肺动脉平滑肌细胞上TMEM16A的表达及其阻滞剂对细胞增殖的作用

目的：研究TMEM16A在大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)上的表达及其阻滞剂(T16Ainh-A01)对PASMCs增殖的作用。方法组织块贴壁法分离正常大鼠PASMCs,原代培养。光镜下观察细胞形态,细胞免疫化学和细胞免疫荧光进行鉴定。细胞免疫荧光检测TMEM16A在PASMCs上表达。原代培养的3~6代PASMCs分别在10μmol/L T16Ainh-A01、20μmol/L T16Ainh-A01和50μmol/L T16Ainh-A01下培养24 h,用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜下PASMCs以长梭形为主,细胞核卵圆形,部分细胞重叠区域呈典型的“峰-谷”状结构。免疫学检测显示胞浆内与细胞长轴平行的肌丝被染成棕黄色,标记肌丝的红色荧光也与细胞长轴平行,标记细胞膜上的TMEM16A的绿色荧光可见表达,而细胞核不染色。CCK-8实验检测,相对于对照组,10μmol/L T16Ainh-A01组细胞活力均数为(96.74±0.92)%,20μmol/L T16Ainh-A01组均数为(92.21±1.25)%,50μmol/L T16Ainh-A01组均数为(87.41±3.27)%,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论正常大鼠PASMCs表达TMEM16A;T16Ainh-A01可抑制PASMCs增殖,其抑制作用呈浓度依赖性;TMEM16A可能参与调控PASMCs增殖。     

小鼠粒-单系祖细胞体外培养的扫描电镜观察

用液体法培养了小鼠的GFU—GM,并对培养不同时间的集落细胞进行扫描电镜观察。CFU—GM在分化成熟过程中有如下特点:(1)粒系细胞集落细胞表面由粗糙变光滑,主要变化在其表面的微绒毛。(2)单系细胞集落在培养早期成团,细胞表面光滑,4天后变粗糙,形状由规则变成多形性,由大小均匀至大小不一;培养中期有伪足形成.(3)同一集落位于中心的细胞较周边细胞幼稚.同时还发现粒细胞集落基底多存在一个贴壁细胞.     

法律理念之动物文化解读

动物与法历来有着文化上的不解之缘。在中外法律思想史上 ,人们喜用各种动物以及相关的故事来阐发自己的法律思想和主张 ,用形象有趣的譬喻箴言来解说深奥艰涩的法学理念。有的作象征式解说 ,有的作寓言式的解说 ,有的作隐喻式解说 ,这些解说渗透到法学本体论、价值论、工具论、目的论、运作论及通变论等各个层面中 ,从而使得法学的理性思维获得一种鲜活的感性语境 ,也形成了一种独特的法律文化。当然 ,这种法律文化也有其黯淡的一面 ,表现为缺乏逻辑实证与规范分析 ,因此我们面对这种文化 ,还应结合法学发展的理性成果去批判地审视它     

责任制整体护理在结直肠外科病房的实现

目的：探讨责任制整体护理在结直肠外科病房的实施的可能性及实施效果。方法：总结责任制整体护理在某三级甲等医院结直肠外科病房的试验实施方案,调查执行该护理模式前后出院患者的满意程度和临床护理质量,并进行统计学分析。结果：试验执行责任制整体护理后,患者对临床护理的满意程度大幅提高,科室的临床护理质量也有显著提升,但是在护理文件整理方面仍有待调整。结论：责任制整体护理模式在结直肠外科病房可以实现,且能提高患者的满意程度和护理质量,深入实施后,能为患者提供更优质的临床护理服务。     

