心气虚细胞模型的研制

目的探索心气虚细胞模型的制作方法。方法ＮＩＨ小白鼠乳鼠培养心肌细胞用缺氧（１～３小时）再给氧损伤方法研制心气虚细胞水平动物模型。结果培养心肌细胞采用缺氧再给氧损伤后，出现ＬＤＨ和ＣＫ含量增加，ＳＯＤ活性降低，ＭＤＡ含量上升，与对照组比较，差别有显著性（Ｐ＜０．０５）或高度显著性（Ｐ＜０．０１）。结论根据缺血缺氧是导致心气虚证的重要因素之一，探索采用缺氧再给氧损伤制作离体心气虚细胞模型具有一定的研究价值     

川芎嗪对缺氧缺糖培养心肌细胞蛋白质、RNA合成及一氧化氮合酶基因表达的影响

 目的：观察川芎嗪对心肌细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。方法：本实验利用心肌细胞缺氧缺糖损伤模型，采用同位素掺入、Northern杂交分析方法，观察川芎嗪注射液对心肌细胞缺氧缺糖时蛋白质、RNA合成及一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达的影响。结果：川芎嗪注射液可提高培养心肌细胞缺氧缺糖时³H-亮氨酸(Leu)和³H-尿嘧啶核苷(UR)的掺入率，促进蛋白质、RNA合成，诱导NOS mRNA在缺氧缺糖心肌细胞的表达。结论：川芎嗪对心肌细胞缺氧缺糖损伤有较好的保护作用。     

丹参酮ⅡA抑制心肌肥厚的机制研究

目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察丹参酮ⅡA（ranshinone ⅡA，TSN）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin ⅡA，AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响及可能机制。方法 采用流式细胞仪测定心肌细胞总蛋白含量作为心肌细胞肥大的指标；用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测心肌细胞原癌基因c—fos mRNA的表达，并用显微荧光分光光度仪测定[Ca^2＋]Ⅰ。结果 TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞蛋白质含量的显著增加（P〈0．05），心肌细胞原癌基因c—fos mRNA表达的增强（P〈0．05）及[Ca^2＋]Ⅰ的增加，其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦（valsartan，Val）相似。结论 TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及原癌基因c-fos的表达，这与其抑制AngⅡ诱导的心肌细胞[Ca^2＋]Ⅰ的增加有关。     

眼睛蛇毒心脏毒素对大鼠心肌细胞收缩及细胞内钙离子的作用

目的 研究眼睛蛇毒心脏毒素（Cardiotoxin，CTX）对心肌细胞的形态、收缩幅度和细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）的作用。方法 应用荧光计量法（以Fura-2／AM为荧光染料）及光学成像系统来测定单个心肌细胞[Ca^2＋]i和收缩幅度。结果 0．001～1μmol／L的CTX使心肌细胞由杆状变成圆形，药物的作用从第1分钟时开始，到第20分钟时趋于稳定。在电刺激存在的情况下，1μmol／L的CTX最初导致电诱导的[Ca^2＋]i和收缩幅度瞬间增加，接下来[Ca^2＋]i时程延长，最终细胞对电刺激不敏感、突然收缩、[Ca^2＋]i持续增高。在缺乏电刺激的情况下，1μmol／L的CTX可诱导Ca^2＋震荡波、持续性[Ca^2＋]i增高，这种作用与40mmol／L的KCl和10mmol／L咖啡因所引起的[Ca^2＋]i瞬间增加不同。结论 CTX作用初期使[Ca^2＋]i增高，使细胞[Ca^2＋]。超载，同时伴随细胞形状的改变。     

Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响。方法　采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组、移植组、Bcl-2组。分别于术后第 1、3、5、7d各取 4只移植心脏 ,原位末端标记 (TUNEL)法染色检测心肌细胞凋亡 ,以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)。用免疫组化方法观察Bcl -2的表达情况。结果　移植组心肌细胞于术后第 1d即已出现凋亡 ,第 3d明显增加 ,第 7d达高峰。Bcl-2组术后第 1d心肌细胞即表达Bcl -2 ,第 3d表达明显增加 ,第 5d达高峰 ,第 7d仍维持高峰状态。Bcl -2组各时间点心肌细胞凋亡指数明显小于对应的移植组(P <0 0 1)。结论　Bcl -2基因转染对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用     

房颤病人钙超载机制与电重构的关系

心房纤颤(Atrial Fibrillation，AF)是最常见的心律失常，随着年龄的增加其发病率增加。目前对AF的病理生理机制尚不完全清楚，现认为其发生与电重构有关。电重构以有效不应期(ERP)缩短，ERP频率适应性下降为主要特征。现认为其与心肌细胞内钙离子的超载有关，在介导房颤短期或长期的电生理重构方面钙超载是首要因素，同时，钙超载也与组织重构、房颤持续有关系。     

真空采血对血钾离子测定结果的影响

钾离子是人体极其重要的离子之一，其浓度的高低对细胞的反应性，特别是心肌细胞有非常重要的意义。笔者用几种不同真空采血管采集标本，观察真空采血对血钾的影响。     

黄绿青霉素致心肌细胞DNA损伤观察

目的 检测黄绿青霉素对心肌细胞DNA的损伤.方法 心肌细胞原代培养和单细胞凝胶电泳法.结果 13.0μmol/L黄绿青霉素处理组心肌细胞发生凋亡,凋亡率为35.6%,凋亡细胞的Tail DNA%、L/H、Extent TM、Tail Length 4项指标均明显高于其他剂量组,差异显著;而2.6、1.3、0.625μmol/L黄绿青霉素处理组,未观察到明显的拖尾现象,以上4项指标与对照组相比无明显变化.结论 13 μmol/L黄绿青霉素具有致心肌细胞DNA损伤的作用.     

X射线联合阿霉素诱发体外培养心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察X射线联合阿霉素对体外培养心肌细胞的损伤作用．探讨X射线联合阿霉素与心肌细胞凋亡的关系。方法用40GyX射线联合5μg／ml阿霉索作用于培养3d的心肌细胞．分别孵育不同时间．用MTT法测定其生长抑制率，测定培养基中乳酸脱免酶（LDH）的含量。并分别用共聚焦显微镜、流式细胞仪技术、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测凋亡发生的情况。结果随着40GyX射线联合5μg／ml阿霉索作用时间的延长（3h、12h、24h、48h）。心肌细胞生长抑制率逐渐增加；培养基中LDH含量明显增加；X射线联合阿霉素使心肌细胞凋亡增加。结论X射线联合阿霉素对心肌细胞的损伤作用较单用X射线或阿霉索增大，联合作用使心肌细胞凋亡率进一步增加。     

体外诱导脂肪来源细胞向心肌细胞分化的实验研究

目的通过5-氮杂胞苷(5-AZA)体外诱导脂肪来源细胞(adipose-derived cells,ADC),来观察其向心肌细胞分化的潜能,探讨脂肪来源细胞治疗缺血性心脏病的可能性。方法应用酶消化法获得兔ADC,并进行体外培养、扩增、鉴定。然后5-AZA体外诱导3周后,应用RT-PCR检测心肌细胞特异性α肌球蛋白重链(-αMHC)基因。结果RT-PCR显示与正常心肌组织-αMHC阳性条带对照,诱导后ADC也在相同位置出现-αMHC的阳性条带,而未诱导ADC没有阳性条带出现。结论ADC可在一定诱导条件下向心肌细胞分化,是一种较有潜力的治疗缺血性心脏病的移植细胞。