7个非综合征型耳聋家系患者的mtDNA A1555G突变分析

目的探讨非综合征型耳聋家系患者mtDNA A1555G突变及其临床特征。方法应用聚合酶链反应、限制性核酸内切酶酶切和DNA测序技术对7个非综合征型耳聋家系112个成员的mtDNA A1555G突变进行检测，并分析听力临床资料。结果7个家系中所有受检的母系成员mtDNA A1555G突变均为阳性，突变性质含同质性和异质性二种；非母系成员及配偶该突变为阴性。突变的性质与临床表型的有关。结论mtDNA A1555G突变可导致非综合征型耳聋和氨基糖苷类抗生素致聋，其突变性质含均质性和异质性两种，且与临床表型相关。     

免疫系统超突变反应可能引发癌症

美国科学家发现 ,人体免疫系统会使用一种比较冒险的机制来抵御疾病 ,然而一旦失手 ,则可能会引起癌症 .这一机制称为超突变 ,它能改写免疫系统Ｂ细胞里控制产生抗体的基因 ,修正抗体分子的形状 ,使它能更有效地附着在致病因子上并消灭它 .正常情况下 ,超突变只发生在Ｂ细胞染色体上编码产生抗体的区域 ,但美国哥伦比亚大学的科学家在最新一期英国《自然》杂志上报告说 ,他们发现超突变可能会失去控制 ,在抗体编码区域以外的区域发生 ,导致细胞染色体变得脆弱 ,更易产生癌症 ,他们检查了 10 0多份Ｂ细胞淋巴瘤组织样本 ,发现在部分样本中 ,…     

表达Cys548雌激素受体突变型cDNA的真核载体构建及其促转录活性分析

目的 考察一个548位点C→T单核苷酸突变的雌激素受体(ER)在体外条件下,对乳腺癌细胞株(MCF-7)信号通路的影响,以探讨ER单核苷酸突变引起非雌激素依赖性性早熟的可能机制.方法 用重叠延伸PCR定点诱变技术对548位点的碱基进行定点突变.构建定点突变表达载体pSG5-MuER.构建含雌激素受体反应元件(ERE)的萤光素酶报告基因载体pGL3-ERE-Luc.将野生和突变ER质粒分别和pGL3-ERE-Luc共转染MCF-7细胞,观察萤光素酶的变化,以检测突变ER反应活性的变化.结果 成功构建ER突变质粒psG5-MuER和ER报告质粒pGL3-ERE-Luc,psG5-MuER较pSG5-ER能够增加萤光素酶的产生.结论 该突变雌激素受体在体外具有高促转录活性特征,构建的载体可用于进行进一步的相关研究.     

非小细胞肺癌患者外周血和胸水脱落细胞检测T790M突变的比较

目的比较非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者外周血和胸水脱落细胞T790M突变检出率的差异。方法收集52例NSCLC患者的胸水和外周血标本,检测两者的T790M突变,并对检测结果进行分析。结果外周血标本和胸水脱落细胞T790M突变的阳性率分别为30.8%、46.2%。外周血检测T790M突变阳性的16例胸水脱落细胞检测结果均阳性,外周血检测阴性的28例胸水脱落细胞检测结果22例阴性,6例阳性。外周血检测初步判为临界阳性的8例中胸水脱落细胞检测结果4例阴性,2例阳性,2例弱阳性。结论胸水脱落细胞比外周血标本检出率高,有胸水标本的患者建议优先选择胸水检测T790M突变。     

云南省傣族G6PD一个家系的突变型研究

在调查云南少数民族Ｇ６ＰＤ缺乏症时，采用Ｇ６ＰＤ硝基四氮唑蓝纸片法筛查，按ＷＨＯ标准化方法进行生化变异型鉴定，再用错配碱基ＰＣＲ引入酶切位点法进行ＤＮＡ突变型研究，首次在傣族中发现Ｇ６ＰＤｃＤＮＡ突变型：１３８８Ｇ→Ａ。     

人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达

目的：克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G，HLA-G)突变体cDNA，并使其在HLA-I类阴性的K562细胞上获得稳定表达，为研究配-受体之间的识别机制奠定基础。方法：用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-GcDNA，得到全长HLA-GPCR产物后，用桥式PCR方法进行定点点突变，将突变的目的基因亚克隆于逆转录，将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体，采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞，最后经G418筛选及有限稀释，利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测，观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达。结果：HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论：成功构建了mG-pLNCX表达载体，并使HLA-G突变体分子在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。     

一种新的β地中海贫血双重突变杂合体[—28（A→G）.CD17（A→T…

为研究不同民族β地中海贫血的基因突变，作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合等位基因特异性寡核苷酸（ＡＳＯ）探针点杂交技术，对现居新疆的一个布依族家系的β地贫进行了基因分析，发现其中两名成员为－２８（Ａ→Ｇ）和ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）的双重杂合体。结合家系调查表明，为同一染色体上的双重突变，文献中未见报道。这种基因的携带者表现为轻型β地中海贫血，从而为认识β地盆高度的异质性、为研究我国少数民族β地贫的基因背     

锚原纤维与营养不良性大疱性表皮松解症

锚原纤维具有维持真皮紧密连接的作用，其主要结构成分是Ⅶ型胶原，Ⅶ型胶原基因（COL7A1）突变是营养不良性大疱性表皮松解症（DEB）的分子发病机制。本主要综述如下两个方面的研究进展：①Ⅶ型胶原的分子结构、基因结构及其调控功能；②COL7A1的提早终止密码突变（PTC）和甘氨酸置换突变对锚原纤维分生物学特性的影响－－Ⅶ型胶原的数量变化和质量变化（分子折叠、聚合和分泌等发生异常）是DEB发病的分子基础。     

一个遗传性痉挛性截瘫家系的临床特点与spastin基因突变分析

目的探讨遗传性痉挛性截瘫(hereditary spastic paraplegia,HSP)一家系的临床特点及其与spastin基因突变关系。方法对整个家系进行详细的临床检查,先证者和家系内另两例患者进行了肌电图检查,先证者还进行了胸髓核磁共振检查。应用聚合酶链反应结合DNA序列分析方法,检测该家系中先证者和其父亲spastin基因的突变情况。结果家族中所有患者具有遗传性痉挛性截瘫的典型表现,先证者胸髓核磁共振成像显示胸髓明显萎缩,PCR-DNA序列分析患者spastin基因的17个外显子均未发现有异常的突变。结论该HSP家系的患者具有典型的临床表现,并非spastin基因外显子突变所致。