采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究

目的：采用牙本质屏障法对4种常用的牙体充填材料和2种牙本质粘接剂进行细胞毒性试验,并与传统的滤膜扩散法进行比较,从而探讨牙本质屏障法的优势。方法：选取丁香油水门汀、磷酸锌水门汀、粘结用玻璃离子水门汀、复合树脂和两种自酸蚀粘接剂（REMI BOND与Adper Easy One）进行试验。牙本质屏障法中将L929细胞立体培养于聚苯乙烯网状支架上,切取人第三磨牙近髓牙本质片,用液压通透装置测量其通透性,选取试验区域内通透值相近的牙本质片进行试验。将长满细胞的网状支架置于细胞培养分隔灌注小室的“牙髓腔”,牙本质片（“牙髓面”）紧贴网状支架放置其上,试验材料和对照与牙本质片的“面”接触24 h后用MTT法测量细胞的光密度值（D_{540 nm}）,试验材料与阴性对照光密度值的百分比为材料的相对细胞存活率。使用非参数检验对结果进行统计学分析。滤膜扩散法中材料与有单层细胞生长的滤膜接触24 h后进行细胞染色、评级。结果：近髓牙本质片的平均通透值为0.293 μL/(min·cm²·cmH₂O)（1 cmH₂O=0.098 kPa）。牙本质屏障法中,丁香油水门汀降低细胞存活率至82%,REMI BOND与Adper Easy One分别降低细胞存活率至63%和54%,其余材料对细胞无损伤或损伤很低;滤膜扩散法中,光固化复合树脂为中度细胞毒性、牙科粘接用玻璃离子水门汀为轻度细胞毒性,其余材料均为重度细胞毒性;6种材料在牙本质屏障法中表现的细胞毒性明显低于滤膜扩散法的试验结果。结论：使用牙本质屏障法测得材料与三维培养的细胞接触后的细胞毒性比使用滤膜扩散法时的细胞毒性低,结果与临床实际相关性好。     

Ⅱ型胶原酶消化时间对兔软骨细胞生物学特性的影响

目的：探索Ⅱ型胶原酶消化法分离兔肋软骨细胞的最佳消化时间。方法取3月龄新西兰大白兔肋软骨组织,采用0．2％Ⅱ型胶原酶分别消化4、8、12、16、20 h ,对应为A、B、C、D、E组,获取细胞后进行培养。通过比较5组P2代软骨细胞在形态、增殖速度、细胞内基质分泌等方面的差异,选择合适的消化时间。结果 C、D、E组获取的原代软骨细胞数量比A、B组多;C、D组P2代软骨细胞增殖能力强于其他3组;C、D组P2代细胞内基质分泌情况最佳。结论Ⅱ型胶原酶最佳消化时间为12～16 h ,获取的原代软骨细胞数量多,活性率较高,增殖能力强,P2代软骨细胞表型良好。     

改良的大鼠肝星状细胞分离方法

目的：探讨一种简便、高产的大鼠肝星状细胞（HSC）分离方法,为研究肝细胞相关实验提供细胞原材料。方法：应用悬浮缓冲液校正Nycodenz密度梯度分离液,使其浓度为11．3％（w／v）,采用单层一步梯度离心法分离HSC。采用台盼蓝染色排斥法鉴定细胞活率,desmin免疫细胞化学染色法鉴定HSCs纯度。结果：肝星状细胞得率每只大鼠约（4．0±0．5）×10^7个,细胞活力达到90％,细胞纯度达到95％。结论：本法简便、高产,是一种理想的分离肝星状细胞的方法,值得推广。     

神经内科创建“优质护理服务示范病房”的实践

目的 探讨在神经内科创建“优质护理服务示范病房”的有效做法.方法 以执行APN排班制、实行层级护理管理模式、细化基础护理和建立健全绩效考评机制等为重点,以此为患者提供优质护理服务.结果 创建“优质护理服务示范病房”前、后患者基础护理落实率、陪护率及患者满意度,相互间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;患者投诉次数明显减少.结论 “优质护理服务示范病房”创建活动是时代发展的客观要求,其能有力推动护理质量的全面提升,树立优质护理服务品牌,实现让患者满意、社会满意和政府满意.     

早产儿视网膜病变筛查的护理

目的探讨早产儿视网膜病变(ROP)筛查的护理及配合。方法对2008年4月至2009年4月287例早产儿用双目间接检眼镜结合眼底成像系统进行眼底筛查、随访。结果287例早产儿中,有30例发生ROP,发生率为10.45%。结论ROP发病率高,应加强宣教、及时筛查、早期发现、早期治疗。检查前做好各项准备工作,充分散瞳;检查时固定好患儿头部,密切观察患儿病情;检查后做好随诊指导。有效的护理配合对ROP的筛查及随访具有重要意义。     

炭素纤维人工食管材料对体外培养细胞的影响

本文报道了应用细胞培养方法研究炭素纤维人工食管材料对细胞的毒性作用。实验结果表明,该材料对于体外培养细胞的形态、细胞的增殖等方面均无不良影响及毒性作用,从而为炭素纤维人工食管材料的应用提供了细胞学根据。