液相串联质谱同时测定艾迪注射液中9种成分

目的 建立LC-MS法,同时测定艾迪注射液中斑蝥素,人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁,异秦皮啶,紫丁香苷,芒柄花素,黄芪甲苷及绿原酸9种成分。方法 使用Waters Quattro Micro液质联用仪,色谱柱为Agilent Zorbax SB C₁₈（100 mm×3.0 mm,3.5 μm）;流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;柱温23 ℃;体积流量0.22 mL/min。结果 4个批次艾迪注射液中各成分平均质量浓度分别为（1.88±0.03）、（0.73±0.12）、（0.66±0.28）、（3.13±0.66）、（7.77±0.56）、（21.71±0.64）、（0.46±0.07）、（17.44±1.00）、（108.76±5.86）μg/mL。结论 建立的LC-MS方法,操作简单、快速、灵敏度高,可用于艾迪注射液的质量控制。     

去甲斑蝥素诱导胆管癌细胞凋亡及对bax、bcl-2、半胱天冬酶3和细胞色素C凋亡相关因子影响

目的研究去甲斑蝥素对人胆管癌细胞株RBE细胞抗肿瘤作用及bax、bcl-2、活化半胱天冬酶3和细胞色素C转录及表达的影响,探讨其作用机制。方法体外培养胆管癌RBE细胞,在不同浓度去甲斑蝥素中干预一定的时间,5-二苯基四氮唑溴盐[3-（4,5-dimethylthiazol-2-y1）-2,5-diphenyhetrazoliumbromide,MTr]比色法检测去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞抑制作用,膜联蛋白／碘化丙啶（annexinV／PI）双染检测凋亡率,免疫印迹及实时定量聚合酶链反应检测bax、bcl-2、活化半胱天冬酶3、细胞色素C蛋白及mRNA表达的变化。结果胆管癌RBE细胞经不同浓度的去甲斑蝥素作用后增殖明显受到抑制。AnnexinV-FITC／PI检测显示去甲斑蝥素能诱导RBE细胞凋亡,与对照组相比有更高的凋亡率,差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫印迹及实时定量聚合酶链反应检测显示bax、活化半胱天冬酶3和胞浆内细胞色素C转录和表达升高,bcl-2转录水平降低。结论去甲斑蝥素对胆管癌RBE细胞的增殖具有明显的抑制作用,其可能通过增加bax、抑制bcl-2的转录和表达,释放细胞色素C激活半胱天冬酶3诱导RBE细胞凋亡。     

去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物的HPLC-MS分析

目的 建立去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物的HPLC-MS分析方法。方法 去甲斑蝥素进行体外肝细胞代谢,透析得到代谢产物,并用HPLC-MS对产物进行鉴定,再通过半制备HPLC色谱仪分离纯化,最后根据理化性质和波谱数据鉴定代谢物的结构。结果 共分离得到7个化合物,对其中量较高的2个化合物进行结构鉴定,分别为去甲斑蝥素与谷氨酸结合物（1）、去甲斑蝥酸钠（2）。结论 体外细胞代谢法由于反应条件相对单纯,易于控制,适合于制备去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物。     

内质网应激、自噬与凋亡在斑蝥素致大鼠肝毒性中的作用

目的 探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)致大鼠药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)的毒理学机制。方法 采用不同剂量CTD(0.061 4,0.092 1,0.184 1 mg·kg⁻¹)连续灌胃SD大鼠 28 d,检测肝脏指数和血清肝功能指标,HE 染色评估肝脏病理变化。进一步采用免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)、自噬和细胞凋亡通路蛋白。结果 CTD 干预后肝脏指数显著升高,生化指标ALT、AST、LDH、ALP和T-Bil显著升高, 且呈剂量依赖性,肝脏组织出现结构破坏和中央静脉扩张等病理变化;GRP78、CHOP、ATF4、Beclin-1、LC3、Caspase-3、Caspase-8和Bax/Bcl-2的蛋白表达水平显著升高。分子对接结果显示,GRP78、ATF4和Beclin-1与CTD对接结果良好。结论 CTD可激活大鼠ERS,进一步激活自噬,诱导下游凋亡,研究结果可为CTD诱导的DILI提供新的科学依据。     

羟基喜树碱、斑蝥素联合顺氯氨铂经肝动脉栓塞治疗原发性肝癌48例

我们采用羟基喜树碱、斑蝥素联合顺氯氨铂,与碘化油混合经肝动脉行栓塞灌注,合并大剂量干扰素、白细胞介素等过继免疫方法,治疗手术未能切除的中、晚期肝癌48例。成功地消除了这二种中药制剂全身应用所致血尿、尿痛等不良反应,并取得优于顺氯氨铂与阿霉素、丝裂霉素等常规化学药物栓塞治疗的良好效果。两组病例部分缓解率分别为54.2%、32.1%(P<0.01)。     

