白纹伊蚊气味受体基因OR21α的克隆及定量分析

本文克隆白蚊伊蚊气味受体基因OR21a分析其是否与搜寻宿主或吸血行为相关。通过设计简并引物,PCR扩增得到白纹伊蚊气味受体基因OR21a段,采用SYBR荧光定量PCR方法,以自纹伊蚊β-肌动蛋白基因作为内参,比较了OR21a因在未吸血雌蚊、雄蚊、打断吸血雌蚊和饱血雌蚊头部表达量的差异。结果显示,白纹伊蚊OR21a因在未吸血雌蚊头部表达量最高,饱血雌蚊头部表达量最低,而在雄蚊头部的表达量介于打断吸血雌蚊和饱血雌蚊之间。本研究发现白蚊伊蚊会依据不同的生理需求改变OR21a因的表达量,推测可能与白纹伊蚊搜寻宿主及吸血行为有一定的相关性。     

斯氏按蚊和白纹伊蚊中肠蛋白及蛋白酶分析

取出吸血前后不同时间的雌蚊中肠,分别测定其蛋白含量、组分和蛋白酶活性。所有雌蚊吸血后中肠蛋白含量随时间增加,感染疟原虫的雌蚊中肠蛋白含量均高于同期正常雌蚊。中肠蛋白 SDS—PAGE 表明:斯氏按蚊羽化时和吸血后 d7正常蚊及感染蚊均为15条蛋白区带,吸血后 d10正常蚊为16条区带,感染蚊为14条区带。白纹伊蚊吸血后 d6和 d9正常蚊和感染蚊均为19条蛋白区带。感染雌蚊中肠蛋白酶活性均高于同期正常雌蚊。     

福建省首次从病人血清及蚊体分离出登革病毒的研究

目的　１９９９ 年入夏以来, 我省某地发生不明原因发热、头痛、肌痛、乏力、皮疹等症状的病人, 拟诊为登革热。为了从病原学上证实, 我们进行了病毒分离, 为防治工作提供科学依据。方法　应用早期病人血清７ 份, 白纹伊蚊１ 份经处理后接种Ｃ６／３６ 细胞, 并应用恢复期病人血清、双相血清、免疫血清及单克隆抗体进行免疫荧光法鉴定及分型。结果　在７份早期病人血清中经２ ～３ 代分离出５ 株登革病毒, 并从白纹伊蚊体内分离出１ 株登革病毒。结论　此分离的毒株经鉴定均为登革ＩＩ型病毒。此系福建省首次从病人血清及蚊媒体内分离出病毒的报告。不仅为防制工作提供科学依据, 而且为今后的研究奠定了基础。     

α-三噻吩对白纹伊蚊幼虫的毒杀作用

目的　研究α三噻吩对白纹伊蚊幼虫的杀灭效果、影响因素及其对白纹伊蚊幼虫生长发育的影响。　方法　在实验室特定近紫外光 (UVA)下,计数不同药物浓度、不同黑暗处理时间的α三噻吩作用后蚊幼虫的死亡数、化蛹数及蛹的羽化数;在户外自然光下,观测不同药物浓度、不同施药时间的α三噻吩作用后蚊幼虫的死亡数。　结果　实验室特定UVA下,α 三噻吩对白纹伊蚊幼虫的半数致死量为2.37μg/L;药物与幼虫在黑暗中作用3h后再施以UVA照射能发挥其最大毒杀作用;α三噻吩能够显著抑制白纹伊蚊幼虫的发育和蛹的羽化。户外自然光下,高浓度α 三噻吩在强烈阳光辐射下可以快速杀灭白纹伊蚊幼虫,上午5时施药后24h的毒杀作用显著优于上午10时和下午1时。　结论α三噻吩是一种高效、实用、并能够抑制蚊幼虫生长发育的杀虫剂。     

不同地理种群白纹伊蚊线粒体基因COI的遗传多样性分析

目的探讨白纹伊蚊不同地理种群间的进化关系和遗传分化情况,为白纹伊蚊防制和蚊媒病防控提供基础资料。方法在广泛采集样品的基础上,通过PCR扩增、测序获取线粒体基因COI片段,并从GenBank下载了部分序列,比对、剪切后的598bp用于后续分析。结果系统发育分析的结果表明所有白纹伊蚊的COI序列聚成一支,没有明显的遗传差异;60条COI序列分属于19个单倍型,其中4个为共享单倍型;单倍型多样性(Hd)为0.737,核苷酸多样性(π)为0.20%;海南的白纹伊蚊种群与绝大部分地理种群间出现了明显的分化(P0.05);H1和H6形成了2个辐射中心,是较为原始的单倍型。结论我国的白纹伊蚊种群正处于扩张的趋势,海南的白纹伊蚊种群与其它地理种群间出现了明显分化。     

上海市静安区白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性调查

目的 了解静安区白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性,为采取有效防控措施提供依据.方法 采用幼虫浸渍法、成蚊接触筒法测定白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗性.结果 高效氯氰菊酯、倍硫磷、残杀威、溴氰菊酯、氯菊酯和双硫磷对静安区白纹伊蚊幼虫的LC50分别为0.012 5、0.005 3、1.467 9、0.007 8、0.0044和0.0...     

白纹伊蚊AL-100 30 ku蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建

目的克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30 ku蛋白基因,并构建其原核表达载体。方法RT-PCR克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30 ku的全长基因,设计简并引物,扩增白蚊伊蚊30ku的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果成功克隆白纹伊蚊主要过敏原30ku基因并构建其原核表达载体。该基因含有长度为816bp的开放阅读框,编码271个氨基酸。该蛋白质的分子质量单位为28.33ku,等电点为4.04,编码序列与数据库中已知的白纹伊蚊30ku基因的同源性为99％。结论成功克隆了白蚊伊蚊主要过敏原30ku基因并构建了原核表达载体,为白纹伊蚊主要过敏原30ku蛋白的重组表达和免疫活性鉴定等奠定了基础。     

苏云金芽孢杆菌杀蚊新菌株LLP29对白纹伊蚊作用机理的研究

从武夷山自然保护区白玉兰叶片上分离获得1株新的苏云金芽孢杆菌菌株LLP29,内含cyt1Aa6杀蚊基因。纯化的Cyt1Aa6毒素蛋白对白纹伊蚊幼虫和C6/36细胞都有高效活性。为更好地利用该菌株对白纹伊蚊进行生物防治,本试验以白纹伊蚊敏感品系及C6/36细胞为研究对象初步研究了其作用机理。免疫荧光染色和免疫组织化学实验结果表明:Cyt1Aa6毒素蛋白主要结合于C6/36细胞膜和白纹伊蚊幼虫中肠上。