非小细胞肺癌组织蛋白酶D表达及意义

目的探讨组织蛋白酶D(Cath D)在非小细胞肺癌NSCLC组织中的表达及意义. 方法采用ABC免疫组织化学法检测41例NSCLC患者肺癌组织标本中Cath D表达. 结果 73.2%(30/41)的肺癌组织Cath D表达阳性,其中鳞癌为69.2%(18/26),腺癌为80.0%(12/15),差异无显著性(P＞0.05);Ⅲ～Ⅳ期肺癌病例中,肺癌组织Cath D表达高于Ⅰ～Ⅱ期病例(P＜0.05);随着肿瘤细胞分化程度由高分化、中分化至低分化,其Cath D阳性表达明显增强(P＜0.05);伴有淋巴结转移者,Cath D表达显著高于无淋巴结转移者(P＜0.01). 结论 Cath D在NSCLC,不管是鳞癌还是腺癌,均有较高表达.肺癌组织Cath D高表达与临床分期、肿瘤细胞分化程度以及淋巴结转移关系密切,提示Cath D可以作为评价肺癌生物学行为和预后的指标.     

人源性基质金属蛋白酶-1原核表达载体的构建与鉴定

目的构建人源性基质金属蛋白酶-1(MMP-1)原核表达载体. 方法从人肝组织提取总RNA,以此为模板,逆转录巢式 PCR扩增MMP-1全编码区基因片段,构建含目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-C2x重组质粒亚克隆,经双酶切及核苷酸测序进行分析鉴定. 结果成功地构建了人MMP-1原核表达载体. 结论构建的人MMP-1原核表达载体,为以后MMP-1融合蛋白的表达并获得具有抗原性的MMP-1融合蛋白奠定了基础.     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制因子在戒烟大鼠肺组织中的表达

目的　研究基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)及其组织抑制因子 -1(TIMP -1)在戒烟大鼠肺组织中的表达及可能作用机制。方法　建立吸烟肺气肿大鼠模型 ,5 0只雄性Wistar大鼠 ,随机分为 4月、6月对照组和吸烟 4月、6月组、戒烟组 (每组 10只 ) ,用原位杂交和免疫组化等方法观察肺组织基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)、金属蛋白酶组织抑制因子 -1(TIMP -1)的mRNA及蛋白的表达 ,用免疫组化法观察IV型胶原在肺内的表达。结果　与相应的对照组相比 ,吸烟 4、6月组MMP -9、TIMP -1在肺组织表达均显著上升 ( P <0 0 1) ;与吸烟 4月组相比 ,戒烟组肺组织MMP -9mRNA及蛋白的表达均明显减少 ( P <0 0 5 ) ,而TIMP -1表达明显上升 (P <0 0 5 ) ,IV型胶原表达增加 (P <0 0 5 ) ;与吸烟 4月组相比 ,戒烟组血气分析改善。结论　戒烟能阻止阻塞性肺气肿进一步发展 ,可能通过抑制MMP -9和增强TIMP -1表达发挥作用     

冠状病毒蛋白酶结构有助于抗SARS药物的研制

德国研究人员已经制作出了复制SARS病毒主要蛋白酶的模型,这是—项能够加速有效治疗研究的成果。事实上,酶的结构提示:一种目前正在开发的抗鼻病毒(ami-rhinovims)药物AG7088能够被修饰,从而对抗引起重症急性呼吸道综合征(sARS)的冠状病毒。卢比克大学的Dr.RolfHilgenfeld及其同事通过首先确定猪冠状病毒与人229E冠状病毒的类似酶结构,制作出了一种SARS主要病毒蛋白酶的模型。研究人员发现这3种蛋白酶的基质接合点非常相似,而且SARS病毒蛋白酶实际上可以分解猪冠状病毒蛋白酶的基质。DR.Hilgenfeld指出,这种蛋白酶对于SARS冠状…     

兔眼IOL术后基质金属蛋白酶抑制因子在虹膜、晶状体上皮细胞的表达

目的　探讨白内障囊外摘出及人工晶状体植入术后基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMPs)在虹膜、晶状体上皮细胞的表达和TIMPs对后囊膜混浊的形成及纤维化的影响。方法　取 2 5只健康成年家兔 ,均一只眼行晶状体囊外摘出及人工晶状体植入术 ,另一眼作为对照组。每 5只兔眼为一组 ,分别于术后 1、3、7、14、3 0d取出虹膜和晶状体上皮细胞 ,用RT PCR和反向酶谱分析法检测各标本中的TIMPsmRNA和蛋白质的表达 ,并用羟脯氨酸试剂盒检测晶状体囊膜羟脯氨酸量的变化。结果　在正常虹膜、晶状体上皮细胞组织均有TIMP 1、 2、 3和 4mRNA的表达 ,而无相对蛋白质活性的表达 ;术后第 1d ,TIMP 1、 2、 3和 4mRNA即出现明显升高 ,其中术后第 7d ,TIMP 1和 2mRNA的表达量为最大 ,此后逐渐下降 ,术后第 3 0d的表达量仍高于对照组 (P <0 0 5 ) ;TIMP 3mRNA轻度升高 ,TIMP 4mRNA则轻度下降 ;羟脯氨酸的含量于术后 1、3、7d和 14d明显低于术后 3 0d(P <0 0 5 )。结论　TIMPs可能是抑制白内障囊外摘出及人工晶状体植入术后细胞外基质降解的主要因素 ,还可能是后囊膜混浊的形成和纤维化的重要原因之一。     

