猪囊尾蚴cC1蛋白的原核表达及其特异性鸡卵黄抗体的制备与鉴定

目的 制备并鉴定特异性抗猪囊尾蚴鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供新的途径.方法 原核表达猪囊尾蚴抗原cC1蛋白,纯化后经皮下和肌肉多点注射免疫25周产蛋海兰母鸡,200 μg/只,首次免疫28 d后加强免疫3次,每次间隔10 d.ELISA法检测IgY抗体效价,Akita法和EGGstractT...     

氟化钠对原代培养猪甲状腺细胞毒性效应的实验研究

目的观察NaF对原代培养猪甲状腺细胞的毒性效应,并探讨其作用机制。方法采用40mg／L,80mg／L和160mg／L NaF对原代培养猪甲状腺细胞进行染毒,48h后光镜下观察猪甲状腺细胞形态结构的变化,并采用吖啶橙染色法,在荧光显微镜下观察细胞核形态结构的变化;采用M1T法测定细胞存活率。结果中、高剂量氟组甲状腺细胞滤泡结构渐消失,细胞变小、变圆,亮度增加。甲状腺细胞核内可见致密浓染的黄绿色染色,呈圆形、月牙形,可见发泡现象及凋亡小体,且细胞的存活率显著低于对照组（P〈0.01）。结论NaF对原代培养猪甲状腺细胞具有毒性效应,并呈现一定的剂量效应关系。     

西藏小型猪与人血液流变学指标的比较分析

目的 探讨西藏小型猪与人血液流变学指标间的变化规律.方法 采集成年西藏小型猪和人的血液样品,分别检测其WBV(高、中、低切变率)、PV、HCT、ESR及Fi等5项血液流变学指标.结果 (1)雄性西藏小型猪的150s-1、30s-1、5s-1、1s-1WBV值和Fi含量均显著低于雌性(P<0.05, P<0.01, P<0.05, P<0.01, P<0.01);(2)在人的血液流变学指标中男性的WBV值(1s-1)和HCT值显著高于女性(P<0.05,P<0.01);(3)西藏小型猪的HCT值和Fi含量与人相比存在显著差异(P<0.01),其余指标均无显著性差异(P>0.05).结论 西藏小型猪除HCT和Fi两指标与人有差异外,其余指标均与人基本接近.     

反转录病毒载体介导猪MHCⅡ分子在猪骨髓细胞中的表达

目的构建猪MHC Ⅱ分子的反转录病毒表达载体，建立产生病毒颗粒的包装细胞株，体外转导小型猪骨髓细胞并观察目的基因的表达情况，为研究小型猪转导同种异体MHC Ⅱ分子对于肝脏移植特异性免疫耐受的诱导提供实验基础和实验材料。方法利用基因重组技术将目的基因SLA-DRB^dd、SLA-DQA^dd和SLA-DQB^dd克隆到反转录病毒载体pLNCX2上，通过脂质体转染包装细胞AmphoPack^TM-293细胞，从G418筛选阳性克隆细胞培养上清中获得了有感染性的病毒颗粒；并对体外培养的猪骨髓细胞进行了感染，采用Nothern杂交和逆转录．聚合酶链反应（RTPCR）等方法检测了目的基因在骨髓细胞中的表达。结果经过酶切和测序验证已成功构建了MHC Ⅱ分子的反转录病毒表达载体，在转染AmphoPack^TM-293细胞后可以产生有感染性的重组病毒颗粒，稳定的CFM-GFG418抗性率为6％～11％，RT结果显示抗性细胞中有目的基因的RNA转录产物存在，而转染空载体的对照组没有。结论重组有目的基因的逆转录病毒载体pLNCX2经过包装细胞AmphoPack^TM-293产生的病毒颗粒可以有效地将猪MHC Ⅱ分子转导入猪的骨髓细胞并获得长期稳定的表达。     

