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11.
利用特异性DNA倍增技术(polymerase chain Reaction,PCR)检测t-PA cDNA基因在表达细胞基因组中的稳定性,并对所得的PCR反应产物进行了限制性内切酶片段、分子杂交和核苷酸顺序分析等方面的研究,证实了t-PA cDNA基因已插入到表达细胞染色体中。这种方法快速、简便、灵敏度和特异性高,是检测基因工程表达细胞中cDNA基因稳定整合状况的好方法。 相似文献
12.
中国人血管抑素基因的克隆及其序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆中国人血管抑素(angiostatin,ANG)基因全长并进行序列分析。方法:应用RT-PCR,将5例健康人肝脏组织ANG基因克隆到pSP71载体上,用Sanger法进行基因测序分析。结果:通过RT-PCR获得一个1141bp的扩增产物,测序发现与已报道的ANG比较,国人ANG上有3个碱基突变位点:分别为第825位C→T;第927位T→G和第1078位G→A。前两个碱基突变氨基酸未发生变化,第3个碱基突变结果使缬氨酸(Val342)改变成为蛋氨酸(Met342)。结论:克隆得到中国人ANG基因片段,其碱基和氨基酸的变化可能是人群中该基因的遗传多态现象。 相似文献
13.
本文动用自制t-PA单克隆抗体建立t-PA:Aa夹心ELISA法。结合t-PA:A、PAI:A测定,对50例正常人,87例肝病,47例冠心病和19例深静脉血栓 成患者的血浆t-PA:Ag、t-PA:A、PAI:A水平进行了研究。 相似文献
14.
Ⅱ型糖尿病血浆PAI-1、t-PA检测的意义和结果评价 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:通过对Ⅱ型糖尿病患者分组(伴血管病变组、胰岛素抵抗组、胰岛素抵抗伴血管病变组、Ⅱ型糖尿病组)检测PAI-1、t-PA抗原及活性,并计算抗原比和活性比,以评价各检测指标的临床价值。方法:采用ELISA法检测PAI-1及t-PA抗原,采用发色底物法检测PAl-1、t-PA活性。结果:189例标本总体患病组及分组后各组的PAI-1活性、t-PA活性及t-PA活性/PAI-1活性比值与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。患病组间除t-PA抗原,其余检测显示胰岛素抵抗组、胰岛素抵抗组伴血管病变组与Ⅱ型糖尿病组存在显著性差异(P<0.05)。结论:在上述检测指标中t-PA活性、PAI-1活性反映血管病变的发生较敏感,t PA/PAI-1的活性比值更具临床应用价值。 相似文献
15.
探查乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达,并比较乳腺恶性肿瘤组织与良性纤继腺瘤及正常组织中PAI-1的差异。用免疫组织化学和原位杂交的方法,确定了乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织中PAI-1的分布;用发色底物法检测组织提取液中PAI-1的活性;用图象分析的方法对组织切片上的PAI-1进行灰度定量。结果:PAI-1主要分布在乳腺正常腺上皮细胞、瘤上皮细胞和腺癌细胞的胞浆中,但恶性组织中的成纤维细胞、巨噬细胞以及癌旁纤维组织也有染色。癌组织中PAI-1的活性(P<0.001)和含量(P<0.005)均高于良性乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织。结论:PAI-1在乳腺恶性肿瘤组织中明显升高,PAI-1的检测可能为临床乳腺肿瘤的诊断、预后提供新的指标。 相似文献
16.
A M Abdel Gader A A Al-Mishari S A Awadalla N M Buyuomi T Khashoggi M Al-Hakeem 《International journal of gynaecology and obstetrics》2006,95(3):248-253
OBJECTIVE: To clarify the role played by tissue factor pathway inhibitor (TFPI) in pregnancy hypertension. METHODS: Using enzyme-linked immunosorbent assays, hemostatic measurements were obtained for women with pre-eclampsia (n=51), nonproteinuric hypertension of pregnancy (n=62), postpartum pre-eclampsia 24 h after childbirth (n=31), and no hypertension (healthy pregnant controls, n=100). RESULTS: There was a significant increase in circulating free TFPI levels in women with pre-eclampsia (9.7+/-6.2 ng/mL) or nonproteinuric hypertension of pregnancy (8.3+/-5.3 ng/mL) compared with healthy controls (5.3+/-2.1 ng/mL). In women with pre-eclampsia the levels remained elevated after placental delivery (10.6+/-4.0 ng/mL). Free protein S levels were significantly higher in women with pre-eclampsia (40.0%+/-10.7%), nonproteinuric hypertension of pregnancy (37.1%+/-12.5%), or postpartum pre-eclampsia (39.3%+/-9.1%) than in healthy pregnant controls (32.2%+/-8.5%). CONCLUSION: Increased levels of the physiologically active free forms of TFPI and free protein S, 2 coagulation inhibitors, may protect women with pregnancy-induced hypertension from the risks of hemostatic activation. 相似文献
17.
