HPLC法同时测定龙眼花中3 种黄酮类化合物含量

目的：建立HPLC 测定广西不同产地龙眼花药材中槲皮素、木犀草素和山奈素含量的方法。方法：Hypersil C18 色谱柱（4.6 mmx250 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸（47:53）,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长360 nm。结果：槲皮素、木犀草素和山柰素分别在0.18~2.88 μg、0.059~0.944 μg 和0.024~0.384 μg 之间呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率分别为100.06%、99.77%、98.67%,RSD 分别为1.72%、1.18%、1.99%（n=9）。结论：该方法简便可靠,快速,重复性好,可用于龙眼花药材的质 量控制。     

槲皮素对人骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的:研究槲皮素(quercetin,Qu)对骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300增殖和凋亡的作用及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖活性;Annexin V/PI染色检测凋亡;线粒体膜电位及细胞色素C的Western blot检测线粒体凋亡途径;持续活化Akt瞬时转染、Western blot检测Akt通路相关蛋白表达水平变化。结果:槲皮素可明显抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300生长,并呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI可明显检测到细胞凋亡;进一步发现其作用机制是通过下调线粒体膜电位,促进细胞色素C向胞浆释放及抑制Akt磷酸化来实现。结论:槲皮素可显著抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与线粒体凋亡途径及抑制Akt活性有关。     

火棘不同药用部位中槲皮素含量的比较

目的:建立反相高效液相色谱法测定火棘中槲皮素含量的方法,并比较火棘不同部位中槲皮素的含量.方法:采用90％甲醇-25％盐酸(4∶1)为溶剂提取样品,利用反相高效液相色谱法测定火棘不同部位样品中槲皮素的含量.色谱柱Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1％磷酸水溶液(40∶ 60),流速1.0 mL· min-1,检测波长360nm,柱温25℃.结果:槲皮素在0.048 5 ～ 1.552 0μg线性关系良好,平均回收率为96.18％.结论:火棘不同部位中槲皮素的含量差异较大.     

槲皮素对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

目的:观察槲皮素( quercetin)对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞凋亡的影响,探讨其对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路的影响.方法:采用MTT法检测槲皮素对SMMC-7721细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测槲皮素对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路凋亡相关蛋白表达的影响.结果:槲皮素抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖作用明显,且呈浓度和时间依赖性.顺铂和槲皮素40,80,160,320 μmol·L-148 h抑制率分别为62.19％,25.47％,27.18％,36.96％,51.28％.流式细胞术结果提示,槲皮素80,160,320μmol ·L -可使SMMC-7721肝癌细胞周期阻滞于G0/G1期.Western blot凋亡相关蛋白表达检测表明,药物组AKT的表达受抑制,PTEN,Caspase-9蛋白的表达率随着药物浓度的增加而增加.结论:槲皮素能诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡,其机制可能是使肝癌细胞SMMC-7721周期阻滞于G0/G1期,PTEN的过表达抑制AKT活化,激活Caspase-9从而促进细胞凋亡.     

HPLC法测定傣药雅路哈中槲皮素的含量

目的:建立傣药雅路哈(接骨1号)中槲皮素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(52∶48);检测波长:360nm;流速:1.0mL/min;柱温:30℃。结果:槲皮素在10.56～528μg范围内线性关系良好(r=0.9999),回收率98.21%,RSD为l.87%。结论:为傣药雅路哈(接骨1号)质量标准的研究,提供准确、可靠的方法。     

六种僵蚕炮制品的薄层鉴别与含量测定研究

目的:考察不同炮制方法对僵蚕中草酸铵、槲皮素和山奈酚的含量影响。方法:采用薄层色谱法对僵蚕6种炮制品进行薄层鉴别研究;采用高效液相色谱法测定各炮制品中草酸铵、槲皮素和山奈酚的含量。结果:僵蚕各炮制品的薄层色谱未见明显差异,但僵蚕经过炮制后体内草酸铵含量都有不同程度的下降。其中糖麸炒僵蚕的含量最低,而麸炒僵蚕中草酸铵含量下降的最少。僵蚕经过炮制后所含槲皮素与山奈酚的含量变化不大,与生品较为接近,但姜炙僵蚕与姜麸炒僵蚕中槲皮素与山奈酚的含量降低得较为明显。结论:不同炮制方法对僵蚕的化学成分含量有一定程度的影响,但影响幅度不尽相同。并且,不同的炮制方法功效各异,各有所长。为提高临床疗效和便于患者服用,可根据需要对其炮制方法灵活选择。     