Physicochemical Properties and Gastric Mucosa Irritation of Cantharidin-hydroxypropyl-β-cyclodextrin Inclusion Complex

Objective To increase the solubility and relieve the mucous irritation of cantharidin (CA) by preparing cantharidin-hydroxypropyl-β-cyclodextrin (CA/HP-β-CD) inclusion complex. Methods The inclusion complex was prepared by co-evaporation method and characterized by differential scanning calorimetry (DSC), X-ray diffractometry (XRD), and nuclear magnetic resonance (NMR). Results The disappearance of CA as well as the shift of exothermic peaks shown in DSC results indicated the complexation phenomenon. XRD results showed that the crystalline CA pattern had disappeared, and in NMR results, H-5 shifted from δ 3.731 to 3.695 after complexation and H-2 shifted from δ 3.626 to 3.598, which suggested that part of the drug had entered the HP-β-CD cavity to form an inclusion complex. The solubility increased 10.3 times after complexation and the mucous irritation of CA was relieved remarkably. Conclusion Through complexation with HP-β-CD, the solubility and dissolution rate of CA are improved significantly, and the irritation of musous is relieved.     

4-氨基-2-甲基斑蝥胺对惊厥大鼠脑电、γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸受体的影响

 目的 研究4-氨基-2-甲基斑蝥胺（AMC）的抗惊厥作用及对皮层脑电图（EcoG）、γ-氨基丁酸（GABA）和γ-氨基丁酸受体（GABA_B）受体的影响。方法 建立大鼠皮层运动区定位注射青霉素诱发惊厥（PIC）模型,以丙戊酸钠（VPA）为阳性对照,以惊厥潜伏期和Racine分级评定药效,RM6240C型多道生物信号采集处理系统同步记录惊厥大鼠EcoG,分析灌胃AMC（25.0,100.0 mg·kg^-1）后的抗惊厥作用及对EcoG影响。采用免疫组化技术,测定皮层和海马区GABA和GABA_B受体蛋白量的变化。结果 两剂量AMC均能显著减轻大鼠惊厥发作及癫痫样脑电（P<0.01）;小剂量AMC组皮层和海马GABA含量虽然均较正常组和模型组高,但差异无显著性（P>0.05）;海马部位的GABA_B受体蛋白表达量升高(P<0.05),而在皮层部位的表达量虽然较模型组高,但差异无显著性（P>0.05）。VPA组和大剂量AMC组皮层、海马区GABA含量与GABA_B受体蛋白表达量均显著升高 (P<0.05)。结论 AMC可对抗PIC惊厥,抑制痫性放电。抗惊厥作用的机制与提高皮层和海马区的GABA含量和GABA_B受体表达有关。     

液相串联质谱同时测定艾迪注射液中9种成分

目的 建立LC-MS法,同时测定艾迪注射液中斑蝥素,人参皂苷Rg1、Re、Rb1,异秦皮啶,紫丁香苷,芒柄花素,黄芪甲苷及绿原酸9种成分.方法 使用Waters Quattro Micro液质联用仪,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18(100 mm×3.0 mm,3.5 μm);流动相为乙腈-0.1％甲酸,梯度洗脱;柱温23℃;体积流量0.22 mL/min.结果 4个批次艾迪注射液中各成分平均质量浓度分别为(1.88±0.03)、(0.73±0.12)、(0.66±0.28)、(3.13±0.66)、(7.77±0.56)、(21.71±0.64)、(0.46±0.07)、(17.44±1.00)、(108.76±5.86) μg/mL.结论 建立的LC-MS方法,操作简单、快速、灵敏度高,可用于艾迪注射液的质量控制.     

HPLC法测定5个产地斑蝥药材中斑蝥素的含量

目的:测定不同产地斑蝥药材体内不同形态斑蝥素的含量.方法:运用高效液相色谱法测定5个产地斑蝥游离斑蝥素和总斑蝥素的含量.用氯仿提取游离斑蝥素,酸水解提取总斑蝥素.结果:加酸提取后斑蝥中斑蝥素含量显著升高;不同产地斑蝥药材中游离斑蝥素含量接近,平均含量为1.01%,总斑蝥素含量为游离斑蝥素的1.85倍.结论:酸水解处理后...     

斑蝥中斑蝥素的提取工艺研究考察

目的：观察斑蝥中斑蝥素的最佳提取工艺,为临床应用剂型研究提供科学数据。方法：采用L9（3）4正交试验设计考察溶剂浓度、乙醇溶剂用量、回流提取次数、回流提取时间,通过HPLC测定斑蝥素的含量,浸膏得率和评价指标等综合评价确定最佳提取工艺。结果：方差分析可知,用75%的乙醇回流提取3次,每次加入10倍量,每次1.5 h为提取斑蝥中斑蝥素的最佳工艺,其中回流次数是主要影响因素。结论：提取方法简单可行,提取率满意。