基于移动互联网的前庭康复训练指导平台的开发与应用

前庭康复训练是治疗前庭疾病、改善眩晕症状的重要手段。缘于此类患者数量较多、训练场地不足、康复师缺乏以及医疗用费等因素,前庭康复训练在各级医院的开展受到限制。随着智能手机和移动互联网的普及使用,居家康复锻炼、远程指导成为可能。基于B/S 模式结构进行设计,研发成功“前庭康复训练远程指导平台”,支持智能手机移动终端无线接入,分为IOS及安卓版本。该平台的建立为患者居家进行前庭康复功能锻炼远程指导、疗效评估及随访等提供更为便捷、顺畅有效的途径,提高前庭康复的效率和依从性,并降低前庭康复的技术壁垒、场地限制以及人力成本。论文对该平台的功能设计、相关技术实现以及运行效果论述。     

慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率

目的在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)慢病毒载体中引入三种不同的内部启动子来驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达,初步比较内部启动子的效率。方法慢病毒载体三质粒系统中,转移质粒的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接方法和内切酶酶切鉴定。磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T包装细胞。病毒滴度的测定采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数GFP阳性细胞。通过荧光显微镜观察绿色荧光的表达情况判断启动子的效率。结果构建了含PPT元件和含不同内部启动子和GFP的质粒。转染293T细胞后均观察到较强的绿色荧光。表达荧光的293T细胞数以巨细胞病毒(CMV)启动子最多,肝细胞特异性启动子(LSP)较少,泛醌启动子(PUB)介于两者之间。CMV为内部启动子的慢病毒载体滴度5×106I U/ml,其他二种启动子的滴度(1~2)×105I U/ml。结论在所选择的三种内部启动子中,CMV启动子的效率最高,LSP较强,PUB介于两者之间。     

增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及表达

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记的原核表达栽体,并观察EGFP基因在大肠杆菌中的表达情况.方法 据已知的EGFP基因序列,设计引物,并引入Nde Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.采用PCR技术从含有EGFP的质粒pEGFP-C1中克隆EGFP编码序列;将其亚克隆入表达载体pTWIN1,得到以EGFP为标记的原核表达载体pTWIN-EGFP.转化大肠杆菌ER2566菌株,IPTG诱导EGFP基因表达.结果 经过IPTG诱导后,细菌培养物在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光.结论 成功构建了原核表达载体pTWIN-EGFP,为应用EGFP作为报告基因和筛选标记奠定了实验基础.     

蒙药药理学网络课程建设

此文论述了网络课程在教育领域的发展现状、前景,探讨了网络课程教学在蒙药药理学教学中的必要性,以蒙药药理学网络课程设计与建设作为研究内容,分析了蒙药药理学网络课程的形成及影响。随着网络信息技术的不断发展和广泛应用,各高等院校都已经意识到了数字化教育在培养学生创新思维能力、促进学生学习积极性和自主学习能力方面,有着不可代替的作用。因此,蒙药药理学网络课程应设置理论教学、实验教学录像、在线测试、课程答疑、蒙药药理学研究新进展等多种模块,从而将其建设成一个提高师生信息化水平、有利于学生自主学习、以学生为主的课程。但网络课程不能完全替代传统课堂教学,所以在传统课堂教学的基础上结合网络课程,通过系统性的教学设计,将课堂教学和网络课程教学有机结合形成一种混合式教学模式。这样学生既可以温习课堂教学内容,又能拓展知识面,不仅发挥了网络课程教学的优势,还提高了教学质量和教学效果。     

布渣叶查耳酮合酶基因全长cDNA克隆及其表达模式分析

目的克隆布渣叶查耳酮合酶基因(Mp CHS)全长c DNA,并对其在不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式进行分析。方法以布渣叶叶片总RNA逆转录合成c DNA为模板,根据其转录组数据设计特异引物序列,PCR扩增Mp CHS基因全长c DNA,经质粒连接、转化、扩培,挑选阳性克隆测序、分析并构建原核表达载体。同时,采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)对Mp CHS基因的表达模式进行分析。结果成功克隆得到Mp CHS基因全长c DNA(Gen Bank:KY472608)。生物信息学分析表明其开放阅读框为1 176 bp,编码含391个氨基酸的蛋白,其相对分子质量为42 700,理论等电点6.11,具有CHS家族蛋白3个保守的功能活性位点(165 C、304 H和337 N)和特征多肽标签序列RLMMYQQGCFAGGTVLR和GVLFGFGPGL。系统进化树分析发现Mp CHS与可可、陆地棉等木本植物的亲缘关系比较近。RT-q PCR结果表明,Mp CHS基因在不同部位均有表达,在叶片中的表达量随着生长过程逐步降低。结论首次克隆得到Mp CHS基因,并分析了Mp CHS基因在布渣叶不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式,为Mp CHS基因的原核表达和功能验证奠定了基础,也为进一步解析布渣叶黄酮类生物合成途径提供了参考。     