间断温血灌注对供心代谢及酶的影响

在１２次猪的心脏移植实验中，供心的保护分两组，Ⅰ组供心用冷晶体停搏液灌注，Ⅱ组用温血灌注，在供心取出前及主动脉开放１５ｍｉｎ后对心肌代谢及酶学的有关指标进行监测。Ⅰ组心肌氧耗率明显低于正常，而Ⅱ组与正常无明显差异。心肌氧耗率下降程度Ⅰ组明显高于Ⅱ组。心肌糖耗率及冠状动静脉ｐＨ、磷酸肌酸激酶同功酶差值两组均与正常无明显差异。本实验结果提示间断温血停搏对心肌的保护作用与冷晶体停搏相似，但对于心肌代谢功能的恢复则优于后者。     

重组版纳微型猪近交系复合骨修复犬桡骨缺损的早期观察

目的:评价重组版纳微型猪近交系复合骨早期修复大型动物节段性骨缺损的能力.方法:制定版纳微型猪近交系骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)块型重组合异种骨(micro-porcine massive reconstituted bonexenograft,mpMRBX)及牛块型重组合异种骨(bovinemassive reconstituted bone xenograft,bMRBX),采用27只犬桡骨中段20mm骨-骨膜缺损修复模型.动物随机分为mpMRBX组、bMRBX对照组、空白对照组,于术后1周、2周、4周行骨缺损部X线摄片,术前及处死前采集静脉血行免疫学检查,局部取材行HE染色,取材组织RNA抽提,RT-PCR检…     

三种ELISA试剂盒检测猪流行性乙型脑炎病毒血清IgG抗体比较

  目的  了解华南部分地区家猪流行性乙型脑炎（简称乙脑）的感染现状,为乙脑的防制提供科学信息。  方法  2013年1 — 8月,从华南部分地区的广东、海南和江西部分地区共采集到465份当地6～8月龄、表观健康、未行乙脑疫苗免疫的家猪血清样本。进行家猪乙脑病毒(JEV)感染的流行病学调查,分别采用实时荧光定量PCR(TaqMan real-time RT-PCR)、酶联免疫吸附试验（ELISA）抗原和抗体检测方法,检测猪血清JEV核酸、抗原和抗体携带情况。  结果  合计共检测437份猪血清样本JEV携带情况,未发现JEV-RNA阳性样本。ELISA检测所有465份样本,43份JEV 抗原（Ag）阳性,抗原阳性率为9.2%（43/465）,445份JEV IgG 抗体阳性,抗体阳性率为95.7%（445/465）。  结论  广东、海南和江西成年家猪存在一定程度的JEV感染情况,应引起重视,做好乙脑防控工作。     

不同剂量氨溴索对实验性肺不张炎症因子及影像学的影响

目的探讨不同剂量氨溴索（ambroxol,AMB）对实验性肺不张炎症因子及影像学的影响。方法将雄性实验用中国小型猪随机分成肺不张组（M组6只）、AMB处理组（T组18只）及对照组（C组6只）。其中T组又随机分成30、60及90mg/Kg剂量的AMB处理的T30、T60及T90组,每组均为6只。M及T组小型猪的右主支气管下端在纤支镜下置入镍钛合金封堵器,T组小型猪在放入封堵器当天即予相对应的AMB剂量静脉注射,每8h注射1次,每3dCT检查肺部确定肺不张的形成,在肺不张形成后的第3天,3组动物均处死,收集右下肺组织行炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-10检测。结果M组和T组呈典型的肺不张CT改变。各组肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β和IL-10水平的表达差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与C组比较,M组和T组TNF-α、IL-1β水平明显升高（均P＜0.01）;与M组比较,T组TNF-α、IL-1β水平明显下降（均P＜0.01）;T60组和T90组与T30组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）,但T60组和T90组间无统计学差异。与C组比较,M组和T组IL-10表达显著下降（均P＜0.01）;与M组比较,T组IL-10水平明显升高（均P＜0.01）;但不同治疗剂量3组之间无统计学差异。与C组比较,M组和T组CT值均有显著提高（均P＜0.01）,但M组和T组间CT值无统计学差异;与M组比较,T组肺不张面积显著减小（均P＜0.01）,肺不张占单侧肺面积比T90组明显低于T30组（P＜0.01）,但T30和T60,T60和T90之间并无统计学差异。结论大剂量AMB能抑制实验性肺不张的炎症因子TNF-α、IL-1β的表达,提升IL-10的表达,能减小肺不张面积。     