翼状胬肉上皮细胞基质金属蛋白酶Ⅱ的表达

翼状胬肉是眼科常见病，对其病变本质及发病机制仍有争论。病理学研究认为，胬肉上皮细胞在其形成中起关键作用。本研究以人翼状胬肉上皮细胞为研究对象，同时检测培养的结膜及翼状胬肉上皮细胞MMP2表达水平，探讨其与翼状胬肉形成、发展的关系。     

肿瘤坏死因子α及孕酮对异位子宫内膜间质细胞分泌基质金属蛋白酶-3的调节

目的 :探讨细胞因子、性激素与基质金属蛋白酶 (MMPs)在子宫内膜异位症(EMs)发病机制中的作用及相关性。方法 :以EMs患者 15例作研究组 ,分别取其在位与异位内膜 ,以非EMs患者 10例的正常内膜为对照组。原代培养子宫内膜间质细胞 ,在研究组和对照组内分别设置空白对照组、孕酮组与肿瘤坏死因子 α(TNF α)组。孕酮组分别加入孕酮 10 - 7mol/L、10 - 5mol/L ,各孵育 2 4h ;TNF α组中加入TNF α 10 0ng/L ,分别孵育2 4h、4 8h。ELISA法检测MMP 3含量。结果 :空白对照组MMP 3含量 ,异位组显著高于在位内膜组与对照组 (P <0 .0 1)。加入孕酮后各组MMP 3含量均呈下降趋势 ,异位组下降程度更为显著 (P <0 .0 1) ,高浓度孕酮具有更强的抑制作用 (P <0 .0 5 )。TNF α干扰后 ,各组MMP 3含量均升高 (P <0 .0 1) ,以异位组显著 (P <0 .0 1) ,不同作用时间对MMP 3含量的影响各组间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :EMs患者子宫内膜间质细胞分泌MMP 3较正常人高 ,异位病灶分泌能力更强。TNF α和孕酮对MMP 3的分泌分别有升调与降调的作用 ,二者可能通过此途径参与了EMs的发生发展过程。     

胎膜早破孕妇羊水、血清中IL-6、IL-8与基质金属蛋白酶的相关性研究

目的探讨胎膜早破患者羊水及血清中IL-6、IL-8的水平,胎膜组织中基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达情况,IL-6、IL-8与MMP-9是否有相关性.方法随机选择胎膜早破孕妇37例为实验组,其中Ⅰ组为足月胎膜早破22例,Ⅱ组为未足月胎膜早破患者15例,正常足月孕妇25例Ⅲ组作为对照组,用酶联免疫吸附实验测定母血及羊水中IL-6、IL-8水平,用免疫组化(SP)法测定胎膜中MMP-9的水平.结果实验组羊水及血清中IL-6、IL-8的水平明显高于对照组,具有显著性差异(P＜0.01);实验组胎膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P＜0.05);实验组母血及羊水中IL-6、IL-8均与胎膜组织中MMP-9有相关性(相关系数分别为0.882,0.729).结论母血及羊水中IL-6、IL-8水平变化可作为胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的诊断指标之一,基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胎膜早破中起关键性作用,炎性细胞因子IL-6、Ⅱ-8通过诱导MMP-9的合成和活化,间接导致胎膜早破.     

Survivin和Caspase-3在大肠癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的探讨大肠癌中Survivin和Caspase-3的表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学S-P法和DNA原位末端标记TUNEL法分别测定20例正常大肠黏膜和68例大肠癌组织中Survivin和Caspase-3的表达及其与细胞凋亡。结果Survivin在大肠癌中的表达(52.9%),明显高于正常大肠组织(0.0%)(P<0.01);与淋巴结转移和分化程度有关(P<0.01)。Caspase-3在大肠癌中的表达(41.2%),明显低于正常组织(80.0%)(P<0.01);与Dukes分期、分化程度有关(P<0.05)。Sur-vivin和Caspase-3的表达具有相关性(r=0.381,P<0.05)。凋亡指数与Survivin的表达呈负相关(r=-0.458,P<0.01)。凋亡指数与Caspase-3的表达呈正相关(r=0.634,P<0.01)。结论Survivin、Caspase-3与大肠肿瘤的细胞凋亡密切相关,参与细胞凋亡的调节机制,在大肠癌恶变的过程中发挥重要的作用。     

乌司他丁对小儿体外循环期间中性粒细胞弹性蛋白酶变化的影响

体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)期间,血液与人工管道表面接触、组织器官缺血-再灌注损伤促发多种炎症介质的瀑布样释放,导致全身炎症反应并可引起多种器官功能的损伤[1,2]。乌司他丁是一种广谱蛋白水解酶抑制剂,成人外科多项研究[3,4]表明乌司他丁对由于CPB介入而导致的