禽流感与人类健康

禽流感（Avian Influenza，AI）是由禽流感病毒引起的一种从呼吸系统到全身性败血症等多种症状的传染性疾病综合征。禽流感病毒在分类地位上与人的流感病毒一样。属于正粘病毒科，A型流感病毒属，单股负链分节段的RNA病毒。根据表面糖蛋白血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的抗原性差异可分为不同的亚型。到目前为止，已经鉴定了16种H亚型（H1-H16）和9种N亚型（N1-Ng）。禽流感病毒根据其对鸡致病性的强弱可分为高致病性和低致病性两种。高致病性禽流感病毒可引起鸡群高达100％的死亡率，故被世界动物卫生组织（OIE）列为A类疾病。低致病性禽流感病毒可引起温和的呼吸道疾病，但在混合感染或环境因素的作用下可引起严重的疾病。近年来H5N1和H9N2等亚型的禽流感病毒感染人的事件，表明家禽是禽流感人畜传播潜在的中间宿主。这也使得世界各国对禽流感的关注程度大大提高。因此，开展对禽流感病毒的研究，从分子水平掌握禽流感病毒的流行规律和致病机理，不仅在病毒学、兽医学等学科上有重要的学术意义，而且在公共卫生等方面也具有重大的社会意义。     

立夫特谷热的实验室早期诊断

立夫特谷热(rift valley fever，RVF)是流行于非洲次撒哈拉地区的急性病毒性人畜共患病，病原体为立夫特谷热病毒(RVFV)，由节肢动物传播。RVFV属于布尼亚病毒科白蛉病毒属，基因组为单股负链RNA，由大(L)、中(M)、小(S)3个节段构成，每个节段包裹在单独的核衣壳中。L节段编码L蛋白即病毒RNA聚合酶；M节段编码包膜糖蛋白G1和G2及两个非结构蛋白；S节段则利用双义链策略编码N和NSs蛋白。     

性激素放射免疫分析在食管、贲门癌疾病的应用

人促性腺激素PRL、FSH、LH都是由垂体前叶的嗜碱性细胞所分泌。FSH、LH均为糖蛋白，分子量分别为28000和35000，由α-亚基和β-亚基所组成。故性激素水平测定可以了解丘脑下部和神经内分泌的功能。E2是雌激素的主要成分，在人体卵巢、肾上腺、胎儿-胎盘单位内产生，在肝脏内灭活和代谢。     

抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

目的：研制抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa Fab抗体。方法：通过问接免疫荧光试验和血小板聚集抑制试验，选取鼠源抗血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa单克隆抗体(mAb P140)。从分泌该mAb的杂交瘤细胞株(P140)中，克隆到抗体轻链基因和重链Fd段基因，构建原核表达重组质粒p3MH／P140x-Fd，并在XLI-Blu菌株中进行表达。采用钴亲和层析法对P140 Fab抗体进行纯化，用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法，对P140 Fab抗体进行检测，并通过血小板聚集抑制试验，观察P140 Fab抗体的抗栓活性。结果：SDS-PAGE和Western blot表明，纯化的P140Fab抗体的相对分子质量(Mr)约为47000。ELISA的结果显示，P140 Fab抗体可与人血小板特异性结合。在体外ADP诱导的血小板聚集试验中，P140 Fab抗体对血小板聚集的抑制作用成剂量依赖性，IC50的平均值为16．85mg/L。结论：成功地研制出具有抗栓活性的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的Fab抗体。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的构建及细胞免疫学研究

目的：构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白BDNA疫苗，检测其诱导机体产生的细胞免疫应答。方法：PCR扩增编码HSV-Ⅰ gB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片段(2673bp)，定向插入pcDNA3载体中，构建pcDNA3-gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定。于BALB／c小鼠注射免疫3次，观察小鼠CD4^ 、CD8^ T细胞亚群的变化，CFSE／PI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果：双酶切分析结果为目的基因(2．7kb)和线性质粒pcDNA3(5．4kb)；PCR扩增结果为特异产物(2．7kb)；测序结果与GenBank gB基因序列同源性达99．5％；CTL，活性增强；BALB／c小鼠脾CD4^ T细胞增加。结论：经鉴定证实了HSV-Ⅰ gB基因疫苗的构建；HSV-Ⅰ gB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答，应用于预防HSV-Ⅰ的感染具有良好的前景。     

