PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究

目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法。方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-I、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术。对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较。结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830)。经χ2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P<0.05)。结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中~高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点。PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型。     

CD14+单核细胞人类白细胞抗原DR表达率与脓毒症关系的研究

目的了解烧伤延迟复苏时CDl4^＋单核细胞人类白细胞抗原DR（HLA—DR）表达率的变化，分析其与脓毒症的关系。方法选择烧伤面积大于30％TBSA的25例烧伤延迟复苏患者，于伤后1、3、7、14、28d取外周血，其中7例患者住院期间并发脓毒症，于脓毒症发生后连续2d亦取其外周血。另取20例健康体检者外周血作为对照。流式细胞仪检测CD14^＋单核细胞HLA．DR表达率，酶联免疫吸附测定法检测血浆中肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素10（IL-10）的浓度。结果非脓毒症患者伤后1、3、7、14、28dCD14^＋单核细胞HLA—DR表达率分别为（15±6）％、（74±5）％、（264±17）％、（284-16）％、（474-16）％，明显低于健康体检者[（924±10）％，P〈0．01]；脓毒症患者发生脓毒症后1、2d，该指标亦明显低于健康体检者及非脓毒症患者伤后1、7、14、28d（P〈0．01）。脓毒症患者TNF—d检出率及TNF—α、IL-10浓度，均高于非脓毒症患者和健康体检者（P〈0．05或P〈0．01）。伤后1、7、28d，外周血CD14^＋单核细胞HLA—DR表达率与IL—10浓度呈显著负相关（r分别为-0．9963、-0．7459、-0．8474，P〈0．01）。结论烧伤延迟复苏患者免疫功能低下，促炎性介质释放量增加，并发脓毒症时则更为严重。外周血CD14^＋单核细胞HLA—DR表达率可作为动态检测患者免疫功能状态的有效指标。     

游离与总前列腺特异性抗原及其比值的临床应用

目的探讨血清中游离前列腺特异抗原(fPSA)、总前列腺特异抗原(tPSA)及其比值对前列腺癌(Pca)的诊断价值。方法采用美国BECKMANCOUNTER全自动微粒子化学发光免疫分析仪定量测定经临床确认的Pca、前列腺增生(BPH)、正常人血清中的fPSAt、PSA并计算其比值。结果Pca、BPH患者PSA水平与正常人比较有非常显著性差异(P均<0.01);Pca患者PSA水平与BPH患者比较无显著性差异(P>0.05),而fPSA 2组比较有显著性差异(P<0.01)。结论fPSA与tPSA联合检测并计算比值可提高Pca的检出率。     

对IMMULITE Ⅰ型化学发光酶免疫技术中检测原理及相关内容的初评

美国德普(DPC)公司开发成功的IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光自动化分析仪及其配套的各项检测试剂盒是在IMMULITE系统条件下发展完善的.它以聚苯乙烯塑料珠为固相载体, 碱性磷酸酶(APase)标记抗体(或抗原),并作用于发光底物AMPPD[3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″磷酰氧基)苯基-1,2二氧乙烷].该仪器可完成单项、联合多项, 甚至十几项的常规项目物质浓度测定.每项检测原理及其反应模式不同.根据待测抗原的性质, 分子量大小, 各项试剂盒性能要求, 具体为每项检测内容设计了更为合理完美,结果准确的检测原理及其反应模式.信号数据处理也由自动化分析仪上电脑预先编制的软件完成, 备有多种标准曲线拟合方程, 以供不同免疫反应模式选择, 满足每项检测项目.本文在实践中了解和观察到32项常规项目的检测原理及相关内容, 用表格形式分析与初评如下.     

白血病患者的心理护理

1资料与方法 88例白血症患者分为心理护理组（A组）和一般组（B组）各44例。男、女各22例，A组年龄16—66岁，B组年龄18—68岁。治疗方案基本相同。心理观测方法：（1）有目的有计划地观察病人的表情、姿态、动作等，作出心理评定；（2）通过与病人交谈，了解其心理异常、心理冲突的有关情况；（3）了解病人的文化程度、年龄、性格、现状等进行综合分析，     

气相色谱法测定食品中雕白块（甲醛次硫酸钠）

2004年10月，卫生部、江苏省卫生厅发出紧急通知《关于迅速查处部分食品经营企业涉嫌违法经营含雕白块的食品》，通知中附有卫生部草拟的食品中甲醛次硫酸钠的测定方法（化学比色法），按照该方法，我们对从市场上采取的大量可疑食品进行了分析测定，结果发现其阳性率很高。我们怀疑有假阳性，故开始研究摸索用气相色谱法进一步验证。     

体外循环术后患者Toll样受体变化及其意义

全身炎症反应综合症（SIRS）是体外循环术后常见及严重的并发症，单核细胞在CPB早期即参与了其中的炎症反应。本研究旨在观察体外循环（CPB）围术期外周血单核细胞TLR4和CD14的变化规律。寻求新的抗炎途径。     

两种血小板抗体检测方法的比较

血小板抗体可以引起多种临床疾病或症状，如同种或自身免疫性血小板减少症、输血后紫癜、血小板输注无效等。目前，血小板抗体的检测方法，已报道的有多种，如血小板免疫荧光试验、固相红细胞粘附试验（SPRCA）、单克隆抗体特异性血小板抗原固定术（MAIPA）、改进的抗原捕获酶联免疫吸附试验（MACE）等。笔者以流式细胞术法作为参考方法，     

杭州市下城区：外来妇女儿童可免费享受健康保健服务

记者从河南省血液中心获悉．去年该中心新发现的9个人类新HLA等位基因，目前得到了世界卫生组织的认可．并给予正式命名。HLA等位基因．又被称为人类白细胞组织相容性抗原。     

其它（051124～051144）

多次小剂量pEgr-IFN-γ基因-放射治疗的抑瘤效应及其机制的研究；Hsp70-肿瘤抗原肽复合物防治小鼠黑色素瘤B16肺转移的作用；CA72-4在10种恶性肿瘤患者血清中的临床界值；肿瘤库(用于分子生物学研究)的建立及管理；围手术期营养支持对外科病人预后的影响；