范可尼贫血分子生物学研究进展

范可尼贫血(FA)是一种常染色体隐性遗传性疾病,临床表现复杂,单靠临床表现难以确诊。FA细胞对交联剂(MMC和DEB)特异性敏感,FA的诊断要依靠MMC/DEB诱导的染色体断裂试验。FA分为8个互补群(A—H),可能代表不同的基因,其中FAA最多见。FAA与FAC基因已被克隆了,并分别定位于9q22.3与16q24.3,FAD定位于3p22-26。基因型与FA临床表现有关。具有IVS4和外显子14突变的FAC患者临床表现重,预后差。FAA与FAC基因产物分别为1455和558个氨基酸的蛋白质,其功能不详,FAC蛋白可能参与细胞凋亡。在FA患者还存在嵌合体现象,某些嵌合体患者病情轻,提示嵌合体现象可能是自然发生的基因治疗。FAC的基因治疗已进入临床阶段,近期疗效良好,远期疗效有待评价。FAA的基因治疗尚处于实验室试验阶段。     

血细胞嵌合体与移植耐受

新概念的提出和新技术的应用是促进科学发展的主要推动力。 194 3年Ｍｅｄａｗａｒ阐明了器官移植排斥的免疫机制 ,开辟了临床器官移植的新领域 ;近半个世纪以来 ,由于组织配型以及强力免疫抑制药物的发明和应用 ,器官移植已成为临床治疗各种终末器官功能衰竭的主要方法。由于器官移植患者需要终生使用免疫抑制药物 ,导致感染的频繁发生和肿瘤发病率的升高 ,严重地影响了患者的生存质量。诱导器官移植受者对供者器官特异的免疫耐受 ,是解决器官移植排斥最彻底的方法。由于成年动物稳定的移植耐受诱导相当困难 ,长期以来不但进展缓慢 ,而且大…     

女性X-灭活嵌合体——系统性红斑狼疮女性优势的一种学说

系统性红斑狼疮 (SLE)是自身免疫性疾病 ,90 %的病人为女性。SLE发病的女性为优势的原因和机制 ,除了研究较多但尚难下结论的性激素对人体免疫系统的影响外 ,由于迄今认为X染色体短臂上存在与免疫调控有关的基因 ,新近有学者提出与X染色体灭活 (X chromosomeinactivation)现象及其嵌合体 (mosa ic)有关的一种全新学说。本文从下列几个方面综述介绍这一学说 :人体免疫系统在胚胎期通过对自身抗原有反应的T细胞的阴性选择和克隆排除实现的T细胞耐受 ;造血干细胞中X灭活比例不对称类型及可能出现的女性X灭活极大倾斜 ;胸腺树突状细胞 (DCS)的灭活不对称导致自身反应性T细胞逃逸自身耐受造成胸腺失能 ;SLE病人身上存在多反应性T细胞 (polyreactiveTcells)现象 ;其他女性X灭活嵌合体的自身免疫现象和疾病     

两种产前诊断技术对于检测羊水细胞染色体嵌合的性能比较CSCD

目的探讨染色体核型分析和单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism microarray,SNP-array)检测对于发现羊水嵌合体的价值。方法回顾分析羊水诊断发现胎儿为染色体嵌合体并进行SNP-array检测的74例孕妇的资料。结果在74例嵌合体中,12例为假性嵌合体,62例为真性嵌合体,后者包括罗伯逊易位嵌合体1例、缺失嵌合体3例、标记染色体嵌合体4例、常染色体非整倍体嵌合体19例、性染色体非整倍体嵌合体30例、等臂染色体嵌合体5例。结论染色体核型分析与SNP-array对于诊断嵌合体各有优缺点。当二者结果不一致时,可进一步采用荧光原位杂交进行验证。     

双精子嵌合体致ABO血型正反定型不符1例简

目的 对1例正定型呈混合凝集的ABO正反定型不符样本进行鉴定.方法 采用微柱凝胶法进行ABO、RhD血型鉴定、直接抗球蛋白试验和不规则抗体筛查,PCR-SSP法进行ABO基因分型,并分析外周血染色体核型.结果 先证者ABO正定型为红细胞混合凝集,反定型检出抗-A1;母亲和父亲分别为O型和AB型.先证者ABO基因座位存在O1、A201和B三个等位基因,其中O1来自母亲,A201和B来自父亲.核型分析显示先证者血液中存在46,XX和46,XY两种细胞,而父母核型正常.结论 先证者为孤雌分裂产生的两个相同的卵子被两个精子受精后所产生的嵌合体.     

