类固醇激素受体起始密码子区突变位点报告基因系统的构建

目的构建含有类固醇激素受体(VDR)起始密码子区突变序列的双荧光素酶报告基因系统。方法以人肝组织总RNA为模板应用RT-PCR方法扩增出VDR cDNA基因序列全长并克隆于T载体后酶切再与空载体pcDNA3.1(-)B-myc/his连接形成重组载体;测序验证后与荧光素酶报告基因连接构建起始密码子区T/C突变型人VDR,以phRL-SV40质粒作为内对照共转染COS-7细胞,设1,25(OH)2VD3不同浓度点进行干预后,化学发光法检测荧光强度。结果人VDR基因起始密码子区突变重组质粒测序验证与Genbank完全相同。通过双荧光素酶报告基因分析系统检测,1,25(OH)2VD3干预组荧光素酶活性数值显著升高,差异有统计学意义(P0.05),表明人VDR起始密码子区突变重组体在COS-7细胞中存在转录激活能力。结论成功构建了含有起始密码子区突变的报告基因载体,为VDR有关的药物代谢异常、肿瘤易感性提供机制性指导。     

胰升糖素受体基因变异与2型糖尿病的关系

目的探讨中国人２型糖尿病与胰升糖素受体（ＧＣＧＲ）基因４０号密码子的错义突变（Ｇｌｙ４０Ｓｅｒ）是否存在关联。方法运用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）分析方法在２００例无亲缘关系之中国云南昆明地区汉族人（２型糖尿病患者１２０例,健康对照者８０例）中对ＧＣＧＲ基因Ｇｌｙ４０Ｓｅｒ突变进行检测。结果本文所有研究对象中无论是２型糖尿病患者还是健康对照者均无一例存在ＧＣＧＲ基因Ｇｌｙ４０Ｓｅｒ突变,其ＧＣＧＲ基因４０号密码子的基因型均表现为Ｇｌｙ４０／Ｇｌｙ４０之纯合子,Ｇｌｙ４０和Ｓｅｒ４０等位基因频率均分别为１和０。２型糖尿病患者与健康对照者无任何差异。结论在中国云南昆明地区的汉族人中,ＧＣＧＲ基因Ｇｌｙ４０Ｓｅｒ突变与２型糖尿病不存在任何关联     

P21~(WAF1/CIP1)基因第31密码子多态性与宫颈鳞癌易感性

<正>p21WAF1/CIP1(简称p21)基因是细胞周期依赖蛋白激酶抑制因子,在P53基因调控的G1关卡中发挥直接的作用。以往的研究显示p21基因第31密码子多态性与乳腺癌、胃癌、软组织肉瘤、肺癌、头颈部的鳞癌及宫颈腺癌之间存在着一定的联系。在该基因的第31位密码子存在着多态性,即Ser到     

蛋白质全盛活动挂图的制作与使用

蛋白质的合成是根据mRNA的遗传信息，将氨基酸聚合成多肽的含有多个步骤的复杂过程，是教学中的难点。在以往的教学中，我们利用挂图来演示这个动态过程。但普通挂图还不够直观，同时，由于画面过多，学生容易分散注意力和产生畏难情绪，教学效果不佳。为此，我们通过摸索设计并制作了活动挂图，改善认知途径，突出主要难点，大大促进了学生对知识的理解与掌握，减轻了教师的课堂负担。该教具设计简单，构思独特，取材、制作、携带和演示都很方便，且成本低廉。１材料准备需白纸板２张（１１０cm×８０cm），白布半尺，白色尼龙粘扣若干（…     

