稳定表达nucleostemin—siRNA的肿瘤细胞克隆的筛选和鉴定

目的：用脂质体法建立nucleostemin（NS）基因特异性siRNA阳性细胞克隆，为深入研究NS基因在胃癌细胞增殖调控中的作用和机制提供理想的生物学模型。方法：试剂盒法将真核表达载体PCDNA4／C—NS—silencer质粒大量扩增，然后以限制性切酶PVUI酶切线性化处理，用LipofectamineTM2000Reagent将PCDNA4／C—NS—silencer及其对照空载体转染胃癌SGC-7901细胞，经Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定细胞克隆外源基因整合阳性。结果：经Zeocin抗生素压力筛选后两组细胞均收获多个细胞克隆；PCR结果表明两组细胞克隆外源基因整合阳性。结论：成功建立表达NS～siRNA的胃癌SGC-7901细胞克隆。     

P物质抑制剂辣椒素和bFGF抗体对增生性瘢痕成纤维细胞增殖协同抑制作用的实验研究

目的：探讨P物质抑制剂-辣椒素及bFGF抗体单独或联合使用对体外培养的人体增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法：体外培养12例增生性瘢痕组织的成纤维细胞,分别加入不同浓度的辣椒素或/和bFGF抗体,培养24h后观察细胞形态学变化,并用MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：所有不同浓度的辣椒素（2.5,5,20,40,60,80mg/L）均能使细胞皱缩、坏死,抑制细胞增殖,其抑制作用随剂量增大而增加。中高浓度bFGF抗体（40,80mg/L）也可促使细胞皱缩、坏死,抑制细胞增殖,其抑制作用也随剂量增大而增加。辣椒素与bFGF抗体联合应用对成纤维细胞抑制作用较单独使用效果更显著（P﹤0.05）。结论：辣椒素及bFGF抗体可抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖,其抑制作用随浓度增加而增加,两者联合使用有协调作用,本研究结果可能在增生性瘢痕的治疗提供新的思路和手段。     

单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造中Ⅳ区皮瓣的取舍

目的探讨单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造术中Ⅳ区皮瓣的取舍。方法通过16例实施单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造术，术中观察皮瓣的皮色、断面出血颜色，并利用近红外血氧监测仪测定皮瓣各区的组织血氧饱和度，决定Ⅳ区皮瓣的取舍。术后观察指标包括术后并发症及美学效果。结果16例中5例Ⅳ皮瓣的肤色正常、断面出血呈鲜红色而非暗红色、组织血氧饱和度不低于Ⅲ区组织血氧饱和度的95％。在接受了保留Ⅳ区皮瓣的单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造术后，再造乳房全部成活，无严重术后并发症，患者对再造乳房均很满意。结论近红外血氧无创检测有助于决定Ⅳ区皮瓣的取舍。有选择地实施保留Ⅳ区皮瓣的单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造术，可用于大面积胸壁缺损或乳腺尾叶的修复重建。     

急性重症胆管炎的介入治疗

目的讨论经皮经肝穿刺放置引流管(简称PTCD)减压引流治疗急性重症胆管炎(简称AOSC)的可行性及疗效.方法 1996年3月～2001年4月行PTCD治疗AOSC病人15例,男10例,女5例,胆石症术后8例,胆管癌2例,胰腺癌3例,胆道畸形2例,其中4例放置了胆道内支架.结果 15例病人技术成功率100%,无1例出现穿刺置管所致的严重并发症.病情缓解后针对病因有8例行手术治疗痊愈,4例不能手术的肿瘤患者植入了胆道内支架,1例于置管后3d死于多脏器功能衰竭,2例置管引流病情稳定后因各种原因放弃继续治疗,保留引流管自动出院.结论 PTCD可有效降低胆管压力,缓解病情,降低AOSC的死亡率,为进一步的病因治疗创造条件.     

HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155真核重组载体构建

目的分别构建人乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白、羧基端截断的中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,以便进一步研究其转录激活功能及对宿主细胞信号传导通路的影响。方法设计合成3对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVX基因、MHBst78与MHBst155编码基因片段;用HindⅢ,KpnⅠ双酶切HBVⅩ基因;用HindⅢ和BamHⅠ双酶切MHBst78与MHBst155编码基因片段后,分别定向插入到真核表达载体pcDNA3.1相应酶切位点,转化宿主菌JM109,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果酶切重组体显示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论成功构建了HBVX基因、羧基端截断的HBV中分子表面蛋白MHBst78、MHBst155编码基因的真核重组表达载体,为进一步研究HBV转录激活蛋白HBx、MHBst78MHBst155对宿主细胞信号转导通路的影响奠定基础。     