载槲皮素-粉防己碱纳米凝胶的制备、表征与体外评价

[目的]制备一种纳米凝胶制剂以提高槲皮素及粉防己碱的生物利用度及抗氧化性。[方法]通过反相乳化法制备载槲皮素-粉防己碱纳米凝胶(QU-TE-NP);通过粒径与Zeta电位测定,透射电子显微镜(TEM),差示扫描量热分析(DSC)以及傅里叶变换红外光谱(FT-IR)进行表征分析;高效液相法测定两种药物的载药率及包封率;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除实验比较槲皮素及该纳米凝胶的体外抗氧化性。[结果]该纳米凝胶通过钙离子交联,平均粒径为(38.86±1.81)nm,Zeta电位为(-15.9±4.1)m V,槲皮素和粉防己碱的载药率分别为(0.98±0.04)%和(2.75±0.07)%,包封率分别为(96.80±1.10)%和(94.80±0.90)%。纳米凝胶的抗氧化性明显优于槲皮素单体。[结论]纳米凝胶体系的制备可提高槲皮素及粉防己碱的水溶性,并增强其抗氧化能力。     

Protective effects of quercetin treatment in a pristane-induced mouse model of lupus nephritis

Introduction: Lupus nephritis (LN) is one of the most severe complications of systemic lupus erythematosus. As murine models of LN are valuable tools to better understand its pathophysiology and to search for new effective treatments, we investigated the effects of the bioflavonoid quercetin on pristane-induced LN mice through histomorphological analyses.

Methods: Immunofluorescence and biochemical assays were used to evaluate the expression of markers of inflammation (interleukin-6, IL-6; tumour necrosis factor-α, TNF-α), oxidative stress (catalase, CAT; superoxide dismutase 1, SOD1; thiobarbituric acid reactive substances, TBARS), apoptosis (Bax), and fibrosis (transforming growth factor-β1, TGF-β1). Glomerular and tubular ultrastructure was analysed, and tissue messenger RNA of podocin, podoplanin and α3β1-integrin were quantified using the real-time polymerase chain reaction.

Results: Pristane-induced LN mice showed severe kidney injury, characterized by increased proteinuria, glomerular mesangial expansion and inflammation, high expression of the pro-fibrotic, apoptotic and prooxidant markers and reduction of antioxidants. In the kidney ultrastructure, foot process (FP) effacement, apoptotic mesangial cells and abnormal mitochondria with disrupted cristae were observed, along with suppressed tissue mRNA of podocin, podoplanin and α3β1-integrin. Treatment with quercetin in the pristane-induced LN mice model was nephroprotective, decreasing proteinuria levels and significantly lowering tissue expression of IL-6, TNF-α, TGF-β1, Bax and TBARS. Simultaneously, quercetin significantly increased CAT and SOD1 expressions in these mice. In addition, it was observed improvement of the kidney ultrastructure, and tissue mRNA of podocin, but not podoplanin and α3β1-integrin, was restored to the levels found in the control mice.

Conclusion: In conclusion, these findings provide experimental evidence of the renoprotective effects of quercetin in the pristane-induced LN mice model. We suggest that quercetin effectively ameliorates the kidney damage caused by pristane, a bioflavonoid to be further evaluated as a new therapeutic strategy in this disease.     

头颈部鳞状细胞癌细胞热疗后HSP70/HSP90的表达规律及其抑制对热疗疗效的影响

目的探讨口腔鳞状细胞癌（简称鳞癌）CA9-22细胞系热疗后HSP70/HSP90的表达规律及抑制HSP70/HSP90表达对头颈部鳞癌热疗的影响。方法①对体外培养的口腔鳞癌CA9-22细胞,恒温水浴42℃热休克2h,荧光定量PCR检测HSP70/HSP90的基因表达规律,采用Western-blot检测蛋白表达量的变化;②流式细胞术检测热休克前、后2、4、6、8、12、24h细胞的凋亡情况,观察在热疗前应用槲皮素、格尔德霉素及联合对HSP70/HSP90的抑制后对热疗的增敏效果。结果①42℃热疗后CA9-22细胞HSP70/HSP90表达在基因及蛋白水平上均有明显升高,4h达到高峰,8h后开始回落,24h接近正常;②热疗前使用槲皮素及格尔德霉素处理,凋亡细胞比例明显增加,联合处理组增加更为明显。结论 HSP70/HSP90在CA9-22细胞内的表达在热疗后迅速升高,在热疗前联合抑制HSP70/HSP90的活性,可以有效增加热疗敏感性。     

槲皮素的抗癌作用

槲皮素具有较强的抗癌活性，从清除氧自由基、抑制癌细胞增殖、对抗到癌因子和抗癌经增敏作用等几个方面，简要介绍槲皮素抗癌作用的研究情况。