国家中医临床研究基地（湖北）中药新药研发平台建设

从国家中医临床研究基地（湖北）的建设需要出发,创立中药新药研发平台,服务于肝病等重点病种的医院制剂和新药开发。经过5 年建设,初步形成了具有创新力的中药新药研发平台,开发了一些特色中药制剂,促进了重点病种的临床服务能力,产生了较好的经济效益和社会效益。本文就中药新药研发平台建设的成果、经验体会及展望进行探讨。     

红色荧光蛋白和荧光素酶双报告基因转基因小鼠的建立

背景与目的:活体动物体内光学成像(optical in vivo imaging)主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP、Cyt及dyes等)进行标记,利用一套非常灵敏的光学检测仪器,能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为,生物发光成像具有高的灵敏度和特异性,同时生物发光信号可用于精确定量,而荧光成像具有方便、便宜、直观、标记靶点多样和易于被大多数研究人员接受的优点。本研究基于慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和Luc双报告基因转基因小鼠(即RL转基因小鼠),将这两种技术融为一体。方法:制备携带RFP和Luc基因(简写RL基因)的慢病毒,然后将携带RL基因的慢病毒注入小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔鼠,应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等在蛋白和DNA水平上筛选和鉴定,并获得RL转基因小鼠。结果:移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎125枚给6只假孕母鼠,其中4只假孕母鼠怀孕,共生仔鼠20只;利用小动物活体成像仪检测RFP和Luc表达,在蛋白水平证实20只F0代中,3只高表达RFP和Luc;DNA水平检测证实,3只RFP和Luc阳性的小鼠基因组中确实整合有外源转基因RL,预示基因型鉴定结果很好验证了小动物活体成像仪筛选和鉴定结果。此外,RL转基因首建鼠基因组中整合的RL转基因可稳定遗传至下一代,并能正常表达。RL转基因小鼠主要脏器均可见红色荧光和Luc信号,但不同脏器间荧光和Luc强度有差异。结论:成功制备RL双报告基因转基因小鼠,为后续研究干细胞在肿瘤发生、发展和转移中的作用和造血重构等提供双报告基因标记的各种移植用供体细胞,并对此供体细胞及其在体内衍生的细胞进行灵敏的非损伤、实时可视化体内跟踪。     

下调Cyclophilin A对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长和转移的影响

目的 通过RNA干扰技术,研究亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)基因对喉鳞癌裸鼠移植瘤模型在肿瘤生长和肿瘤转移方面的影响.方法 构建沉默CypA基因慢病毒颗粒,转染Hep2喉癌细胞,将15只裸鼠完全随机分为3组,分别为空白对照组、阴性对照组、基因沉默组,每组5只,建立喉鳞癌裸鼠移植瘤转移模型,观察肿瘤生长情况及淋巴结转移情况.PV二步法免疫组化检测CypA、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN、CD147)、细胞外基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肿瘤组织的表达,RT-PCR检测CypA、CD147、MMP-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测CypA、CD147、MMP-9蛋白的表达水平.结果 基因沉默组肿瘤体积较空白对照组、阴性对照组小,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化观察肿瘤为中分化鳞状细胞癌,CypA主要表达在细胞质,CD147主要表达在细胞膜,MMP-9主要表达在肿瘤间质;在mRNA水平和蛋白水平基因沉默组CypA、CD147、MMP-9的表达都明显降低(P＜0.05).结论 下调CypA可以通过调节CD147、MMP-9的表达水平抑制喉癌的生长,延缓肿瘤转移.     

速度向量成像技术在糖尿病性心肌病中的应用

速度向量成像技术（VVI）是分析局部心功能的超声新技术。与以往超声方法相比,速度向量成像技术特有的参数能对局部心功能进行量化,从而对早期心功能改变做出评价。随着糖尿病发病率的日益增高,其严重并发症糖尿病性心肌病的发生也随之增加。糖尿病性心肌病临床表现无特异性,以心力衰竭为主要表现,因此运用速度向量成像技术对糖尿病性心肌病做出早期判断及心功能评价。     

医学院校生物科学专业课程体系建设探讨

探讨医学生物科学专业课程构架：课程设置以医学基础知识为奠基,突显最新生命科学领域,注重综合课程,加强医学分子生物学技能训练,为社会培养生命科学领域复合、实用型人才。