Experimental study on the antitumor effect of mouse B7-1 gene

ＴｗｏｓｉｇｎａｌｔｈｅｏｒｙｆｏｒＴｃｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｐｒｏｖｉｄｅｄａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｔｕｍｏｒｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ［１－２］．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙｍｏｌｅｃｕｌｅｇｅｎｅｉｎｔｒａｎｓｆｅｃｔ...     

The construction ofSchistosoma Japonicum vaccine BCG-Sj26GST and its identification

Summary The expression of foreign gene,Schistosoma Japonicum 26 ku antigen (Sj26GST),in Bacillus Calmette-Guerin (BCG),Mycobacterium CM. smegmatis) andEscherichia coli (E. coli) were studied. The cDNA fragment encoding Sj26GST was amplified by PCR using plasmid pGEX, which could express Sj26GST inE. coli as template. The Sj26GST cDNA was cloned into the downstream of humanM. tuberculosis heat shock protein (hsp) 70 promoter with correct reading frame, and then the DNA fragment containing hsp70 promoter and Sj26GST gene were subcloned together intoE. coli-Mycobacteria shuttle plasmid pBCG-2000 to construct the expression shuttle plasmid pBCG-Sj26. The recombinant BCG andM. smegmatis mc²155, which were electroplated with pBCG-Sj26, could express Sj26GST and the recombinantSchistosoma Japonicum vaccine BCG-Sj26GST was made. The recombinant Sj26GST (rSj26GST) were soluble and could be observed on SDS-PAGE at molecular weight of 26 ku. The content of rSj26GST accounted for 15% and 10% of total bacterial protein in BCG andM. smegmatis respectively. The results of Western blot showed the combination of rSj26GST with antibody of GST. This project was supported by Primary Foundation of China (No. 94-Y-19), Chinese National Nature Science Foundation (No. 339480022) and Chinese Health Foundation (No. 94-1-131).     

Carrier detection and presymptomatic identification of Wilson disease in Chinese by non-isotopic linkage analysis with four short tandem repeat polymorphisms

Ｗｉｌｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ（ＷＤ）ｉｓａｎａｕｔｏｓｏｍａｌｒｅｃｅｓｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｏｆｃｏｐｐｅｒｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｗｉｔｈａｗｏｒｌｄｗｉｄｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆｂｅｔｗｅｅｎ１／５０００ａｎｄ１／３００００ｉｎｌｉｖｅｂｉｒｔｈｓ...     

重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定

构建重组人骨形态发生蛋白－２／７融合体, 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用ＤＮＡ 重组技术,将编码人骨形态发生蛋白－２ （ＢＭＰ－２） 成熟肽的０．３６ ｋｂ 基因片段与编码人骨形态发生蛋白－７ （ＢＭＰ－７） 成熟肽的０．４４ｋｂ 基因片段连接,得到重组人骨形态发生蛋白－２／７ 融合基因; 经测序鉴定后,将其克隆到表达载体ｐＢＶ２２２中,转化大肠杆菌ＤＨ５α, 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌,经４２℃诱导４～６ ｈ 后,高效表达重组人骨形态发生蛋白－２／７, 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一新的蛋白带, 分子量约２９ ｋｕ,约占菌体总蛋白的２０％ ,表达蛋白以包涵体的形式存在,经初步纯化、裂解、复性后的ＢＭＰ－２／７ 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。ＢＭＰ－２／７ 融合基因的构建和表达,可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白     

GCK,HK2基因微卫星多态标志与NIDDM的关系

应用ＰＣＲ技术对１００例ＮＩＤＤ患者和８６例正常人进行ＧＣＫ,ＨＫ２基因微卫星多态标与ＮＩＤＤＭ关系的研究。结果：ＮＩＤＤＭ患者ＧＣＫ基因中的１,１及２,２型频率均明显高于正常对照组,２,１型明显低于正常对照组;ＨＫ２３种基因型频率在两组均无差异。结果表明：ＧＣＫ基因与ＮＩＤＤＭ有关而ＨＫ２基因与ＮＩＤＤＭ无关联。     

