热休克蛋白70减轻帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白毒性的作用

目的 探讨HSP70在因α-突触核蛋白过表达或突变所致的帕金森病(PD)细胞模型中的作用及其机制.方法 构建过表达野生型和PD相关突变型(A53T)α-突触核蛋白质粒,转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞后得PD细胞模型;然后在细胞模型中转染表达HSP70的质粒.采用免疫印迹检测转染HSP70细胞模型中α-突触核蛋白表达量的改变;采用MTT法检测转染HSP70后细胞模型活力的变化.结果 转染HSP70后,细胞模型α-突触核蛋白表达减少,细胞活性增加.结论 HSP70通过降低α-突触核蛋白表达水平对PD细胞模型发挥保护作用.     

蛋白芯片技术快速诊断结核性胸膜炎的价值探讨

目的探讨结核蛋白芯片对结核性胸膜炎及其它类型胸腔积液的鉴别诊断价值。方法选取结核性胸膜炎患者49例,肺炎旁胸腔积液、恶性胸腔积液及其它胸腔积液患者48例,分为结核组和非结核组,均行结核分枝杆菌LAM、38KD、16KD抗原蛋白芯片检测。结果结核组敏感性为46．9％（23／49）,非结核组特异性为87．5％（42／48）。阳性预测值及阴性预测值分别为79．3％（23／29）及61．8％（42／68）。两组阳性率比较有显著性差异（P〈0．01）。结论结核蛋白芯片检测可将结核性胸膜炎和其它原因的胸腔积液有效区分,虽然其敏感性较胸膜活检、胸膜结核杆菌培养、胸液腺苷酸脱氨酶检测等没有优势,但特异性尚可,简便快速,可做为鉴别胸腔积液的辅助手段。     

尿频、尿急、双肾积水、输尿管扩张2a

患者女,23岁,因尿频、尿急、排尿不适2a余,门诊拟诊尿路感染、双肾积水原因待查,于2010年8月19日收入院。患者于28前始出现尿频、尿急、排尿不适,偶伴有急迫性尿失禁,时轻时重。2a前曾在北京协和医院检查,血清抗核抗体（ANA）阳性,抗双链抗体116IU／ml（正常参考值〈100IU／ml）,抗核糖核蛋白抗体（RNP-Ab）阳性,     

三种板蓝根制剂对流感病毒核蛋白表达的影响

目的探讨不同板蓝根制剂对甲型流感病毒核蛋白（NP）的作用,寻找抗流感病毒中药的有效成分。方法采用传统水煮浸法提取的板蓝根水煎液和有机溶剂浸泡法提取的板蓝根凝集素及购买的板蓝根注射液,用细胞病变效应（CPE）法测得三种制剂试验浓度分别为1.95、2.60、0.78 mg/ml。将培养的Hela细胞分为八组,质粒组转染pcDNA3.1（＋）/NP,空质粒组转染pcDNA3.1（＋）;注射液、水煎液、凝集素实验组则将板蓝根注射液、水煎液、凝集素的试验浓度分别作用于转染重组质粒pcDNA3.1（＋）/NP的Hela细胞,三种制剂对应的对照组不进行转染,仅将对应制剂作用于Hela细胞。用胶体金免疫层析法和间接免疫荧光法检测各组NP表达。结果质粒组、注射液及水煎液实验组胶体金试验阳性,免疫荧光法证实作用转染的Hela细胞仍发出较强绿色荧光,且表达的NP定位于细胞质中;而凝集素组及空质粒组中表达NP的细胞未出现较强的绿色荧光且胶体金试验阴性。结论板蓝根凝集素可抑制NP基因表达,此为研发抗流感病毒的药物提供了新思路。     

多巴胺对鱼藤酮诱导α-突触核蛋白聚集的促进作用

目的:探讨多巴胺能细胞内多巴胺在鱼藤酮诱导α-突触核蛋白聚集过程中的作用。方法:采用鱼藤酮(1μmol/L)处理PC12细胞,流式细胞术检测双氢罗丹明123荧光强度;Western印迹法检测胞质内α-突触核蛋白表达;免疫荧光法观察α-突触核蛋白聚集体。并采用多巴胺耗竭剂——利血平预处理3h,观察上述指标。结果:鱼藤酮处理24h后,PC12细胞内过氧化物水平显著升高,而利血平(1μmol/L和5μmol/L)预处理后,细胞内过氧化物水平较鱼藤酮组显著下降(P<0.05)。鱼藤酮处理后,α-突触核蛋白表达水平显著升高,胞质内可见α-突触核蛋白免疫阳性的聚集体形成;采用利血平预处理后,α-突触核蛋白表达水平较鱼藤酮组显著下降(P<0.05),α-突触核蛋白聚集体面积减小。结论:在鱼藤酮作用过程中,多巴胺可促进α-突触核蛋白表达上调及其聚集体的形成。     

