建立只标记加成碱基的^32P后标记法以用于检测致癌物—DNA加成物

本文报道建立~(32)P后标记方法(~(32)P-Postlabeling Method)以用于检测致癌物-DNA加成物。其基本原理:用核酸酶P1(Nu.P1)完全消化DNA,释出5′单磷酸脱氧核苷(pN),而加成的碱基(Xi),则释出5′磷酸二脱氧核苷(pXipN);经前列腺酸性磷酸酶(PAP)作用后,分别生成N和XipN,然后经T_4多聚核苷酸激酶(PNK)作用,将[γ-~(32)P]ATP的~(32)P转移XipN的5′末端上,生成标记*pXipN而N不被标记。经聚乙烯亚胺(PEI)纤维素薄层纯化、分离和放射自显影,则可确定已加成的碱基,若DNA量已知,则可进行定量分析。在人羊膜上皮细胞FL中,适量苯并(a)芘[B(a)P]处理24b后,可分离到4个加成物斑块,其总相对标记量(Relative Adduct Labeling,RAL)有剂量依赖性关系。     

药物构效关系研究与药物设计中常用计算机软件

分子力学、量子化学和分子图形学是研究有机药物分子电子特性、空间性质及其与受体相互作用的有力工具。现扼要介绍国内外较常用的量子化学和分子力学及分子图形学有关计算机程序的应用特性。     

多种分子形式芳香基酰胺酶的分离及其临床应用

对肝病患者血清芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）的不同分子形式进行了分离和定量研究，发现在正常人、急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者中可分出ＡＡＤ３种组分，肝癌患者除出现这３种组分外，还可见亚组分出现。ＡＡＤ谱型正常人以ＡＡＤ－１为主；急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者ＡＡＤ－１减少，ＡＡＤ－２和ＡＡＤ－３增加；肝癌患者则ＡＡＤ－１明显减少，ＡＡＤ－３显著升高。显示ＡＡＤ谱型分析有助于肝病的诊断或鉴别诊断。     

粘附分子在小儿哮喘中的作用机制

粘附分子分为三类：免疫球蛋白超族，整合素族和选择素族。其中免疫球蛋白超族中的ＩＣＡＭ－１，ＩＣＡＭ－２，ＶＣＡＭ－１在内皮细胞表面表达，与哮喘密切相关，在变应原剌激后，分别与炎症细胞上的配体结合，参与炎症细胞的跨内皮转移。本文阐述了粘附分子在哮喘中的作用机制主要是粘附分子参与了多种炎症细胞的粘附和跨内皮转移，使炎症细胞粘附到支气管内皮细胞而引起气道高反应。为我们用分子免疫学治疗哮喘提供了新途径。     

精神分裂症患者血中分子物质研究

测定１８１例Ⅰ型及１０５例Ⅱ型精神分裂症患者血浆中分子含量，并观察了其中４５例Ⅰ型病人治疗前后血浆中分子含量变化。结果发现Ⅰ型病人血浆中分子明显高于正常人，而Ⅱ型病人则与正常人无明显差别；Ⅰ型病人治疗后血浆中分子明显降低。推测精神分裂症患者血浆中分子含量可能与Ｄ２受体有关，并受ＤＡ功能影响。     

药物-受体作用的相互适应关系

药物-受体相互作用是复杂的,药物和酶的作用也与之类似,任何结构参量与活性之间的线性关系仅仅存在于一定范围之内,每个结构因素的某些微小变化都可能引起药理性质的明显改变。讨论药物构效关系及进行新药物设计时,应该多考虑药物分子的整体统一性,不必过分强调单因素的完美线性关系。提出并讨论了药物-受体之间存在相互适应原理,其中包括:空间效应与几何互补关系、构象调节与构象改变最小原理、范德华力、油水分配系数与生物活性之间的曲线关系、药物-受体分子轨道作用的适宜量值等。     

低剂量X射线全身照射诱导小鼠脾细胞蛋白分子变化

为了深入了解辐射对细胞蛋白质表达的影响，采用双向电泳技术检测低剂量Ｘ射线全身照射诱导小鼠脾细胞核及胞浆蛋白分子变化。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线照射后４ｈ细胞核出现４个新蛋白点；２个增强蛋白点。照射后细胞浆出现６个新蛋白点；１个增强蛋白点和３个减弱蛋白点。正常细胞浆的３个蛋白点在照射后消失。正常细胞浆中２个蛋白点在照射后分别减弱和消失，而在细胞核中增强和出现，提示低剂量辐射促进细胞核及细胞浆大分子物     

心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅵ．一种新的体内基因转移方法

将医用缝合线浸泡在质粒ＤＮＡ溶液中，然后缝合在大鼠股四头肌上，可以观察到外源基因在肌肉组织中高效、稳定地表达，其表达量高于磷酸钙共沉淀和ＤＮＡ沉淀块埋植法，较肌肉直接注射法表达量高１０倍左右。     

人睫状神经营养因子基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

人睫状神经营养因子（ＣｉｌｉａｒＮｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃＦａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）是一种能促进包括交感神经、副交感神经及感觉神经元在内的各种外周神经元和中枢神经元生长及分化的神经生长营养因子，它能特异地促进有丝分裂后的神经元的分化，并具有支持神经元存活的营养作用，因而它有可能成为治疗帕金森氏病、早老性痴呆和肌萎缩性侧索硬化等神经性疾病的有效药物［１］。本文通过反转录ＰＣＲ获得ＣＮＴＦ的ｃＤＮＡ基因，并构建了重组表达质粒，在大肠杆菌中获得了高效表达，为临床应用奠定了基础。１　材料和方法１．１　菌株和…