不同转移潜能的人黑色素瘤细胞p53和MMPs基因突变的研究

目的探讨具有不同潜在转移能力的黑色素瘤细胞恶性表型的演进及其侵袭转移的机制。方法采用细胞培养,p53蛋白免疫组化,PCR－SSCP检测;酶活性分析,流式细胞术检测。结果人类黑色素瘤细胞中存在有p53基因的突变,瘤细胞表面671kDa层粘连蛋白受体（LN－R）的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为：WM451＞WM983A＞WM1341B＞WM35。MMPs的产生情况：早期WM35不产生MMPs,WM1341B仅产生72kDa（MMP－2）,不产生92kDa（MMP－9）;进展期WM983A和远处转移瘤株WM451均产生72kDa和92Kda。其侵袭、转移的潜能与其产生或诱导产生的MMPs的能力和其表面67kDaLN－R的表达水平密切相关。结论p53基因突变;MMPs的产生和细胞表面67kDaLN－R的高表达是人黑色素瘤细胞侵袭转移能力获得的关键因素。     

急性白血病患者MGMT基因突变的研究

目的研究甲基鸟嘌呤－脱氧核糖核酸－甲基转移酶（ＭＧＭＴ）基因突变与急性白血病发病的关系。方法应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对６２例急性白血病中ＭＧＭＴ基因进行了突变分析。结果ＭＧＭＴ基因突变在急性白血病中为１４．５％。结论急性白血病中存在ＭＧＭＴ基因突变,其在急性白血病的发生与发展中起到一定作用。     

nm23-H_1基因与突变型P~(53)基因在人乳腺病变组织中的表达

目的观察７６例乳腺病变组织中ｎｍ２３－Ｈ１及突变型Ｐ５３基因的表达情况,分析其与乳腺癌生物学行为及淋巴结转移的关系。方法应用ＳＰ免疫组织化学方法检测７６例乳腺病变组织中ｎｍ２３－Ｈ１及突变型Ｐ５３蛋白表达。结果ｎｍ２３－Ｈ１基因在５６例乳腺癌中表达率为４４．６４％,１０例乳腺纤维瘤均阳性,１０例纤维囊性病９例阳性,后二者均高于乳腺癌中阳性率（Ｐ＜０．００５,Ｐ＜０．０１）;Ｐ５３在乳腺癌中阳性率３５．７１％,在所有良性乳腺疾患中均阴性（Ｐ＜０．０２５）。同时发现ｎｍ２３－Ｈ１表达与乳腺癌组织分化程度及淋巴结转移呈负相关（Ｐ＜０．０２５,Ｐ＜０．０５）,与病理组织类型无关;Ｐ５３表达与乳腺癌淋巴转移正相关（Ｐ＜０．０５）,与组织类型及分化程度无关;ｎｍ２３－Ｈ１与Ｐ５３表达呈负相关（Ｐ＜０．０５）;另外,ｎｍ２３－Ｈ１表达缺失与Ｐ５３的阳性表达在乳腺癌淋巴结转移上有协同作用。结论ｎｍ２３－Ｈ１的表达缺失及Ｐ５３的阳性表达提示乳腺肿瘤恶性度高、淋巴转移潜能大,二者联合检测对乳腺癌患者预后的评价更为全面可靠。     

膀胱癌组织MDR_1基因产物P-GP_(170)表达的意义

为证实肿瘤多项耐药基因（ Ｍ Ｄ Ｒ１） 产物 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 与膀胱癌化疗失败及复发的关系,利用免疫组化方法对７２例膀胱癌进行了研究。发现膀胱癌术后丝裂霉素膀胱灌注化疗失败者的 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 阳性率及强阳性率均明显高于初发膀胱癌,并且高分级肿瘤的 Ｐ Ｇ Ｐ１７０ 阳性及强阳性表达均高于低分级肿瘤。通过本实验可以认为膀胱癌化疗效果如何与膀胱癌组织中 Ｍ Ｄ Ｒ１ 产物的量有关。