过氧化氢和帕金森病患者血清促进α-突触核蛋白向线粒体与细胞核转运

目的研究氧化应激和帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血清对α-突触核蛋白(alpha-synuclein,α-Syn)向线粒体以及细胞核转运的影响。方法将MES23.5多巴胺能神经细胞在含5%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养,然后分别用过氧化氢(H2O2)以及PD和正常人血清处理,免疫荧光标记法观察不同处理对α-Syn向线粒体以及细胞核的转运以及对线粒体及细胞核的影响。比色法测定血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、脂质氧化(malondialdehyde,MDA)和总抗氧化能力(totalanti-oxidation competence,T-AOC),观察血清的氧化应激水平。结果 H2O2和PD血清促进α-Syn向线粒体转运与细胞核转运,并造成线粒体皱缩、崩解,PD血清处理同时引起类似凋亡的核碎裂现象。PD血清的SOD、MDA和T-AOC高于对照血清。结论氧化应激和PD血清均可促进α-Syn向线粒体与细胞核转运,PD血清促进α-Syn向线粒体与细胞核转运可能与其氧化应激水平增高有关。     

溶酶体相关膜蛋白作为嵌合体可显著增强基于SARS冠状病毒核蛋白优势T细胞表位簇DNA疫苗的免疫应答

由于常规DNA疫苗进入体内,表达的目的蛋白属内源性抗原,抗原提呈细胞（antigen presenting cell,APC）将启动MHCI类抗原加工途径,提呈MHCI/抗原肽复合物给CD8^＋T细胞,因此,CD4^＋T细胞不能被有效活化。     

Ras相关核蛋白和缺氧诱导因子HIF-1α在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Ras相关核蛋白（Ran）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在胃癌浸润、转移过程中的机制及其相互作用。方法采用免疫组化PV-9000二步法检测70例胃癌组织和70例癌旁正常胃组织（距癌灶5 cm以上）中Ran和HIF-1α的表达。结果胃癌组织中Ran表达水平显著高于癌旁正常组织（P〈0.05）,胃癌分期越晚、浸润越深、伴淋巴结转移其表达水平越高,在低分化胃癌组织和高、中分化胃癌组织中其表达水平的差异无统计学意义。HIF-1α在癌旁组织中的表达均为阴性,胃癌组织中的阳性表达率为77.14%,显著高于癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0.05）,且与胃癌临床分期、浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与胃癌分化程度无关。Ran与HIF-1α呈正相关,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Ran与HIF-1α的表达率均随着胃癌临床分期、浸润深度和淋巴结转移的发展而增高,它们共同参与胃癌的发生、发展,可作为胃癌浸润和转移的重要判定指标。HIF-1α可能通过上调Ran的表达,促进胃癌细胞增殖而促进胃癌的浸润、转移。     

流感病毒的致病机理研究进展

流感病毒属于正黏病毒科流感病毒属.具有多种形态,可呈杆状或丝状,一般为球形.     

异质性胞核核糖核蛋白A2在类风湿关节炎诊断中的临床意义

目的 探讨异质性胞核核糖核蛋白A2（hnRNP A2）在类风湿关节炎（Rheumatoid Anhritis,RA）诊断中的临床意义,建立简便、快捷的ELISA检测方法,并与国外Anti—RA33Ab试剂盒的结果对比,以作为验证国内试剂盒可用性的依据。方法以高纯度的具有抗原反应性的重组hnRNPA2蛋白作为抗原．对临床上包括137例RA在内的多种结缔组织病患者的血清中的相应抗体进行ELISA检测。应用国外Anti—RA33Ab试剂盒ELISA法检测并对比检测结果。结果hnRNPA2在RA患者中的敏感性为37．23％。特异性为85．44％,抗hnRNPA2／RA33抗体在RA患者中阳性率均明显高于其他疾病组（P〈0．05）。抗hnRNPA2／RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43．75％。与国外Anti—RA33Ab试剂盒检测结果比较,在各组患者中检测抗RA33抗体的阳性率无明显差别（P〉0．05）,且总体符合率高达86．88％。另外,该抗体与年龄、病程、晨僵时间、血沉、C反应蛋白、关节功能、X线分期、类风湿因子（RF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗核周因子抗体（APF）及抗CCP抗体之间均无相关性（P〉0．05）。结论我们初步纯化了RA33抗原．对hnRNPA2进行了基因的克隆、重组蛋白的表达和纯化,并以其为抗原,用ELISA方法检测抗hnRNPA2／RA33抗体是早期诊断RA的可靠方法。与国外Anti—RA33Ab试剂盒的检测结果对比无明显差异,自制的抗RA33抗体试剂盒可以可靠地应用于临床检验。