P糖蛋白和谷胱甘肽—S—转移酶在肾细胞癌中的表达

探讨肾细胞癌与多药耐药的关系，方法：应用免疫组化方法，检测４例术前未进行化疗的肾细胞癌和１６例正常肾组织中的Ｐ糖蛋白和谷胱甘肽－２转移－π表达。结果：Ｐ－ａｇ和ＧＳＴ－π外地１６例正常肾组织中的表达率均匀１００％，在４４例肾细胞癌组织中分别为６３．６５和５４．５％Ｐｇ，Ｐ－ｇｐ和／或ＧＳＴ－π阳性表达率为７９．５％。     

人绒毛膜促性腺激素(HCG)的合成与降解

人绒毛膜促性腺激素 (humanchorionicgonadotropin ,HCG)是妊娠时正常胎盘滋养层细胞产生的一种激素糖蛋白。它还可由葡萄胎和绒毛膜癌 (滋养层细胞病 )以及生殖细胞肿瘤 (睾丸绒毛膜癌、胎盘位肿瘤和卵巢生殖细胞肿瘤 )和其他恶性肿瘤产生。少量的HCG还可由垂体腺产生。HCG由两个亚基α、β组成。它们通过离子键和疏水键结合在一起。α亚基是 92个氨基酸的糖肽 ,在 5 2和 78号残基上带有天冬酰胺链接 (N端连接 )的半糖 ,它靠 5个二硫键稳定。α亚基的氨基酸序列与某些垂体糖蛋白激素的亚基相同 ,如LH、FSH、TSH。β亚基是 14 5个氨…     

血小板膜糖蛋白Ⅰa基因多态性与心肌梗塞的关系

目的　探讨汉族人群心肌梗塞发生与血小板糖蛋白 (glycoprotein,GP) a基因 80 7C/ T多态性的关系。方法　采用病例对照研究 ,应用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (polymerase chain reaction-se-quence specific primers,PCR-SSP)方法检测 12 7例心肌梗塞患者 (急性或陈旧性 )和 175名正常对照血小板 GP a基因 80 7C/ T多态性。结果　心肌梗塞组和对照组 T和 C等位基因的分布差异有高度显著性(T:42 .70 %比 3 2 .0 0 % ,C:57.3 0 %比 68.0 0 % ,P<0 .0 1) ;无论在所有受试者还是在年龄≤ 60岁的受试者中 ,心肌梗塞组 (TT+ TC)基因型的频率均显著高于对照组 ,所有年龄受试者中 ,69.3 4 %比 51.43 % ,P<0 .0 0 5,比数比 =2 .14 ,95%可信区间为 1.3 4～ 3 .41;年龄≤ 60岁的受试者中 ;75.90 %比 51.52 % ,P<0 .0 0 5,比数比 =2 .96,95%可信区间为 1.58～ 5.55;L ogistic多因素回归分析显示血小板膜 GP a T等位基因为心肌梗塞的发生独立危险因素 (比数比 =4.96,95%可信区间为 2 .55～ 10 .90 )。结论　血小板膜 GP a T等位基因与心肌梗塞的发生相关联 ,可能为心肌梗塞发生的一种遗传易感性标志     

P-糖蛋白抑制剂的研究进展

肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药(MDR，即肿瘤细胞对某种化疗药物产生耐药，同时对其他化学结构、机理不同的化疗药物亦产生交又耐药)是肿瘤患者化疗失败的主要原因，许多因素参与MDR的发生过程，而MDR基因编码的P-糖蛋白(P-gp)过渡表达是主要因素，因此通过抑制其过度表达，从而使肿瘤细胞的MDR产生逆转，对于提高疗效、降低毒副反应具有重要意义。近几年来P-gp抑制剂的研发较快，已发展至第3代。随着研究的不断深入，将有更多疗效突出，副作用少的P-gp抑制剂问世。     

重组人β2糖蛋白1第一结构域对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生ICAM-1、MCP-1的影响

目的：探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域（hrβ2GPⅠDⅠ）对抗磷脂抗体综合征（APS）患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响。方法：应用hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理前后的APS患者血清分别与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共孵育，细胞EL／SA和RT-PCR方法分析处理前后HUVEC表达ICAM-1、MCP-1的变化。结果：hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理后的APS患者血清较处理前相比，与其孵育的HUVEC表达ICAM-1、MCP-1在蛋白和mRNA水平均明显降低。结论：邮：GPⅠDⅠ可中和APS患者血清中的大部分致病性抗β2GPⅠ抗体（anti-β2 GPⅠ）。