盲肠结扎穿刺致豚鼠急性肺损伤动物模型建立

目的 研究败血性急性肺损伤的动物模型，并探讨其在急性肺损伤研究中的意义。方法 用盲肠结扎穿刺(CLP)法的豚鼠急性肺损伤模型，结合动脉血气分析、外周血白细胞计数、肺湿重／干重比值(W／D)及肺组织病理观察。结果 CLP模型中动物的症状和表现缓慢出现，逐渐恶化．最后导致败血性休克，于2d左右出现大量死亡。结论 用盲肠结扎穿刺的方法制作豚鼠急性肺损伤动物模型较大鼠内毒素性休克，表现更类似于人类的肠源性肺损伤，且症状缓慢发生，逐渐恶化，有利于观察和进行各种干预。     

68例社区获得性肺炎病原及临床特征分析

目的　 68例外周血白细胞正常或降低的社区获得性肺炎 (CAP)病原及临床特点分析。方法　检测CAP患者呼吸道及血液标本的常见病原体 ,并分析其临床特点。结果　军团菌属占 2 2 .1 % (1 5/ 68) ,肺炎支原体占 1 1 .8% (8/ 68) ,病毒占 1 6 .2 % (1 1 / 68) ,其中甲型流感病毒 2例、乙型流感病毒 5例 ,副流感病毒 1例 ,腺病毒 1例 ,艾滋病病毒 2例。细菌占 2 .9% (2 / 68) ,有 47.1 % (32 / 68)不能明确病原体 ,混合感染率为 8.8% (6/ 68)。病毒性肺炎、军团菌肺炎及肺炎支原体肺炎的临床症状、体征、外周血白细胞、胸部影像均无特异性 ,其鉴别需靠病原学检查。结论　外周血白细胞正常或降低的CAP病因主要为非典型病原体和病毒 ,对此类CAP的经验治疗应首选大环内酯类抗生素或抗病毒药物。     

瓣膜病合并肝功能不全患者的体外循环管理

目的 回顾52例瓣膜病变合并肝功能不全的行瓣膜置换术的患者，总结体外循环(CPB)经验。方法 CPB采取中度低温，保持较高的灌注压力。预充液加入白蛋白。心肌保护用高钾含血停搏液灌注。结果 结果CPB时间50～135min，主动脉阻断23～98min，心脏自动复跳率94％，无全心辅助和左心辅助，围术期死亡6人。结论 术中加强心肌保护的同时重视肝保护，可减轻术后心功能衰竭和肝功能衰竭，降低并发症和死亡率。     

236例无痛人工流产术的疗效观察

目的:探讨异丙酚和芬太尼混合液静脉麻醉、笑气吸入麻醉及2%利多卡因宫颈局部浸润麻醉三种镇痛方法在人工流产手术中的疗效比较。方法:自2003年8月至2004年1月对236例妇科门诊早孕要求终止妊娠的妇女实施无痛人工流产术。随机分成3组。A组:异丙酚+芬太尼静脉麻醉(85例);B组:N2O(笑气)吸入麻醉(88例);C组:2%利多卡因宫颈局部浸润麻醉(63例),观察人流术中其镇痛效果并对疼痛进行分级。结果:A组85例100%可达到完全不痛(疼痛分级为0级);B组65.90%可达到完全不痛,Ⅰ级23.86%,Ⅱ级9.09%,Ⅲ级1.15%;C组0例可达到完全不痛,Ⅰ级63.49%,Ⅱ级30.16%,Ⅲ级6.35%。结论:受术者如无心肺疾患及人流禁忌证,无痛人工流产术应选择异丙酚+芬太尼静脉麻醉可达到完全无痛,痛苦最小。     

在深静脉血栓—肺栓塞病程中腔静脉滤器的应用价值分析

目的：探讨腔静脉滤器(Vena cava filter VCF)在深静脉血栓(Deep venous thrombosis DVT)—肺栓塞(Pulmonary embolism PE)病程中的应用价值。方法：结合本组25例高危深静脉血栓一肺栓塞患者，对其中24例置放5种构型的永久型或临时型下腔静脉滤器(IVCF)26枚的临床疗效、影响病程与预后因素及病生理改变，复习文献分析讨论。结果：DVT有可能脱落导致PE或致死性肺栓塞；置放IVCF可有效预防肺栓塞，早期进行溶栓治疗，改变预后。结论：严格按适应证植入IVCF，对DVT—PE的早期治疗和预防致死性肺栓塞有重要意义，但其应用价值需进行综合评价和进一步探讨。