目的探讨过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)的特异性激活物亚油酸对HepG2细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)mRNA表达及其活性的影响和在该基因转录调控中的作用机制.方法用不同浓度亚油酸为诱导因素刺激HepG2细胞,采用半定量RT-PCR法检测PAI-1mRNA水平,发色底物法检测PAI-1的活性变化.构建四个含PAI-1启动子序列从-804~+17间不同长度片段驱动的荧光素酶报告基因质粒,体外瞬时转染HepG2细胞,检测荧光素酶的活性.结果与对照组相比,亚油酸组能使HepG2细胞PAI-1mRNA表达及蛋白活性显著升高(P<0.05,P<0.01),且呈一定剂量依赖性;亚油酸诱导可使PAI-1转录活性显著升高(P<0.01);与转染质粒PAI-pGL3-A(-804/+17)相比较,当转染质粒含有PAI-pGL3-B(-636/+17)、PAI-pGL3-C(-449/+17)时,荧光素酶活性显著降低(P<0.01);共转染PPARα表达质粒(PPARα-pSG5)的细胞在亚油酸诱导下PAI-1转录活性显著升高(P<0.01).结论亚油酸可以增加HepG2细胞PAI-1mRNA表达及其蛋白活性,调节PAI-1的基因转录,PPARα参与亚油酸对PAI-1基因的表达调控;在PAI-1启动子-804~-636、-449~-276区域内存在亚油酸作用的调控PAI-1基因表达的序列. 相似文献
18.
目的探讨非诺贝特对培养的兔脂肪细胞表达组织因子(TF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的影响.方法取正常兔脂肪组织分离培养脂肪细胞,以不同浓度(分别为0,1,10和100μmol/L)非诺贝特孵育兔脂肪细胞24 h后收集细胞.RT-PCR测定脂肪细胞TF和PAI-1 mRNA表达.用ELISA方法测定TF和PAI-1浓度.结果不同浓度非诺贝特均可抑制兔脂肪组织细胞TF和PAI-1的表达和蛋白产生,其抑制作用呈浓度依赖性增强.在非诺贝特10μmol/L培养时兔脂肪细胞TF和PAI-1 mRNA分别为(0.504±0.016)和(1.500±0.096),明显低于对照[分别为(0.579±0.018)和(1.607±0.063),均P<0.01].在非诺贝特100μmol/L培养时兔脂肪细胞TF和PAI-1 mRNA分别为(0.451±0.023)和(1.269±0.084),与对照比显著降低(均P<0.001).结论非诺贝特能抑制兔脂肪细胞TF和PAI-1 mRNA和蛋白的表达,提示非诺贝特可能具有独立于降脂作用外的抗血栓作用. 相似文献
19.
高脂血症对血浆t-PA和PAI-1活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨高脂血症患者的纤溶系统的变化。方法 选取正常人及高脂血症者,测定其血脂、血浆t—PA和PAI-1活性。结果 高脂血症组比正常人血浆t—PA活性下降,而PAI-1的活性有升高;在TG及LDL-C升高者,其血浆t—PA活性比正常人血浆t—PA活性降低,而血浆PAI-1活性比正常人升高;单纯TC升高者血浆PAI-1活性接近正常人组,而血浆t—PA活性比正常人组明显降低。结论 高脂血症对纤溶系统有一定的影响,其中甘油三酯和LDL-C对纤溶系统的影响更明显,而胆固醇对纤溶系统也有一定的影响。 相似文献
20.
纤溶酶原激活剂抑制物-1及其基因多态性与急性心肌梗死的相关性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)活性及其等位基因多态性与急性心肌梗死(AMI)之间的关系,从基因水平揭示AMI发病的危险因素。方法:AMI组55例、对照组48例健康者分别应用特异性寡核苷酸点膜杂交技术,进行PAI-1启动子区4G/5G多态性分析,用发色底物法测定血浆PAI-1活性。结果:AMI组和对照组中4G/4G基因型的血浆PAI-1活性水平最高,与4G/5G基因型、5G/5G基因型比较有显著性差异(P<0.01)。AMI组中4G/4G纯合子基因型频率明显高于对照组(P<0.05)。结论:血浆PAI-1活性增高是AMI发病的危险因素之一,4G/4G纯合子基因型是AMI发病的危险基因型。 相似文献