验检测小鼠的学习记忆能力;免疫组化染色测定海马内Bcl-2,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cas-pase-3)和Bax凋亡相关蛋白的阳性细胞数,并用图像分析系统进行灰度扫描。结果CE明显改善衰老小鼠的学习记忆能力,跳台实验的潜伏期明显延长,错误次数显著减少。衰老小鼠脑中Bcl-2阳性神经元减少,caspase-3和Bax阳性神经元增多。CE可抑制这些凋亡相关蛋白的阳性细胞数改变,从而可能阻断凋亡级联反应的发生。结论CE可增强衰老小鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制神经元凋亡有关。