PCR技术检测DMD/BMD的策略和方法

假肥大性肌营养不良 (ＤＭＤ/ＢＭＤ)是由营养不良性基因突变引起的Ｘ 连锁性疾病。应用分子遗传学分析方法检测突变 ,在常规诊断实验中很难实现 ,主要是由于基因的大小和结构所决定的。这段基因长度为 2 4Ｍｂ ,包括 79个外显子 ,这些外显子由 14ｋｂ的ｍＲＮＡ编码。每个外显子均 <2 0 0ｂｐ ,而内含子却在 10 9ｂｐ到 2 0 0ｋｂ以上变化不等。由于发生新突变 (约占ＤＭＤ的 1/ 3) ,基因重组率高于正常水平 (约 10 % ) [1 ] 以及种系镶嵌现象 ,进一步阻碍了其研究[2 ] 。1　策　略建立一套固定的基因诊断程序来分析所有的ＤＭＤ/ＢＭＤ是…     

常染色体显性遗传视网膜色素变性致病基因Peripherin/RDS的突变筛选

目的：了解中国视网膜色素变性患者（rtinitis pigmentosa,RP)中peripherin/RDS基因的突变谱及突变率。方法：应用聚合酶链-异源双链-单链构象多态性（polymerase chain reaction heteroduplex-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)及DNA序列分析技术对收集的15个常染色体显性遗传视网膜色素变性家系和55例散发视网膜色素变性病人peripherin/RDS基因的第一、二外显子进行检测。结果：15个家系及55例散发病人未检测到peripherin/RDS基因突变。结论：本研究所检测的视网膜色素变性病人与RDS基因无关。显示视网膜色素变性的遗传异质性。     

用大肠杆菌CM89菌株对三种化学物抗突变作用的研究

本文以 E.coli CM891为靶细胞,用细菌内抗突变作用模式研究了肉桂醛,鞣酸,二烯丙三硫的抗4NQO 突变性及其作用机制。含质粒 pKM101的 CM891的高抗株(抗50μg/ml 氨苄青霉素)能提高该菌株的自发突变率和4NQO 诱发的突变率以及对鞣酸的杀伤抗性。肉桂醛的抗突变性不依赖质粒 pKM101效应,但与暂时性生长延搁有关。鞣酸及二烯丙三硫的抗突变机制可能包括质粒 pKM101介导的易误修复。上述三种化学物中每二种联合应用均显示抗4NQO 突变性的协同效应及对靶细胞的毒性杀伤作用。     

一个RET原癌基因Met918Thr突变的多发性内分泌腺瘤病Ⅱb家系报道

目的 检测一个多发性内分泌腺瘤病(MEN)Ⅱb家系的RET原癌基因突变。方法 提取患者及其父母的外周血基因组DNA，对RET原癌基因第16外显子进行聚合酶链反应(PCR)，将PCR扩增产物进行直接基因测序和限制性内切酶分析。结果 检测到患者RET原癌基因第16外显子918密码子存在ATG(Met)／ACG(Thr)点突变，而在患者父母中未检测到该突变。结论 通过对MENⅡb患者及其父母的基因筛查发现，该患者点突变是杂合子错义突变。该疾病的诊断达到了基因水平。     

Keratin 13基因在喉癌发生中的作用

探讨keratin 13基因在喉癌发生中的作用。方法在keratin 13基因内部及附近选择5个微卫星引物进行LOH分析，于DNA水平间接检测100例喉癌患者中该基因的缺失情况。结果5个STR位点均存在LOH，其中D17S1964E、D17S2092、D17S791、D17S1665及D17S808位点的LOH频率分别为30．48％、26．02％、21．62％、37．66%和21．51％，以D17S1665位点的LOH频率最高，杂合性丢失与临床分期无显著相关。结论Keratin13基因在喉癌的发生中具有重要作用，具体机制有待进一步研究。     

人胚细胞提取物拮抗环磷酰胺诱发小鼠骨髓微核的研究

目前，抗癌、抗突变剂的研究日益增多，其中一些化合物本身具有致突变作用，应用于人体可能有不同程度的副反应．因此．寻找有效而副反应小的抗突变成份．对肿瘤与遗传病的防治有重要意义．     

油页岩及其矿渣的致突变研究

采用Ames试验、E Coli大肠杆菌突变试验和动物骨髓细胞微核试验对油页岩及其矿渣提取物进行了致突变性鉴定。结果表明油页岩及其矿渣提取物在微核试验中呈阳性反应,而在细菌回变试验中呈阴性反应。     

赤灵芝的致突变性试验

使用赤灵芝的水提取液、乙醇（３０％）提取液进行鼠伤寒沙门氏菌回复、小鼠骨髓多染红细胞微核和雄小鼠精子畸变等三种致突变试验。剂量为１０００μｇ．皿＾－１和５０００μｇ／皿＾－１的鼠伤寒沙门氏菌回复试验的结果为阴性。小鼠在服用７５００ｍｇ．ｋｇ＾－１的水提取液或２５００ｍｇ．ｋｇ＾－１的醇提取液时，微核试验和精子畸变试验结果均为阴性。     

由GJB2基因233delC突变所致重度语前聋日本患儿的成功耳蜗植入

已有研究表明 ,部分非综合征型遗传性耳聋患者是由于 GJB2基因突变引起 ,而基因突变的位点因种族血统而异。日本人群中 ,最常见的是 2 33del C遗传因子突变。为了了解此类患儿遗传类型及耳蜗植入的治疗效果 ,该作者对 1993年 10月至 2 0 0 0年 9月间行耳蜗植入的 33例患儿中 15例病因不明的先天性重度非综合征型耳聋患儿进行研究。 15例中 ,男性 5例(33.3% ) ,女性 10例 (6 6 .7% ) ,接受耳蜗植入的年龄36～ 70个月 (平均 4 5 .3个月 ) ,所有患儿 CT扫描未见耳蜗和其它畸形。研究内容包括对患儿血标本采用PCR直接测序法进行 DNA基因分…