甘露糖结合凝集素基因54号密码子多态性与川崎病易感性的研究

目的　探讨甘露糖结合凝集素 (MBL)基因第 5 4号密码子多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系。方法　应用聚合酶链反应 限制性内切酶片段长度多态性分析 ,对16 0例中国汉族健康儿童及 95例川崎病患儿的MBL基因多态性进行检测。结果　 ( 1)中国汉族健康儿童MBL基因多态性分布与文献报道的香港华人及高加索人种接近 ,无统计学差异。( 2 )川崎病患儿GAC等位基因频率高于健康对照组 ( 0 2 5 8vs 0 138,P <0 0 1) ,而GGC等位基因频率低于健康对照组 ( 0 74 2vs 0 86 2 ,P <0 0 1)。GAC型等位基因与中国汉族儿童川崎病密切相关 [OR =2 18,95 %CI(OR值的 95 %置信区间 )为 1 38～ 3 4 4 ,P <0 0 5 ]。 ( 3)在川崎病患儿中 ,GAC型等位基因携带者其病史有前驱感染史者多于GGC纯合子 (P <0 0 1)。结论　川崎病发病受遗传背景的影响 ,与MBL第 5 4号密码子基因多态性密切相关     

引物延伸预扩增法应用于β-地中海贫血患者胚胎植入前遗传学诊断--附一例报告

目的 探讨对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的方法。方法 两对夫妇双方均分别为密码子41-42(-TCTT)及插入序列(IVS)-Ⅱ654(c→T)突变杂合子,在本中心进行超排卵和体外受精-胚胎移植治疗,胚胎活检后应用全基因组扩增技术及反向点杂交进行胚胎PGD,根据诊断结果选择健康的胚胎移植入子宫。结果 2例患者共获卵35个,受精率为87％,共活检胚胎16个,获卵裂球25个,单卵裂球总扩增效率为84％,等位基因脱扣率为15％。2例患者共移植5个胚胎,1例获得妊娠,已分娩健康双胎。结论 应用引物延伸预扩增技术可对β-地中海贫血进行PGD,达到优生的目的。     

遗传密码轮——遗传密码表的另一表达方式

给出以树木年轮的方式来描述“三联体”密码子的组成以及遗传密码与氨基酸之间、氨基酸三字母代号与单字母代号之间的对应关系,被称为“遗传密码轮”。同时还提供了E.coli在蛋白质翻译过程中某些氨基酸的“偏爱”密码子。与既往使用的遗传密码表相比,遗传密码轮具有简捷、利于查看的特点,制成的电脑课件能明显提高课堂教学效果。     

密码子优化提高狂犬病病毒CTN-1株核蛋白在大肠埃希菌中的表达

目的:获取具有生物活性的狂犬病病毒核蛋白在大肠埃希菌表达系统中高效表达。方法:实验使用密码子优化技术重新编码狂犬病病毒CTN-1株核蛋白基因,人工合成全长基因并克隆至pET-43.1a表达载体,在大肠埃希菌BL21(DE3)株中诱导表达,并使用Western blot检测其反应原性。结果:诱导后SDS-PAGE分析显示...     

睾酮5-α还原酶Ⅱ基因多态性与影响前列腺癌预后因素关系的研究

目的探讨睾酮5-α还原酶Ⅱ(SRD5A2)基因多态性与影响前列腺癌预后因素的关系。方法对112例前列腺癌患者(前列腺癌组)与89例前列腺增生患者(前列腺增生组)的SRD5A2基因89密码子亮氨酸替代缬氨酸(V89L)及49密码子苏氨酸替代丙氨酸(A49T)多态性位点进行酶切鉴定,了解V89L及A49T基因多态性分布情况的差异,及基因多态性与前列腺癌患者的年龄、血游离前列腺特异抗原(PSA)、总PSA、游离PSA／总PSA值、Gleason评分、临床分期的关系。结果前列腺癌组与前列腺增生组V89L和A49T基因频度风险无显著性差异(分别为0.040与0.045,0.308与0.399,x2值为0.047、3.606,P均>0.05)。前列腺癌组AT TT基因型患者的发病年龄[(65±9)岁]明显低于AA基因型者[(71±7)岁](P=0.03),Gleason评分平均水平明显高于AA基因型(P=0.015)。VV和VL LL基因型各评价预后指标差异无显著性。分段评价PSA水平、Gleason评分、临床分期、年龄,均与两种基因型无相关性。结论AT TT基因型前列腺癌患者的预后可能较差,VL LL基因型与预后无明显关系。