测试新鲜猪股骨干钻削进给力

目的 采集新鲜猪股骨干不同骨质层和骨段的钻削进给力数据,为骨科虚拟现实手术系统钻削力反馈信号的输出提供依据。方法 改装万能材料试验机和手持可调速电钻(Φ5.0 mm钻头),构建生物骨骼钻削性能参数采集系统,分别以转速n ＝500,800,1 200 r/min和进给速度v ＝30,50,70 mm/min采集6具新鲜成熟猪股骨干162个标记点的钻削进给力f,分析其与相应组织和部位的关系。结果 新鲜猪股骨干同一标记点双侧骨皮质处进给力最大（fmax＝103.63~142.59 N）,髓腔处最小（接近于0）,股骨干中段进给力（f4,5,6＝124.69N）较两端（f1,2,3,7,8,9＝121.84 N）大;当v ＝30 mm/min、n ＝1 200 r/min时,钻削进给力最小（fmin＝106.04 N）;当v ＝ 70 mm/min、n ＝500 r/min时,钻削进给力最大（fmax＝139.84 N）。结论 改装的生物骨骼切削性能参数采集系统能有效采集生物骨骼的钻削进给力数据;骨骼钻削进给力与骨质的组织结构、电钻转速及进给速度有密切关系,其中骨质结构越密、电钻转速越小、进给速度越大,骨骼钻削进给力越大,反之越小。实验所获得新鲜猪股骨干钻削进给力数据及其变化趋势,可为虚拟骨科手术系统力反馈输出信号设置提供依据。     

99Tcm-环丙沙星SPECT和18F-FDG PET及MRI弥散加权显像检测重症胰腺炎继发感染灶的比较

目的 探讨和比较99Tcm-环丙沙星SPECT、18F-FDG PET和MRI弥散加权显像(DWI)3种功能影像技术诊断重症胰腺炎(SAP)继发感染灶的价值.方法 实验用2月龄幼猪28只,分为感染性SAP组(16只),非感染性SAP组(6只)和对照组(6只).感染性SAP和非感染性SAP猪模型建立后7d,3组均分别行99Tcm-环丙沙星SPECT、18F-FDG PET和MRI检查.图像视觉分析:在SPECT和PET图像上,胰腺及周围有局限性边缘清晰的放射性摄取高于周围胰腺组织的区域视为阳性;等于周围组织者或无明显放射性浓聚者为阴性.MRI DWI示胰腺坏死灶有气泡征或在梯度因子为1000 s/mm2时呈高信号为感染阳性.定量分析:利用ROI技术在3种图像上分别测量、计算病灶/本底放射性计数比值、SUVmax和表观弥散系数(ADC).以病理和细菌学检查结果为“金标准”,计算和比较3种功能影像技术诊断SAP继发感染灶的诊断效能.采用Bonferroni检验、最小显著差异t检验及x2检验分析数据.结果 (1)视觉分析结果:99Tcm-环丙沙星SPECT显像鉴别SAP继发感染的灵敏度、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为93.8％ (15/16)、5/6、90.9％(20/22)、93.8％(15/16)和5/6; 18 F-FDG PET的对应值分别为81.2％ (13/16)、2/6、68.2％ (15/22)、76.5％(13/17)和2/5;MRI DWI的对应值分别为15.4％ (2/13)、5/6、36.8％(7/19)、2/3和31.3％(5/16).感染性SAP组3只幼猪MRI图像质量差,未纳入分析.99Tcm-环丙沙星SPECT和18F-FDG PET显像鉴别诊断的灵敏度均高于MRI DWI(均P＜0.05),但前两者间差异无统计学意义(P＞0.05);而18F-FDG PET显像的特异性较低.(2)定量分析结果:感染性SAP组的病灶/本底放射性计数比值随时间变化趋势与非感染性SAP组和对照组比较,差异有统计学意义(F=95.66,P＜0.001).18F-FDG PET早期显像,感染性SAP组SUVmax(2.61±1.07)和非感染组SUVmax(1.87±0.76)差异无统计学意义(P＞0.05),而在延迟显像上,感染性SAP组SUVmax(2.27±0.75)则高?