建立人/猪造血嵌合体模型的初步探讨

本研究目的是利用免疫系统尚未成熟的胎猪和新生猪作为人脐血造血干细胞（HSC）的移植受者，建立人／猪造血嵌合体模型，初步探讨在猪体内扩增HSC的可行性。在无菌隔离器中，通过肌肉或脐静脉（剖子宫）给胎猪移植人脐血细胞，或在断脐前通过脐静脉给新生猪移植人脐血细胞，应用流式细胞术检测移植组猪外周血中人CD45^＋细胞。结果表明：移植后，受试猪生长发育与对照猪一致；移植后60天时，用流式细胞术在猪的外周血中检测到一定比例的人源细胞。结论：胎猪或新生猪能耐受一定量的人源抗原的植入，建立人／猪造血嵌合体模型是可行的。     

非清髓异基因外周血造血干细胞移植后嵌合体分析

本研究旨在探讨非清髓异基因外周血造血干细胞移植(NAPBSCT)后造血嵌合体的临床意义。采用FBC(氟达拉宾+白消安+环磷酰胺)±阿糖胞苷(Ara-C)预处理方案,对28例血液病患者进行NAPBSCT,采集供者和受者术前外周血及术后不同时间段的序列血样,用STR-PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色和凝胶成像分析技术半定量方法计算供体细胞嵌合率。结果显示:移植后1月,28例患者中1例移植失败,22例形成完全供者造血嵌合体(CC),5例形成混合造血嵌合体(MC);移植后7天时供者细胞即占优势(74.71%),较中性粒细胞(ANC)和血小板(Plt)的平均恢复时间均明显提前;CC组的aGVHD发生率高于MC组(P<0.05),两组cGVHD发生率无显著差异(P>0.05);1例MC患者发生早期移植排斥;CC组和MC组复发率无显著差异(P>0.05),1例在CC状态下复发。3例MC患者经早期临床干预治疗获得CC和完全缓解。结论:造血嵌合体的动态定量检测对判断早期植入,预测移植物排斥、复发和GVHD,以及指导临床干预治疗具有重要意义。     

母体内微量子代细胞嵌合体在HLA半相合造血干细胞移植中的意义

HLA不全相合的血缘关系移植解决了异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）的供者来源，但供受体间的HLA差异屏障限制了其广泛应用。近年来发现在妊娠结束后，部分母亲体内可以检测到长期存在的微量子代细胞（FMC）。这一现象引起人们的高度重视，因为它提示由于母体长期接触胎儿细胞表达的遗传性父本抗原（IPA）而可能存在对胎儿细胞的部分免疫耐受。这样的免疫耐受可能有利于母体供者半相合移植的预后。我们回顾性分析18例母亲供者HLA半相合HSCT的疗效与供者体内FMC之间的关联来阐述两者之间的相关性。     

混合脐血移植的实验研究

为探讨混合脐血移植重建免疫造血系统的可行性,扩大脐血移植（CBT）的应用范围,将孕20日的C57BL／6（H-2b）小鼠和615（H-2k）小鼠经剖腹产取出胎盘和胎鼠,剪碎后分离出脐血单个核细胞（MNC）,将二者各1×10     

混合脐血移植重建小鼠免疫造血功能的研究

目的:探索多份脐血混合移植重建免疫造血系统的可能性,扩大脐血移植的应用范围。方法:将1×10~6个C57BL/6和1×10~6个615小鼠脐血单个核细胞(MNC)同时输注给经致死量照射的BALB/c小鼠,10～15天后检查受鼠的脾结节(CFU-S),作受鼠的骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)培养,以检测造血重建;1个月后用流式细胞仪(FCM)检测受鼠体内供者细胞的嵌合状态;用单向混合淋巴细胞反应(MLR)检测免疫重建和免疫耐受;用受鼠小肠和皮肤病理切片检测移植物抗宿主病(GVHD)。结果:混合脐血移植小鼠的生存率为65％,未移植小鼠全部死亡;移植后10～15天在小鼠的脾脏可以检测到CFU-S,小鼠骨髓培养有CFU-GM生长;移植后30天发现在同一个小鼠的体内有2个供者的不全嵌合体同时存在;受鼠对两个供鼠的淋巴细胞均产生了免疫耐受;受鼠小肠和皮肤病理切片检查表明有轻-中度GVHD。结论:混合脐血移植可以重建同种异基因小鼠的免疫和造血功能而不引起重度GVHD。本研究为扩大脐血移植的应用范围打下了一定的理论和实践基础。