产ESBLs大肠埃希菌磺胺耐药基因sulⅠ的检测与分析

产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum b-eta-lactamases,ESBLs)是由质粒介导的能赋予细菌水解青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类抗生素的一类β-内酰胺酶,其水解活性能被β-内酰胺酶抑制剂所抑制.大肠埃希菌是医院感染常见的病原菌,而产ESBLs大肠埃希菌在临床分离率逐年升高,其对β-内酰胺酶类、氨基糖苷类和磺胺类等常用抗菌药物表现出多重耐药.在对肠杆     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析及其产酶的危险因素调查

目的探讨超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌产生的因素,为防止其传播及治疗提供依据.方法依据美国2005年临床和实验室标准协会(CLSI)和2003年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法(KB法)及VITEK-Jr仪器法,收集民航总医院和北京隆福医院2003年1月至2005年12月分离的住院患者不同标本的大肠埃希菌155株,对其进行耐药性检测;随机选择大肠埃希菌感染患者129例,其中产ESBLs者41例,不产ESBLs者88例,对其进行治疗用药的溯源调查.结果3年内在所测的155株大肠埃希菌中,检出产ESBLs大肠埃希菌59株,检出率38.1%;所有产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培喃和阿米卡星敏感,对呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁的耐药率低于10%,且3年的逐年耐药率无太大变化.连续使用抗生素时间越长、连续用药次数越多、使用三代头孢、联合用药和多次更换用药均易造成细菌产ESBLs.结论产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁的敏感率高于90.0%,对其他抗生素具有较高的交叉耐药性和多重耐药性.抗生素应用的时间、次数、种类和联合用药等因素可使产ESBLs大肠埃希菌的检出率增加.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的：分析临床大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及产ESBLs细菌中头孢菌素酶的存在情况。方法：质粒接合实验分析耐药性转移，根据超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶各种已知基因序列设计引物，进行聚合酶链反应分析，确定超广谱β-内酰胺酶的基因型分布以及头孢菌素酶基因。结果：80.4％的菌株质粒接合实验成功，66％的菌株为TEM基因型，14％的菌株为SHV基因型，10％的菌株为CTX-M型。2株菌同时存在AmpC酶。TEM阳性的大肠埃希菌RAPD带型呈多样性。结论：临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性可以发生转移，ESBLs以TEM基因型为主，部分菌株为SHV、CTX-M型。同一菌株内可以产生2种不同基因型的超广谱β-内酰胺酶。产ESBL菌株不是以细菌克隆播散为主。     

大肠埃希菌对阿莫西林／克拉维酸耐药机制的研究

目的探讨大肠埃希菌对阿莫西林／克拉维酸的耐药特点和机制,从而为临床合理用药及减少耐药的发生和耐药基因传播提供实验研究依据。方法将对氨苄西林／舒巴坦耐药的大肠埃希菌544株,随机选取276株进行阿莫西林／克拉维酸纸片的筛查,对筛出的耐药菌株采用琼脂对倍稀释法进行MIC值测定和PCR扩增分析。对符合耐酶抑制剂β-内酰胺酶耐药表型的大肠埃希菌进行TEM型β-内酰胺酶基因的克隆表达。采用多重PCR技术对耐阿莫西林／克拉维酸大肠埃希菌进行TEM、SHV、OXA型三种β-内酰胺酶的筛查。结果TEM型46株,SHV型1株,0xA型6株,TEM型和SHV型均阳性1株,TEM型和OXA型均阳性5株。产TEM型β-内酰胺酶中TEM-1型最常见,耐酶抑制剂TEM型β-内酰胺酶（IRT）未发现。结论TEM-1型广谱酶的高产是华西医院大肠埃希菌对阿莫西林／克拉维酸耐药主要机制,本研究首次在西南地区发现OXA-1,是造成耐药的重要原因。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

重症监护病房中产超广王谱β-内酰胺酶革兰阴性细菌致院内感染的临床调查

目的分析重症监护病房(ICU)中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌所致院内感染的临床特点及细菌耐药的情况.方法收集2002年5月～2003年2月ICU临床分离的革兰阴性杆菌共计380株,用酶抑制剂增强纸片扩散试验确证产ESBLs细菌,琼脂扩散法测定其对14种抗菌药物的敏感性.结果在380株革兰阴性杆菌中分离出产ESBLs革兰阴性杆菌69株(18.2%),依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌和阴沟肠杆菌.感染部位主要分布于下呼吸道和外科手术部位.药敏结果显示上述产ESBLs革兰阴性杆菌均对亚胺培南高度敏感.结论产ESBLs革兰阴性杆菌已成为ICU中院内感染的主要致病菌之一,亚胺培南对其仍具有显著的抗菌活性,临床工作应加强对此类细菌感染的重视.     

ICU产ESBLs革兰阴性菌感染、耐药及防治

耐药菌株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是革兰阴性细菌耐β-内酰胺类抗菌素的主要原因。近年来,国内外学者对其研究较为深入,现对ICU产ESBLs革兰阴性菌感染的耐药、检测及防治等情况进行分析。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药分析

超广谱β内酰胺酶(ESBLs)属于β内酰胺酶的一种类型,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是最常见的产ESBLs的酶细菌,这些细菌不仅对β内酰胺酶抗生素耐药,同时对其他种类抗生素耐药,从而给临床治疗带来了极大的困难,因此产生ESBLs细菌感染已成为目前全球共同关注的重要感染问题之一[1].现对我院近3年来临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性进行分析,以指导临床合理用药.     

氨苄西林耐药流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分析

目的了解深圳市宝安区氨苄西林耐药流感嗜血杆菌β-内酰胺酶基因分布特征,为临床合理用药提供依据。方法用K-B法检测氨苄西林耐药性,头孢硝噻酚纸片法检测β-内酰胺酶,TEM型和ROB-1型基因采用PCR扩增和序列分析法。结果检出62株氨苄西林耐药流感嗜血杆菌,其中60株β-内酰胺酶阳性。60株β-内酰胺酶阳性株中58株检出TEM-1型基因,占96.7%,1株检出ROB-1型基因,占1.7%,1株未检出基因型。结论产TEM-1型β-内酰胺酶是流感嗜血杆菌主要耐药机制,但β-内酰胺酶阴性氨苄西林耐药株的出现更值得关注。     

金属β-内酰胺酶绿脓杆菌的检测及其耐药性探讨

目的　探讨建立金属 β -内酰胺酶的常规过筛检测方法 ,为临床合理选用抗生素提供确切的依据。方法　以EDTAK2 为酶抑制剂 ,PIP、IPM、CTX、CAZ、CRO为底物 ,用协同法检测金属β -内酰胺酶 ,并用K -B法对 80株绿脓杆菌进行 9种抗生素的药敏试验。结果　在 80株绿脓杆菌中检测到产金属 β -内酰胺酶为 9株。对PIP、IPM、CTX、CAZ、CRO、CIP、AN耐药率分别为 88.9%、4 4.4 %、55.6 %、55.6 %、55.6 %、4 4.4 %、33.3% ,较不产酶绿脓杆菌耐药率高出 4 8.1 %、36 .0 %、2 7.6 %、30 .2 %、2 4 .6 %、1 7.6 %、1 5.0 %。结论　金属 β -内酰胺酶绿脓杆菌对多种抗生素有很高的耐药率。用协同法检测革兰氏阴性杆菌中的金属 β -内酰胺酶简单方便 ,易于推广 ,适用于对金属β -内酰胺酶革兰阴性杆菌的初步鉴定